miR-27a-3p靶向HOXA5基因通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控糖尿病患者創(chuàng)面愈合*

葛嘉媛， 溫立霞， 李 勤△

（1廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州510000；2湖北省宜昌市第一人民醫(yī)院，湖北宜昌443000）

糖尿病創(chuàng)面愈合不良是糖尿病患者最常見(jiàn)的并發(fā)癥，擁有較高的發(fā)病率和復(fù)發(fā)率，是世界范圍內(nèi)非創(chuàng)傷性截肢的主要原因［1-2］。然而糖尿病患者傷口愈合不良的原因尚不清楚。血管生成是指從現(xiàn)有血管中生成新的血管，在傷口修復(fù)中起著重要的作用。各種類(lèi)型的細(xì)胞，特別是內(nèi)皮細(xì)胞，有助于血管生成［3］。微小RNA（microRNA，miRNA，miR）是高度保守的內(nèi)源性小的非編碼RNA 分子，長(zhǎng)度在18～25個(gè)核苷酸之間，參與到包括糖尿病傷口愈合在內(nèi)的許多生物過(guò)程［4］，如miR-26a 在糖尿病小鼠創(chuàng)面組織中表達(dá)增多，抑制miR-26a表達(dá)可誘導(dǎo)創(chuàng)面血管的新生和肉芽組織形成，從而促進(jìn)創(chuàng)面愈合［5］。研究表明，miR-27a-3p 的下調(diào)增加了大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞單層的通透性，降低了細(xì)胞的增殖和遷移［6］?？寡苌赏串愋秃谢駻5（homeobox A5，HOXA5）基因的mRNA和蛋白水平均在乙二醛酶1敲除小鼠中升高，沉默HOXA5基因可促進(jìn)主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞遷移和侵襲［7］。Wnt/β-catenin 信號(hào)是高度保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在調(diào)節(jié)血管生成方面發(fā)揮關(guān)鍵作用［8-9］。激活的Wnt/β-catenin信號(hào)通路與糖尿病傷口愈合有關(guān)［10］。然而miR-27a-3p 對(duì)糖尿病創(chuàng)面愈合的影響及機(jī)制尚不清楚?；诖?，本研究利用高糖誘導(dǎo)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞（human microvascular endothe?lial cells，HMECs）模擬糖尿病內(nèi)皮細(xì)胞損傷，考察miR-27a-3p 在內(nèi)皮細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力中的作用，并結(jié)合HOXA5基因和Wnt/β-catenin 信號(hào)通路，初步探討其分子機(jī)制。

材料和方法

1 細(xì)胞和試劑

HMECs 購(gòu)自北納生物公司。內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM 購(gòu)自Sciencell；葡萄糖購(gòu)自Sigma；miR-27a-3p mimic、HOXA5 siRNA（si-HOXA5）、pcDNA-HOXA5及各自陰性對(duì)照序列購(gòu)自廣州銳博生物有限公司；抗HOXA5、細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloprotease 2，MMP2）、MMP9和β 連環(huán)蛋白（β-catenin）抗體及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Ⅱ抗購(gòu)自Abcam。

2 臨床組織標(biāo)本

9 例糖尿病和非糖尿病創(chuàng)面愈合組織標(biāo)本來(lái)自于本院糖尿病患者和志愿者。在無(wú)菌環(huán)境中，切取創(chuàng)面愈合組織標(biāo)本置于液氮保存。所有實(shí)驗(yàn)和方案均獲得患者的知情同意。

3 方法

3.1 細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染與處理 HMECs在內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM 中培養(yǎng)，ECM 培養(yǎng)液包含500 mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基、25 mL 胎牛血清、5 mL 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和5 mL 青霉素/鏈霉素溶液，于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)。轉(zhuǎn)染前，HMECs中加入30 mmol/L的葡萄糖進(jìn)行處理，模擬糖尿病HMECs 損傷，記為高糖（high glucose，HG）組，并以正常培養(yǎng)的細(xì)胞為正常對(duì)照（normal control，NC）組。HMECs 轉(zhuǎn)染時(shí)，按照Lipo?fectamine 2000 試劑說(shuō)明書(shū)的步驟，將miR-27a-3p mimic、si-HOXA5、pcDNA-HOXA5 及各自陰性對(duì)照序列轉(zhuǎn)染至細(xì)胞，并使用30 mmol/L 的葡萄糖進(jìn)行處理。轉(zhuǎn)染48 h后，收集細(xì)胞備用。

3.2 檢測(cè)miR-27a-3p 和HOXA5 mRNA 的表達(dá) 收集糖尿病、非糖尿病創(chuàng)面愈合組織或HMECs，根據(jù)制造商的方案，采用Trizol試劑提取總RNA。然后通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行cDNA 的合成，SYBR Green 試劑盒用于進(jìn)行qPCR 檢測(cè)。得到的數(shù)據(jù)均使用2-ΔΔCt方法進(jìn)行分析。miR-27a-3p 的引物序列為5'-CGC?GTTCACAGTGGCTAAGT-3'（ 正 向）和 5'-GTG?CAGGGTCCGAGGTATTC-3'（反向）；內(nèi)參照U6 的引物序列為5'-CTCGCTTCGGCAGCACA-3'（正向）和5'-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3'（反向）；HOXA5 的引物序列為5'-AGATCTACCCCTGGATGCGC-3'（正向）和5'-CCTTCTCCAGCTCCAGGGTC-3'（反向）；內(nèi)參照β-actin 的引物序列為5'-GGAGATTACTGCCCT?GGCTCCTAGC-3'（正向）和5'-GGCCGGACTCATCG?TACTCCTGCTT-3'（反向）。

3.3 MTT 法測(cè)定細(xì)胞活力 收集各處理組的HMECs，調(diào)整密度為1×108/L，接種到96孔板中，每孔100 μL，培養(yǎng)48 h，每孔加入20 μL MTT 溶液，孵育4 h，加入100 μL 二甲基亞砜，酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm 處的吸光度（A）值，以評(píng)估細(xì)胞活力。細(xì)胞活力（%）=實(shí)驗(yàn)組A值/對(duì)照組A值×100%。

3.4 Transwell 小室法檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力（1）檢測(cè)細(xì)胞遷移：HMECs 用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋后接種于上室，同時(shí)在下室添加500 μL 含胎牛血清的培養(yǎng)基作為引誘劑。于37℃、5% CO2的環(huán)境中孵育24 h。無(wú)菌棉簽?zāi)ㄈザ嘤嗉?xì)胞，加入4%甲醛固定后采用1%結(jié)晶紫染色，置于光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)。（2）檢測(cè)細(xì)胞侵襲：上室用Matrigel 覆蓋，靜置3～4 h，然后將無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的HMECs 接種于上室。后續(xù)步驟與細(xì)胞遷移檢測(cè)步驟相同。

3.5 雙螢光素酶活性檢測(cè)miR-27a-3p 和HOXA5 的靶向關(guān)系 用StarBase（http：//starbase. sysu. edu.cn/）預(yù)測(cè)miR-27a-3p和HOXA5的結(jié)合位點(diǎn)。構(gòu)建含有miR-27a-3p 結(jié)合位點(diǎn)的HOXA5-3'UTR 野生型（HOXA5-WT）及突變型（HOXA5-MUT）報(bào)告基因載體，通過(guò)Lipofectamine 2000 試劑在HMECs 中共轉(zhuǎn)染miR-27a-3p mimic 和野生型及突變型報(bào)告基因載體。48 h后進(jìn)行雙螢光素酶活性的測(cè)定。

3.6 Western blot 測(cè)定HOXA5、cyclin D1、MMP2、MMP9 和β-catenin 的蛋白表達(dá) HMECs 總蛋白的提取使用RIPA 緩沖液進(jìn)行，并通過(guò)二喹啉甲酸（bicin?choninic acid，BCA）蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒量化提取的蛋白。之后吸取等量蛋白，上樣到新鮮制備的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，SDS-PAGE）凝膠的每個(gè)泳道中，以分離蛋白。2 h 后將膠上蛋白轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜上。PVDF 膜加入5%脫脂牛奶封閉1 h。然后將膜與抗HOXA5、cyclin D1、MMP2、MMP9 和β-catenin抗體或內(nèi)參照β-actin 抗體4℃孵育過(guò)夜。次日，PVDF 膜放至Ⅱ抗中孵育2 h，用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光試劑顯影，ImageJ 軟件分析，計(jì)算HOXA5、cyclin D1、MMP2、MMP9 和β-catenin 蛋白條帶灰度與β-actin 蛋白條帶灰度的比值。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0 軟件統(tǒng)計(jì)和分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。兩組間數(shù)據(jù)差異比較采用t檢驗(yàn)；多組間數(shù)據(jù)差異比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用SNK-q 檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 糖尿病患者和非糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織中miR-27a-3p和HOXA5的表達(dá)

qPCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，同非糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織相比，糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織中miR-27a-3p 表達(dá)量顯著減少（P＜0.05），而HOXA5的mRNA 和蛋白表達(dá)量顯著增加（P＜0.05），見(jiàn)圖1、表1。

Figure 1. Western blot detection of HOXA5 protein expression.圖1 Western blot檢測(cè)HOXA5蛋白的表達(dá)

表1 糖尿病患者和非糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織中miR-27a-3p和HOXA5的表達(dá)Table 1. The expression of miR-27a-3p and HOXA5 in wound healing tissues of diabetic and non-diabetic patients（Mean±SD. n=9）

2 高表達(dá)miR-27a-3p 對(duì)高糖處理的HMECs 活力、遷移和侵襲的影響

與NC比較，HG誘導(dǎo)后HMECs的miR-27a-3p表達(dá)量顯著減少，細(xì)胞活力、遷移細(xì)胞數(shù)量、侵襲細(xì)胞數(shù)量及cyclin D1、MMP2 和MMP9 的蛋白水平顯著降低（P＜0.05）；與miR-NC+HG 組比較，高表達(dá)miR-27a-3p 明顯增加HG 處 理后HMECs 中miR-27a-3p 表達(dá)量、細(xì)胞活力、遷移細(xì)胞數(shù)量、侵襲細(xì)胞數(shù)量及cy?clin D1、MMP2 和MMP9 蛋白表達(dá)量（P＜0.05），見(jiàn)圖2、表2。

Figure 2. Effects of high expression of miR-27a-3p on the migration and invasion of HMECs treated with high glucose. A：Transwell assay was used to detected the migration and invasion of HMECs；B：Western blot was used to detect the protein expression of cyclin D1，MMP2 and MMP9.圖2 高表達(dá)miR-27a-3p對(duì)高糖處理的HMECs遷移和侵襲的影響

表2 高表達(dá)miR-27a-3p對(duì)高糖處理的HMECs活力、遷移和侵襲的影響Table 2. Effects of high expression of miR-27a-3p on the viabilityy，migration and invasion of HMECs treated with high glucose（Mean±SD. n=9）

3 改變HOXA5 的表達(dá)水平對(duì)高糖處理的HMECs活力、遷移和侵襲能力的影響

與si-NC+HGzu 比較，低表達(dá)HOXA5 明顯降低高糖處理的HMECs 中HOXA5 的蛋白水平，顯著提高細(xì)胞活力、遷移細(xì)胞數(shù)量、侵襲細(xì)胞數(shù)量及cyclin D1、MMP2 和MMP9 蛋 白 表達(dá)量（P＜0.05），見(jiàn)圖3、表3。

高表達(dá)HOXA5 可以部分逆轉(zhuǎn)miR-27a-3p mimic對(duì)HG 處理的HMECs 活力、遷移和侵襲的影響。與miR-27a-3p mimic+pcDNA-NC+HG 組比較，miR-27a-3p mimic+pcDNA-HOXA5+HG 組HMECs 中HOXA5的表達(dá)量明顯增加，細(xì)胞活力、遷移細(xì)胞數(shù)量、侵襲細(xì)胞數(shù)量及cyclin D1、MMP2 和MMP9 蛋白水平顯著降低（P＜0.05），見(jiàn)圖3、表4。

4 miR-27a-3p靶向HOXA5

StarBase 預(yù) 測(cè) 發(fā) 現(xiàn)，HOXA5-3'UTR 中 含 有 與miR-27a-3p 互補(bǔ)的堿基序列（圖4A）。相較于miRNC 與HOXA5-WT 共 轉(zhuǎn) 染，miR-27a-3p mimic 與HOXA5-WT 共轉(zhuǎn)染顯著降低HMECs 的雙螢光素酶活 性（P＜0.05），miR-NC 或miR-27a-3p mimic 與HOXA5-MUT 共轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞雙螢光素酶活性無(wú)明顯影響（圖4B）。Western blot 檢測(cè)結(jié)果表明，同miRNC 相比，轉(zhuǎn)染miR-27a-3p mimic 明顯減少HOXA5蛋白的表達(dá)量，與anti-miR-NC 比較，轉(zhuǎn)染anti-miR-27a-3p 則顯著增加HOXA5 蛋白的表達(dá)量（P＜0.05），見(jiàn)圖4C。

Figure 3. Effects of low expression of HOXA5 on the migration and invasion of HMECs treated with high glucose. A：Transwell assay was used to detected the migration and invasion of HMECs；B：the images of Western blot for determining the protein ex?pression of HOXA5，cyclin D1，MMP2 and MMP9.圖3 低表達(dá)HOXA5對(duì)高糖處理的HMECs遷移和侵襲的影響

表3 低表達(dá)HOXA5對(duì)高糖處理的HMECs活力、遷移和侵襲的影響Table 3. Effects of low expression of HOXA5 on the viability，migration and invasion of HMECs treated with high glucose（Mean±SD. n=9）

表4 高表達(dá)HOXA5可以部分逆轉(zhuǎn)miR-27a-3p mimic對(duì)高糖處理的HMECs活力、遷移和侵襲能力的影響Table 4. High expression of HOXA5 partially reversed the effect of miR-27a-3p mimic on the viability，migration and invasion of HMECs treated with high glucose（Mean±SD. n=9）

Figure 4. miR-27a-3p regulated HOXA5 expression. A：schematic diagram of StarBase predicting the binding of miR-27a-3p mimic and HOXA5；B：detection of luciferase activity；C：Western blot was used to detect HOXA5 protein expression. Meas±SD. n=3. *P＜0.05 vs miR-NC group；#P＜0.05 vs anti-miR-NC group.圖4 miR-27a-3p靶向調(diào)控HOXA5表達(dá)

5 Wnt/β-catenin信號(hào)通路蛋白的表達(dá)

Western blot 檢測(cè)結(jié)果顯示，與miR-NC+HG 組比較，高表達(dá)miR-27a-3p 明顯增加HG 處理的HMECs中β-catenin 蛋白的表達(dá)量（P＜0.05）。與miR-27a-3p mimic+pcDNA-NC+HG組比較，miR-27a-3p mimic+pcDNA-HOXA5+HG 組HMECs 的β-catenin 蛋白水平顯著降低（P＜0.05），見(jiàn)圖5。

Figure 5. Western blot detection of β-catenin protein expression. Meas±SD. n=3. *P＜0.05 vs HG group；#P＜0.05 vs miR-27a-3p mimic+pcDNA-NC+HG group.圖5 Western blot檢測(cè)β-catenin蛋白的表達(dá)

討 論

傷口愈合不良是糖尿病患者嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，占糖尿病患者的15%～20%［11］。目前的臨床治療包括清創(chuàng)、抗生素、血糖控制和活皮等效移植等，主要集中在防止創(chuàng)面擴(kuò)大和感染。雖然這些標(biāo)準(zhǔn)的治療方法可以達(dá)到控制癥狀的目的，但對(duì)于糖尿病創(chuàng)面的有效再生，目前仍缺乏有效的治療方法。不幸的是，10%的糖尿病患者傷口最終會(huì)導(dǎo)致截肢［12］。血管生成是一個(gè)包含多個(gè)步驟的動(dòng)態(tài)過(guò)程，包括基膜和細(xì)胞外基質(zhì)的降解；內(nèi)皮細(xì)胞的刺激、遷移、黏附和增殖；血管重塑和成熟［13］，在胚胎發(fā)生、機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。此外，它在許多病理過(guò)程中是關(guān)鍵的，如糖尿病視網(wǎng)膜病變，傷口愈合和腫瘤的發(fā)生等［14-16］。由于與傷口愈合有關(guān)，越來(lái)越多的研究致力于血管內(nèi)皮細(xì)胞功能涉及的因素的探討。本研究利用高糖模擬糖尿病環(huán)境，發(fā)現(xiàn)高糖抑制HMECs 的細(xì)胞活力、遷移、侵襲能力及增殖相關(guān)蛋白cyclin D1、遷移侵襲相關(guān)蛋白MMP2 和MMP9 的表達(dá)，而miR-27a-3p 對(duì)高糖損傷的微血管內(nèi)皮細(xì)胞的活力、遷移和侵襲能力具有明顯的促進(jìn)作用，為糖尿病創(chuàng)面愈合機(jī)制的深入研究提供了新的見(jiàn)解。

miRNA 在諸如糖尿病，癌癥和慢性傷口等疾病中起關(guān)鍵作用，并且與細(xì)胞遷移、增殖、侵襲和凋亡相關(guān)［17］。資料顯示，miR-27a-3p 作為新型的磷酸二酯酶3a（phosphodiesterase 3a，PDE3A）的調(diào)節(jié)因子在腦血管內(nèi)皮細(xì)胞中發(fā)揮作用［18］。在膠原酶誘導(dǎo)的大鼠腦出血模型中，miR-27a-3p表達(dá)下調(diào)，miR-27a-3p下調(diào)可導(dǎo)致腦出血后腦水腫、血腦屏障破壞、神經(jīng)元丟失和神經(jīng)功能缺損，外源性miR-27a-3p 可能通過(guò)靶向調(diào)控腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞中的水通道蛋白11（aquaporin 11，AQP11）的表達(dá)來(lái)預(yù)防腦出血后并發(fā)癥的發(fā)生［6］。然而少有研究報(bào)道m(xù)iR-27a-3p 在糖尿病傷口愈合中的功能與機(jī)制。本研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織中miR-27a-3p 表達(dá)量明顯減少。功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高表達(dá)miR-27a-3p 明顯增加高糖處理的HMECs 的活力、細(xì)胞遷移數(shù)量、細(xì)胞侵襲數(shù)量和cyclin D1、MMP2 和MMP9 的蛋白表達(dá)量，提示高表達(dá)miR-27a-3p 對(duì)高糖狀態(tài)下的HMECs 具有保護(hù)作用，與前人報(bào)道［6］相符。

miRNA 的主要是通過(guò)與靶mRNA 結(jié)合導(dǎo)致其降解，進(jìn)而引起翻譯抑制或基因激活來(lái)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后基因的表達(dá)。HOX 基因在胚胎發(fā)生過(guò)程中是必不可少的，作為HOX 基因家族一員，HOXA5 基因還調(diào)控血管形成和血管生成，HOXA5驅(qū)動(dòng)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入靜止?fàn)顟B(tài)，從而抑制基礎(chǔ)血管生成［19］。本實(shí)驗(yàn)觀察到，HOXA5 的mRNA 和蛋白表達(dá)量在糖尿病患者創(chuàng)面愈合組織中顯著增加，低表達(dá)HOXA5 明顯增加高糖處理的HMECs 活力、遷移細(xì)胞數(shù)量、侵襲細(xì)胞數(shù)量及cyclin D1、MMP2 和MMP9 蛋白表達(dá)量，與高表達(dá)miR-27a-3p 的作用一致，下調(diào)HOXA5 可以促進(jìn)高糖處理的HMECs 活力、遷移能力和侵襲能力。此前，已有證據(jù)表明，HOXA5 的抑制有助于增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和侵襲能力［7］，與本研究結(jié)果相近。另外，通過(guò)StarBase 預(yù)測(cè)和雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)，將HOXA5 鑒定為miR-27a-3p 的功能性靶標(biāo)。高表達(dá)HOXA5 可以部分逆轉(zhuǎn)miR-27a-3p mimic 對(duì)高糖處理的HMECs 活力、遷移、侵襲及cyclin D1、MMP2 和MMP9 蛋白表達(dá)的作用，表明miR-27a-3p 減輕高糖損傷HMECs 的作用可能是通過(guò)靶向調(diào)控HOXA5 的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。

在糖尿病傷口愈合過(guò)程中，當(dāng)Wnt/β-catenin 信號(hào)傳導(dǎo)的關(guān)鍵組成部分Wnt 和β-catenin 增加時(shí)，表皮細(xì)胞的增殖、分化和遷移會(huì)增強(qiáng)，傷口愈合會(huì)加快［10］。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的miRNA 可以調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin 途徑。Qiao 等［20］報(bào)道了miR-27a-3p 通過(guò)靶向SFRP1 蛋白，調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路，從而促進(jìn)口腔鱗狀細(xì)胞癌干細(xì)胞的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。為了進(jìn)一步研究Wnt/β-catenin 信號(hào)是否參與miR-27a-3p調(diào)節(jié)HOXA5改善糖尿病傷口愈合的作用，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了高表達(dá)miR-27a-3p 對(duì)高糖處理后HMECs 中β-catenin 水平的影響，發(fā)現(xiàn)β-catenin 蛋白表達(dá)量明顯升高。此外，高表達(dá)HOXA5 可以部分逆轉(zhuǎn)miR-27a-3p mimic 對(duì)高糖處理后β-catenin 蛋白表達(dá)的促進(jìn)作用。這些結(jié)果說(shuō)明，miR-27a-3p 可能下調(diào)HOXA5 表達(dá)，增加Wnt/β-catenin 信號(hào)通路活性，從而促進(jìn)高糖處理HMECs的生長(zhǎng)、遷移和侵襲。

綜上所述，miR-27a-3p 在糖尿病創(chuàng)面愈合組織中表達(dá)下調(diào)，高表達(dá)miR-27a-3p 直接靶向HOXA5 基因，并通過(guò)激活Wnt/β-catenin 信號(hào)通路促進(jìn)高糖誘導(dǎo)的微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移和侵襲，從而改善糖尿病患者創(chuàng)面愈合。