雙抗原夾心ELISA檢測(cè)抗HIV的臨床診斷價(jià)值

彭皎（三門峽市中醫(yī)院，河南 三門峽472000）

HIV是誘發(fā)艾滋病的主要病原體，不僅會(huì)破壞機(jī)體免疫系統(tǒng)，降低其免疫力，增加各類感染疾病的發(fā)生率，還會(huì)誘發(fā)惡性腫瘤，甚至威脅患者生命安全。目前，臨床針對(duì)艾滋病無(wú)特效治療方式，也沒有任何能用于預(yù)防艾滋病的有效疫苗［1］。為此，早期檢測(cè)和診斷顯得尤為重要。由于HIV潛伏期較長(zhǎng)且早期癥狀不顯，無(wú)法根據(jù)癥狀進(jìn)行早期判斷，必須結(jié)合實(shí)驗(yàn)室抗HIV抗體變化進(jìn)行診斷，而ELISA和金標(biāo)免疫層析實(shí)驗(yàn)是最常用的檢測(cè)方式。而ELISA又分為多個(gè)類型，而使用較多的為雙抗原夾心法和間接法。但針對(duì)上述診斷方式在抗HIV中的價(jià)值存在較大爭(zhēng)議，部分學(xué)者認(rèn)為［2］，金標(biāo)免疫層析實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性相較于ELISA更高。而有研究顯示［3］，雙抗原夾心ELISA診斷陽(yáng)性率相較于間接ELISA更高。為進(jìn)一步了解其診斷可靠性，本研究將三種不同檢測(cè)方式用于抗HIV診斷中，以此為臨床提供借鑒經(jīng)驗(yàn)。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料25份抗HIV血清由檢驗(yàn)科提供，納入150份對(duì)照組血清為2018年1月～2019年6月我院正常體檢者，其中男83例，女67例，年齡17～59（37.25±2.61）歲。25分抗HIV血清中包括2NCU/ml血清、4NCU/ml血清和室間質(zhì)評(píng)血清。

1.2 方法所有標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)均采用雙抗原夾心ELISA、間接ELISA和金標(biāo)免疫層析法進(jìn)行。ELISA法：雙抗原夾心ELISA和間接ELISA需嚴(yán)格按照試劑相關(guān)操作說(shuō)明進(jìn)行。金標(biāo)免疫層析實(shí)驗(yàn)：準(zhǔn)備金標(biāo)免疫試紙置入檢測(cè)血液中，待浸泡10s后觀察試紙顏色變化，判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：陽(yáng)性：試紙上出現(xiàn)2條紅線；陰性：試紙出現(xiàn)1條紅線，若試紙標(biāo)本顯示為陰性，則觀察者需持續(xù)觀察至少30min，以此避免因?yàn)槠渌蛩赜绊戇M(jìn)而導(dǎo)致其結(jié)果受到影響。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用例（百分率）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 雙抗原夾心ELISA和間接ELISA診斷陽(yáng)性率分析雙抗原夾心ELISA對(duì)觀察標(biāo)本診斷陽(yáng)性率高于間接ELISA，而對(duì)照組標(biāo)本陽(yáng)性較低（P＜0.05）。見表1。

表1 雙抗原夾心ELISA和間接ELISA診斷陽(yáng)性率比較[n（%）]

2.2 雙抗原夾心ELISA和金標(biāo)免疫層析法診斷陽(yáng)性率分析雙抗原夾心ELISA診斷2NCU/m、4NCU/ml和室間質(zhì)評(píng)血清陽(yáng)性率高于金標(biāo)免疫層析法（P＜0.05）。見表2。

2.3 間接ELISA和金標(biāo)層析免疫法診斷陽(yáng)性率分析間接ELISA診斷陽(yáng)性率和金標(biāo)層析免疫法對(duì)比無(wú)明顯差異（P＞0.05）。見表3。

3 討論

艾滋病具有極強(qiáng)的傳染性，其傳播途徑包括血液、母嬰和性傳播等，HIV不僅會(huì)破壞機(jī)體免疫系統(tǒng)，還會(huì)增加多種感染性疾病、惡性腫瘤的發(fā)生率，對(duì)患者身心健康和生命安全產(chǎn)生嚴(yán)重影響［4］?，F(xiàn)階段，雖全世界醫(yī)學(xué)研究者針對(duì)HIV展開大量深入研究，但仍未發(fā)現(xiàn)和研制出能根治艾滋病的藥物及預(yù)防疫苗［5］。為此，加強(qiáng)早期篩查和診斷并做好常規(guī)預(yù)防，對(duì)于保證患者安全有重要意義。

表2 雙抗原夾心ELISA和金標(biāo)免疫層析法診斷陽(yáng)性率比較[n（%）]

表3 間接ELISA和金標(biāo)層析免疫法診斷陽(yáng)性率比較[n（%）]

近幾年，隨著臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，針對(duì)抗HIV檢測(cè)方式逐漸增多，但針對(duì)其可靠性仍存在差異。ELISA是酶免測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用最廣的方法，常見的包括雙抗原夾心法和間接法，前者多用于檢測(cè)大分子抗原，后者則為測(cè)定特異性抗體。ELISA的原理是通過(guò)酶分子和抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，進(jìn)而產(chǎn)生一系列顏色反應(yīng)，而臨床醫(yī)師可以根據(jù)其顯色變化對(duì)其陽(yáng)性或陰性情況進(jìn)行判斷，由于ELISA是建立在抗體和抗原免疫學(xué)反應(yīng)基礎(chǔ)上，所以其具備極高的特異性［6］。此外，因?yàn)槊笜?biāo)記抗原及抗體屬于酶分子和抗原的結(jié)合物，進(jìn)而其能有效地催化底物分子墳塋，進(jìn)而放大其作用，提高診斷敏感性［7］。再者，ELISA試劑本身具有操作簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、自動(dòng)化和快速的特點(diǎn)，可適用于大批量標(biāo)本檢測(cè)，便利性較好。而金標(biāo)免疫層析法是以免疫層析技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)和金納米晶標(biāo)記技術(shù)為基礎(chǔ)的固相檢測(cè)技術(shù)。該種檢測(cè)方式具有簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性強(qiáng)和樣品所需量少的特點(diǎn)。陳笑等［8］將雙抗原夾心ELISA中于抗念珠菌烯醇化酶檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，雙抗原夾心ELISA法檢測(cè)抗念珠菌Eno特異性抗體具有良好的診斷率。而喻甫國(guó)等［9］通過(guò)對(duì)比ELISA法梅毒抗體檢測(cè)與TRUST試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，梅毒診斷中ELISA法敏感性優(yōu)于TRUST法，有助于提高梅毒診斷準(zhǔn)確率，對(duì)梅毒治療及預(yù)后判斷具有至關(guān)重要的作用。徐俊等［10］發(fā)現(xiàn)，ELISA方法進(jìn)行HIV抗體篩查陽(yáng)性率高，但存在一定的假陽(yáng)性率，其陽(yáng)性符合率與S/CO值呈正相關(guān)性。由上述結(jié)果可知，ELISA在早期篩查抗HIV中并非完全準(zhǔn)確，其準(zhǔn)確性只是相較于目前其他檢測(cè)方式更好。為此，臨床早期篩查和診斷需要結(jié)合多種檢查方式，以此保證診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)而確?；颊甙踩?。

綜上所述，將雙抗原夾心ELISA用于抗HIV診斷中具有良好的診斷價(jià)值，值得推廣。