• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于HPLC多組分定量測定結(jié)合化學(xué)計量學(xué)的慢支固本顆粒質(zhì)量評價

    2021-03-12 05:33:00姚建華王婧寧趙志國
    實用藥物與臨床 2021年12期
    關(guān)鍵詞:毛蕊升麻異黃酮

    姚建華,趙 博,王婧寧,趙志國,韋 杏,黃 群*

    0 引言

    慢支固本顆粒由黃芪、防風(fēng)、白術(shù)和當(dāng)歸組方而成,主要用于慢性支氣管炎緩解期因肺脾氣虛而出現(xiàn)的乏力、自汗、惡風(fēng)寒、咳嗽、咯痰、易感冒、食欲不振等病癥的治療,對呼吸道細(xì)菌感染、支氣管哮喘具有一定的治療作用[1]。慢支固本顆?,F(xiàn)收載于中國藥典2020年版一部[1],質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)報道僅對其所含的1~2個成分進(jìn)行了定量控制,不能全面地反映制劑的整體質(zhì)量[2]。為更好地保障臨床用藥的穩(wěn)定性和療效一致性,本研究依據(jù)中醫(yī)君、臣、佐、使配伍原則,結(jié)合中藥質(zhì)量標(biāo)志物確認(rèn)原則,采用HPLC法對慢支固本顆粒中8種主要成分的含量同時進(jìn)行測定,以期建立多指標(biāo)的慢支固本顆??刂品椒?,同時采用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件對定量結(jié)果進(jìn)行聚類分析和主成分分析,為全面評價慢支固本顆粒整體質(zhì)量提供科學(xué)數(shù)據(jù)。

    1 儀器與試劑

    1.1 儀器 1100型高效液相色譜儀(美國Agilent公司);KQ-250DB型超聲波清洗器(功率250 W,頻率40 kHz,昆山市超聲儀器有限公司);XS105DU型電子分析天平(精度:0.01 mg,德國Mettler Toledo公司)。

    1.2 試劑 對照品毛蕊異黃酮葡萄糖苷(批號111920-201907,質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.8%,CAS號20633-67-4)、升麻素苷(批號111522-201913,質(zhì)量分?jǐn)?shù)94.6%,CAS號80681-45-4)、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ(批號111978-201501,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.9%,CAS號73030-71-4)、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(批號111975-201501,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.9%,CAS號73069-13-3),購于中國食品藥品檢定研究院;對照品9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(批號PRF8101143,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.1%,CAS號94367-42-7)、芒柄花苷(批號PRF8081121,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.6%,CAS號486-62-4)、毛蕊異黃酮(批號PRF8062601,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.6%,CAS號20575-57-9)、升麻素(批號PRF9092523,質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.7%,CAS號37921-38-3),購于成都普瑞法科技開發(fā)有限公司。慢支固本顆粒(規(guī)格:每袋裝10 g;批號:20190203、20190207、20190211、20190215、20190302、20190501、20190503、20190504、20190506和20190507,編號分別為S1~S10)來源于浙江新光藥業(yè)股份有限公司;乙腈為色譜純,其他試劑為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 溶液的制備

    2.1.1 混合對照品溶液的制備 精密稱取毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對照品各適量,用甲醇制成質(zhì)量濃度分別為0.498、0.264、0.372、0.196、1.498、0.534、0.158和0.112 mg/ml的混合對照品儲備液。精密吸取上述溶液0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml,分別用甲醇定容至20 ml,制成6個系列質(zhì)量濃度線性考察用混合對照品溶液;取中間質(zhì)量濃度混對溶液作為混合對照品溶液(毛蕊異黃酮葡萄糖苷24.9 μg/ml、芒柄花苷13.2 μg/ml、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷18.6 μg/ml、毛蕊異黃酮9.8 μg/ml、升麻素苷74.9 μg/ml、升麻素26.7 μg/ml、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ 7.9 μg/ml、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ 5.6 μg/ml)。

    2.1.2 慢支固本顆粒供試品溶液 取慢支固本顆粒樣品適量,剪開內(nèi)包裝,傾出內(nèi)容物研細(xì),取1.0 g,精密稱定,置25 ml量瓶中,加入甲醇適量,超聲提取30 min,放冷后用甲醇定容,搖勻,濾過,即得。

    2.1.3 陰性樣品溶液 按慢支固本顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項下處方工藝,分別制備缺黃芪、缺防風(fēng)、缺白術(shù)的陰性樣品,再按上述方法制成3種陰性樣品溶液。

    2.2 色譜條件及專屬性試驗 采用Agilent SB C18液相色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動相為乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B),梯度洗脫,見表1;流速為0.9 ml/min;檢測波長:254 nm(0~35 min檢測毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷和升麻素)[3-8]和220 nm(35~55 min檢測白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ)[9-12];柱溫為30 ℃;進(jìn)樣量為10 μl。精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各10 μl,進(jìn)樣檢測并記錄色譜圖(圖1)。結(jié)果理論板數(shù)按各成分色譜峰計均>4 000,8種成分色譜峰分離效果良好,分離度均>1.5,陰性樣品對8種成分同時測定無干擾。

    圖1 HPLC色譜圖

    表1 梯度洗脫程序

    2.3 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.1.1”項下6個系列質(zhì)量濃度線性考察混合對照品溶液適量,依次進(jìn)樣測定慢支固本顆粒中8種目標(biāo)化合物的峰面積,以各成分質(zhì)量濃度(X,μg/ml)為橫坐標(biāo),峰面積(Y)為縱坐標(biāo),得8種目標(biāo)化合物的回歸方程、r值及線性范圍,見表2。

    表2 慢支固本顆粒中8種成分線性關(guān)系

    2.4 精密度試驗 取同一份慢支固本顆粒供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的峰面積,結(jié)果8種目標(biāo)化合物峰面積的RSD分別為0.88%、1.01%、0.95%、1.14%、0.52%、0.79%、1.06%和1.23%。

    2.5 重復(fù)性試驗 取同一批慢支固本顆粒樣品,平行制備6份供試品溶液,依法進(jìn)樣檢測毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的峰面積并計算各成分含量,結(jié)果8種成分含量的RSD分別為1.45%、1.62%、1.30%、1.51%、0.89%、1.08%、1.73%和1.86%。

    2.6 穩(wěn)定性試驗 取同一份慢支固本顆粒供試品溶液于0、2、4、9、18和24 h進(jìn)樣檢測毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的峰面積,結(jié)果顯示,慢支固本顆粒供試品溶液24 h內(nèi)穩(wěn)定,供試品溶液中8種目標(biāo)化合物峰面積的RSD分別為0.90%、1.03%、1.01%、1.12%、0.58%、0.82%、1.11%和1.19%。

    2.7 加樣回收率試驗 取8種成分含量均已知的同一批次慢支固本顆粒樣品適量,傾出內(nèi)容物研細(xì),取9份,每份0.5 g,精密稱定,精密加入根據(jù)8種成分含量另行配制的混合對照品溶液(毛蕊異黃酮葡萄糖苷0.326 mg/ml、芒柄花苷0.198 mg/ml、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷0.262 mg/ml、毛蕊異黃酮0.138 mg/ml、升麻素苷1.074 mg/ml、升麻素0.372 mg/ml、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ 0.108 mg/ml、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ 0.084 mg/ml)0.5、1.0、1.5 ml,再按供試品溶液制備方法制成加樣回收樣品溶液,依法進(jìn)樣測定,計算各成分含量及加樣回收率,結(jié)果見表3。

    表3 慢支固本顆粒中8種成分的回收率實驗結(jié)果

    續(xù)表

    2.8 樣品含量測定 取10個批次慢支固本顆粒樣品,按“2.1.2”項下方法制成供試品溶液,依法進(jìn)樣檢測毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的峰面積,計算8種目標(biāo)化合物含量,結(jié)果見表4。

    表4 樣品含量測定結(jié)果(mg/g)

    2.9 化學(xué)計量學(xué)分析

    2.9.1 聚類分析 為考察不同批次間慢支固本顆粒的含量差異,采用SPSS 26.0軟件組間聯(lián)接聚類分析方法,以歐氏距離為測度,以8種目標(biāo)化合物毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、升麻素苷、升麻素、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ含量為變量,對10個批次慢支固本顆粒樣品進(jìn)行聚類分析,結(jié)果見圖2。由圖2可知,當(dāng)類間距離為15時,10批樣品聚為2類,樣品S2、S5、S4、S1和S3聚為第Ⅰ類,樣品S6、S9、S7、S10和S8聚為第Ⅱ類。從分類結(jié)果可以看出,目標(biāo)化合物含量差異與樣品批次期間相關(guān),可能與慢支固本顆粒生產(chǎn)所用原藥材的產(chǎn)地來源、采收時節(jié)不同以及原藥材的批間質(zhì)量差異有關(guān)。

    圖2 10批慢支固本顆粒聚類分析樹狀圖

    2.9.2 主成分分析 采用SPSS 26.0軟件,以8種目標(biāo)化合物含量為變量,對10個批次慢支固本顆粒含量數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析,得初始特征值和方差貢獻(xiàn)率見表5。

    表5 主成分特征值和方差貢獻(xiàn)率

    由表5可知,按照特征值>1,累積方差貢獻(xiàn)率>85%為提取標(biāo)準(zhǔn),從慢支固本顆粒8種目標(biāo)化合物中提取出前3個主成分進(jìn)行分析評價。由表5可知,升麻素苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、毛蕊異黃酮、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和毛蕊異黃酮葡萄糖苷是對主成分1影響較大的特征向量;升麻素對主成分2貢獻(xiàn)度高,芒柄花苷對主成分3貢獻(xiàn)度顯著。見表6。

    表6 10批慢支固本顆粒主成分分析結(jié)果

    3 討論

    3.1 定量目標(biāo)成分的選擇 慢支固本顆粒由黃芪、防風(fēng)、白術(shù)和當(dāng)歸4味中藥材加工而成,方中黃芪補(bǔ)脾益肺、益氣固表,為君藥;白術(shù)健脾益氣、

    利水止汗,助君藥黃芪補(bǔ)益脾肺,為臣藥;當(dāng)歸補(bǔ)血和血,防風(fēng)祛風(fēng)解表、勝濕止痛,共為佐使藥,諸藥合用,共奏補(bǔ)肺健脾、固表和營之效。本文選取慢支固本顆粒君藥黃芪所含活性成分毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷和毛蕊異黃酮,臣藥白術(shù)所含主要活性成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ,佐藥防風(fēng)所含代表性成分升麻素苷、升麻素為定量測定目標(biāo)成分,以期更加全面地評價慢支固本顆粒的整體質(zhì)量。

    3.2 流動相的優(yōu)化 在流動相優(yōu)化過程中,首先對不同有機(jī)相(甲醇、乙腈)進(jìn)行對比分析,結(jié)果顯示甲醇-水體系[6-8]色譜圖基線不平穩(wěn),部分色譜峰拖尾嚴(yán)重,達(dá)不到定量檢測要求,而乙腈-水體系[11-13]基線稍平穩(wěn),但升麻素苷色譜峰出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。為有效改善峰形,采用乙腈為流動相中有機(jī)相,對不同水相(0.1%甲酸溶液[3-4,14-15]、0.1%磷酸溶液、0.05%磷酸溶液[10,16]、0.2%磷酸溶液)進(jìn)行對比分析,同時對有機(jī)相和水相比例進(jìn)行多次優(yōu)化,最終選擇“2.4”項下的色譜條件。

    中藥及其制劑,尤其是中成藥復(fù)方制劑相比于化學(xué)藥品,質(zhì)量控制方法比較滯后,控制體系尚不完善,制劑生產(chǎn)所用原藥材因種屬來源、產(chǎn)地差異、生長年限、采收季節(jié)等因素影響,造成中藥制劑批間差異較大。從10批次樣品含量測定結(jié)果來看,8種目標(biāo)化合物含量存在一定批間差異,編號S4、S5和S2樣品的8種目標(biāo)化合物綜合含量較高,編號S9和S6樣品綜合含量較低,與聚類分析結(jié)果一致。本實驗采用HPLC法對慢支固本顆粒中8種成分含量同時進(jìn)行測定,建立該制劑多指標(biāo)成分質(zhì)量控制模式,同時采用聚類分析、主成分分析等化學(xué)計量學(xué)手段對測定結(jié)果進(jìn)行綜合評價,有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)不斷完善制劑制備過程參數(shù)控制以及對原藥材內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提升,為慢支固本顆粒質(zhì)量控制體系的建立提供參考。中藥指紋圖譜具有信息量大、特征性強(qiáng)等特點(diǎn),能夠呈現(xiàn)中成藥復(fù)方制劑所含更多化學(xué)成分信息,采用指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計量學(xué)方法對該制劑進(jìn)行綜合評價正在進(jìn)一步研究中。

    猜你喜歡
    毛蕊升麻異黃酮
    毛蕊異黃酮對宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖及凋亡的影響
    升麻的品種考證
    中成藥(2022年7期)2022-12-02 13:12:42
    運(yùn)用血清藥理學(xué)初步探討毛蕊異黃酮苷的血管新生作用
    升麻之思辨及臨床應(yīng)用?
    升麻蜜制工藝的優(yōu)化
    中成藥(2019年12期)2020-01-04 02:02:56
    LC-MS測定黑豆中異黃酮和花色苷的含量
    補(bǔ)肺活血膠囊中毛蕊異黃酮葡萄糖苷、毛蕊異黃酮的測定方法
    HPLC法同時測定天山巖黃芪中4 種異黃酮
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:35
    HPLC測定芪衛(wèi)顆粒中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量
    葛花異黃酮的藥理作用研究進(jìn)展
    尾随美女入室| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲国产av影院在线观看| 天堂8中文在线网| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久久a久久爽久久v久久| av有码第一页| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 观看美女的网站| 狂野欧美激情性bbbbbb| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 少妇人妻 视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲国产成人一精品久久久| 色5月婷婷丁香| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲国产最新在线播放| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久女婷五月综合色啪小说| 精品国产一区二区久久| 亚洲成人手机| 黄色 视频免费看| 久久亚洲国产成人精品v| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 一边亲一边摸免费视频| 9热在线视频观看99| 亚洲第一av免费看| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲精品色激情综合| 国产av国产精品国产| 婷婷成人精品国产| 岛国毛片在线播放| 亚洲国产av新网站| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产色爽女视频免费观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲精品色激情综合| 大香蕉97超碰在线| 日韩欧美一区视频在线观看| freevideosex欧美| 夫妻午夜视频| 99热这里只有是精品在线观看| 考比视频在线观看| 国产精品成人在线| av在线播放精品| 丝袜在线中文字幕| 亚洲经典国产精华液单| 黑人高潮一二区| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产福利在线免费观看视频| 午夜激情久久久久久久| 大香蕉97超碰在线| 赤兔流量卡办理| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 中文字幕最新亚洲高清| 国产精品久久久久久精品古装| 色5月婷婷丁香| 91国产中文字幕| 9色porny在线观看| 999精品在线视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| av免费观看日本| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 免费av不卡在线播放| 精品久久久久久电影网| 在现免费观看毛片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 黄片无遮挡物在线观看| 午夜福利视频精品| 国产乱人偷精品视频| 亚洲成色77777| 国产一区二区在线观看av| 在线观看免费高清a一片| 亚洲精品456在线播放app| 日本黄色日本黄色录像| 色婷婷av一区二区三区视频| 99久国产av精品国产电影| 国产日韩欧美在线精品| 大香蕉久久成人网| 美女内射精品一级片tv| av在线老鸭窝| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美另类一区| 欧美 日韩 精品 国产| 国产一区二区三区综合在线观看 | 乱人伦中国视频| 国产探花极品一区二区| 国产国语露脸激情在线看| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲第一av免费看| 久久久亚洲精品成人影院| 久久久精品94久久精品| 成人二区视频| 国产一区二区激情短视频 | 视频中文字幕在线观看| 乱人伦中国视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 亚洲av.av天堂| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 乱人伦中国视频| 在线天堂最新版资源| 大码成人一级视频| 欧美丝袜亚洲另类| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美国产精品一级二级三级| 亚洲国产成人一精品久久久| 在线看a的网站| 欧美国产精品一级二级三级| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| xxx大片免费视频| 亚洲欧美一区二区三区国产| 99re6热这里在线精品视频| 免费在线观看黄色视频的| av卡一久久| 老女人水多毛片| 在线看a的网站| 久久ye,这里只有精品| 免费看av在线观看网站| 免费高清在线观看日韩| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲精品第二区| 99国产精品免费福利视频| 99热国产这里只有精品6| 最后的刺客免费高清国语| 夜夜爽夜夜爽视频| 日本av免费视频播放| 亚洲成人手机| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 我要看黄色一级片免费的| 久热这里只有精品99| 一区二区三区精品91| 国精品久久久久久国模美| 精品亚洲成国产av| 成人毛片a级毛片在线播放| 两个人看的免费小视频| 十八禁高潮呻吟视频| 永久免费av网站大全| 中国国产av一级| 香蕉精品网在线| 黑丝袜美女国产一区| 精品午夜福利在线看| 一级黄片播放器| 免费看光身美女| 日本wwww免费看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲综合色惰| 亚洲五月色婷婷综合| 久久鲁丝午夜福利片| 国产成人91sexporn| 久久久久网色| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产成人91sexporn| 9热在线视频观看99| 欧美+日韩+精品| 精品久久久久久电影网| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 九九在线视频观看精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 黄片无遮挡物在线观看| 春色校园在线视频观看| 久久av网站| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久精品国产综合久久久 | 综合色丁香网| 男人添女人高潮全过程视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 99久久精品国产国产毛片| 18禁国产床啪视频网站| www.色视频.com| 国内精品宾馆在线| 高清视频免费观看一区二区| 女人精品久久久久毛片| 美女视频免费永久观看网站| 成人毛片60女人毛片免费| 久久综合国产亚洲精品| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲一区二区三区欧美精品| 99九九在线精品视频| 久久这里有精品视频免费| 日韩中字成人| 一二三四在线观看免费中文在 | 国产高清国产精品国产三级| 国产在线一区二区三区精| a级毛片在线看网站| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| av在线app专区| 最新的欧美精品一区二区| 美女福利国产在线| av视频免费观看在线观看| 最新中文字幕久久久久| 精品国产国语对白av| 韩国精品一区二区三区 | 久久国内精品自在自线图片| 久久狼人影院| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 久久国产精品大桥未久av| www.熟女人妻精品国产 | 一边亲一边摸免费视频| 免费黄网站久久成人精品| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲精品久久午夜乱码| h视频一区二区三区| 少妇被粗大猛烈的视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 免费av不卡在线播放| 欧美国产精品一级二级三级| 精品亚洲成国产av| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产在线视频一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 成年人午夜在线观看视频| h视频一区二区三区| 国产精品 国内视频| 精品一区在线观看国产| 国产精品久久久久久久久免| 日韩人妻精品一区2区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费黄网站久久成人精品| 国产免费一级a男人的天堂| 日韩成人av中文字幕在线观看| 日日啪夜夜爽| 欧美日韩视频精品一区| 黄色视频在线播放观看不卡| 大陆偷拍与自拍| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美成人午夜免费资源| 超色免费av| 精品少妇内射三级| 国产成人一区二区在线| 亚洲内射少妇av| 久久久久久久国产电影| 免费高清在线观看视频在线观看| 一本久久精品| 国产欧美亚洲国产| 欧美精品av麻豆av| 成人综合一区亚洲| 亚洲综合色惰| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 1024视频免费在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 中文字幕人妻丝袜制服| 久久人人爽人人爽人人片va| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 免费日韩欧美在线观看| 国产在线免费精品| 丰满乱子伦码专区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美日韩成人在线一区二区| www日本在线高清视频| 国产探花极品一区二区| 国产亚洲最大av| av黄色大香蕉| 婷婷色综合大香蕉| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久国产精品大桥未久av| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲欧洲国产日韩| 韩国av在线不卡| 大陆偷拍与自拍| 亚洲情色 制服丝袜| 午夜影院在线不卡| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产日韩欧美视频二区| 交换朋友夫妻互换小说| 午夜福利影视在线免费观看| 五月开心婷婷网| 亚洲精品国产色婷婷电影| 在线观看一区二区三区激情| 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久久国产电影| 婷婷色综合大香蕉| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品视频女| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 高清视频免费观看一区二区| 伦理电影免费视频| 久久这里有精品视频免费| av片东京热男人的天堂| 熟妇人妻不卡中文字幕| 69精品国产乱码久久久| 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品国产三级专区第一集| 我要看黄色一级片免费的| 成年人免费黄色播放视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲国产av新网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 母亲3免费完整高清在线观看 | 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产又爽黄色视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲少妇的诱惑av| 久久久久久伊人网av| 黄色 视频免费看| 最新的欧美精品一区二区| 国产亚洲精品久久久com| 成人免费观看视频高清| 国产av国产精品国产| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲欧洲日产国产| 人妻 亚洲 视频| 中国三级夫妇交换| 涩涩av久久男人的天堂| 日本vs欧美在线观看视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产精品.久久久| 亚洲欧洲国产日韩| 午夜福利影视在线免费观看| 精品一区二区三卡| 亚洲欧洲国产日韩| 自线自在国产av| 国产一区二区三区av在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美xxⅹ黑人| av不卡在线播放| 久久女婷五月综合色啪小说| 毛片一级片免费看久久久久| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲高清免费不卡视频| 国产精品一区二区在线观看99| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久久久久久久久成人| 国产成人av激情在线播放| 少妇的逼水好多| 一边亲一边摸免费视频| 日本欧美视频一区| 在线观看三级黄色| 成人综合一区亚洲| 夫妻午夜视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 成人影院久久| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国国产精品蜜臀av免费| 国产av一区二区精品久久| 欧美精品国产亚洲| 亚洲第一av免费看| 欧美精品国产亚洲| 人妻 亚洲 视频| 夫妻午夜视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产日韩一区二区三区精品不卡| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲欧洲日产国产| 国产不卡av网站在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 亚洲精品国产av蜜桃| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久人人爽人人片av| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久精品夜色国产| 男女边摸边吃奶| 午夜激情av网站| 午夜福利网站1000一区二区三区| a级毛片黄视频| 天天操日日干夜夜撸| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品久久久久成人av| 精品国产露脸久久av麻豆| 精品国产国语对白av| 国产免费现黄频在线看| 高清不卡的av网站| 亚洲经典国产精华液单| 久久精品国产综合久久久 | av女优亚洲男人天堂| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 大香蕉97超碰在线| 伊人亚洲综合成人网| av女优亚洲男人天堂| 久久久久久久久久久久大奶| 久久久久国产精品人妻一区二区| 丝袜人妻中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 婷婷色综合大香蕉| 亚洲少妇的诱惑av| 国产成人精品婷婷| 精品人妻在线不人妻| 色哟哟·www| 秋霞伦理黄片| 国产视频首页在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国精品久久久久久国模美| 在线天堂中文资源库| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲国产最新在线播放| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品久久久久成人av| 在线看a的网站| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 日本免费在线观看一区| 亚洲国产色片| 一个人免费看片子| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美日本中文国产一区发布| 午夜日本视频在线| av一本久久久久| 欧美成人精品欧美一级黄| 久久久久久久久久久久大奶| 91在线精品国自产拍蜜月| 青春草视频在线免费观看| 一区二区三区精品91| 亚洲欧美清纯卡通| 国产一区二区三区综合在线观看 | 少妇 在线观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产av国产精品国产| 尾随美女入室| 国产成人精品福利久久| 多毛熟女@视频| 久久久国产欧美日韩av| 午夜av观看不卡| 韩国av在线不卡| av网站免费在线观看视频| 热re99久久国产66热| 国产精品不卡视频一区二区| 高清av免费在线| 久久狼人影院| 久久午夜综合久久蜜桃| 看免费成人av毛片| 丰满迷人的少妇在线观看| 18禁观看日本| 999精品在线视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 丰满迷人的少妇在线观看| 午夜影院在线不卡| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产免费视频播放在线视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 日本91视频免费播放| 国产一区二区在线观看日韩| 人妻系列 视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 女性被躁到高潮视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 99九九在线精品视频| 久久人妻熟女aⅴ| 最近的中文字幕免费完整| 波多野结衣一区麻豆| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产成人精品婷婷| 欧美人与善性xxx| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲五月色婷婷综合| 国产一区二区三区av在线| 亚洲图色成人| 久久人人爽人人爽人人片va| 欧美人与善性xxx| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产福利在线免费观看视频| 妹子高潮喷水视频| 女人精品久久久久毛片| 热99久久久久精品小说推荐| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产av码专区亚洲av| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲熟女精品中文字幕| av在线老鸭窝| 成人漫画全彩无遮挡| 国产在线免费精品| 国产精品.久久久| 咕卡用的链子| 国产永久视频网站| 久久久久久久大尺度免费视频| 一区二区av电影网| 久久这里有精品视频免费| 久久久久久久精品精品| 免费观看av网站的网址| 熟女人妻精品中文字幕| 国产熟女午夜一区二区三区| 一级爰片在线观看| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 九草在线视频观看| 日本欧美国产在线视频| 一区二区三区精品91| 老熟女久久久| 亚洲av福利一区| 宅男免费午夜| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 另类精品久久| 桃花免费在线播放| 亚洲人成网站在线观看播放| 国精品久久久久久国模美| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | videos熟女内射| 国产麻豆69| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 日韩精品有码人妻一区| 国产色婷婷99| 国产精品女同一区二区软件| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日本vs欧美在线观看视频| 考比视频在线观看| 久久青草综合色| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久久精品久久久久真实原创| 成年动漫av网址| 日本av手机在线免费观看| 国产av码专区亚洲av| 97精品久久久久久久久久精品| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 黄片播放在线免费| 成年美女黄网站色视频大全免费| a级毛色黄片| 极品人妻少妇av视频| 少妇的逼水好多| 99久久综合免费| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产成人欧美| 国产亚洲欧美精品永久| 免费大片黄手机在线观看| av不卡在线播放| 制服诱惑二区| 男人添女人高潮全过程视频| 久久久久久久精品精品| 男女下面插进去视频免费观看 | 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲国产精品999| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 老司机亚洲免费影院| av免费观看日本| 国产成人精品一,二区| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品久久久久久精品古装| 成人国产av品久久久| 自线自在国产av| 欧美国产精品一级二级三级| 夫妻性生交免费视频一级片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 最近最新中文字幕免费大全7| 深夜精品福利| 国产精品久久久久成人av| 一区在线观看完整版| 日韩电影二区| 嫩草影院入口| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 男女国产视频网站| 熟女电影av网| 黄色 视频免费看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产精品偷伦视频观看了| 老女人水多毛片| 久久热在线av| 免费观看av网站的网址| 久久久久久久大尺度免费视频| 夫妻午夜视频| 99国产综合亚洲精品| 久久99热6这里只有精品| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 最黄视频免费看| 久久婷婷青草| 一区二区三区四区激情视频| 女性生殖器流出的白浆| 成人无遮挡网站| 中文天堂在线官网| 成人二区视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 午夜福利视频在线观看免费| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产高清国产精品国产三级| av.在线天堂| 如何舔出高潮| 国国产精品蜜臀av免费| 国产有黄有色有爽视频| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品三级大全| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品一区二区在线观看99| 久久精品久久久久久久性| 日韩av免费高清视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美 日韩 精品 国产| 多毛熟女@视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产精品久久久久久精品古装| 男女边吃奶边做爰视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 久久午夜福利片| 在线看a的网站| 黄色 视频免费看| 久热这里只有精品99|