腸道菌群的檢測分析在炎癥性腸病活動(dòng)度評估中的應(yīng)用價(jià)值研究

馬琳

北京市大興區(qū)疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科 北京 106211

炎癥性腸病包括潰瘍型結(jié)腸病及克羅恩病，是一種慢性的非特異性的腸道疾病。該病主要累及直腸、結(jié)腸黏膜層及黏膜下層，以慢性、彌漫性、局限性、連續(xù)性為主要特征，大部分患者還伴有腸道外相關(guān)疾病。相關(guān)研究資料指出，隨著居民生活水平的提高，受飲食習(xí)慣等因素的影響，我國炎癥性腸病發(fā)病率逐年升高，以嚴(yán)重影響我國國民的身心健康[1]。炎癥性腸病發(fā)病機(jī)制尚未闡明，患者常伴有腸道菌群失調(diào)，臨床主要通過內(nèi)鏡檢查、病理組織學(xué)檢查結(jié)合患者臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。而炎癥性腸病臨床變現(xiàn)不一，易于其他消化道疾病誤診，無法準(zhǔn)確判斷炎癥活動(dòng)度。有研究報(bào)道指出，腸道菌群結(jié)構(gòu)紊亂會損傷腸道黏膜，進(jìn)而造成腸道上皮細(xì)胞損害，導(dǎo)致機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂，引發(fā)腸道病變[2]。本文旨在研究腸道菌群的檢測分析在炎癥性腸病活動(dòng)度評估中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床診治炎癥性腸病患者提供理論基礎(chǔ)，現(xiàn)研究報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析于2017 年5 月～2020 年5 月大興區(qū)一家二級醫(yī)院消消化內(nèi)科收治的炎癥性腸病的86 例患者的臨床資料，設(shè)為觀察組。其中男46 例，女40 例；年齡22～64 歲，平均年齡（37.54±5.87）歲；根據(jù)疾病活動(dòng)指數(shù)（Sutherland DAI）評分[3]，可分為：緩解期19 例，輕度活動(dòng)期25 例，中度活動(dòng)期22 例，重度活動(dòng)期20 例。觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均經(jīng)影像檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查確診為炎癥性腸??；（2）均符合中華醫(yī)學(xué)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組制定的《炎癥性腸病診斷和治療的共識意見（2018 年，北京）》中關(guān)于炎癥性腸病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；（3）年齡在22～64 歲之間。排除標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)：（1）近期發(fā)生過腸道疾病的患者；（2）近兩周內(nèi)服用過益生菌制劑及他汀類藥物者；（3）妊娠期、哺乳期婦女。取同期在本院進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查，結(jié)果健康者90 例設(shè)為對照組，其中男48 例，女42 例；年齡24～65 歲，平均年齡（48.01±5.94）歲。兩組性別、年齡的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

兩組均與結(jié)腸鏡檢查，自然排出的新鮮糞便標(biāo)本約1g，迅速置入?yún)捬豕迌?nèi)用稀釋液將其稀釋10 倍，取10μL 進(jìn)行預(yù)備接種。將腸桿菌、腸球菌、葡萄球菌、酵母菌列為腸道菌群代表，并放入相應(yīng)的培養(yǎng)基以光岡知足法對細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)，利用細(xì)菌三級鑒定發(fā)將細(xì)菌鑒定到屬的水平，按不同菌種的正常值分為3 個(gè)稀釋度。37℃培養(yǎng)2 天后，檢測上述4 中4 種腸道菌在每克糞便中所含菌落數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo)

采用疾病活動(dòng)指數(shù)（Sutherland DAI）評分[4]對患者活動(dòng)度進(jìn)行評判：緩解期：＜2 分、輕度活動(dòng)期：3～5 分、中度活動(dòng)期：6～10 分、重度活動(dòng)期：11～12 分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究數(shù)據(jù)均采用SPSS22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，腸道菌群數(shù)量的計(jì)量資料采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±S）描述，多組間比較采用F 檢驗(yàn)，兩組比較采用t 檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組腸道菌群數(shù)量 見表2

表1 比較兩組腸道菌群數(shù)量[（）lgCFU/g]

表1 比較兩組腸道菌群數(shù)量[（）lgCFU/g]

2.2 比較不同活動(dòng)期腸道內(nèi)的菌群數(shù)量 見表1

表2 兩組腸道菌群數(shù)量比較[（）lgCFU/g]

表2 兩組腸道菌群數(shù)量比較[（）lgCFU/g]

注：與緩解期比較，aP＜0.05,；與輕度活動(dòng)期比較，bP＜0.05；與中度活動(dòng)期比較，cP＜0.05；與重度活動(dòng)期比較，dP＜0.05。

3 討論

炎癥性腸病病變累及全消化道，會引起患者腹痛、腹瀉、嘔吐等癥狀，近幾年該病發(fā)病率在我國呈逐年升高趨勢。炎癥性腸病患者存在不同程度的菌群失調(diào)為被廣大學(xué)者所認(rèn)可，有不少研究指出，腸道菌群分析對評估炎癥性腸病活動(dòng)度的評估有重要意義[5]。

本研究收集了86 例確診位為炎癥性腸病并進(jìn)行腸道菌群分析的患者進(jìn)行回顧性臨床分析。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者腸道內(nèi)腸桿菌、腸球菌、酵母菌菌群數(shù)量顯著高于對照組（P＜0.05）；兩組葡萄球菌數(shù)量比較差異不大，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這與A Y K[6]等學(xué)者報(bào)道結(jié)果相似，進(jìn)一步證實(shí)炎癥性腸病患者腸道菌數(shù)量更高。分析其原因：糞便中微生物群的數(shù)量具有生理上的穩(wěn)定性，當(dāng)機(jī)體胃腸道出現(xiàn)病變是，糞便菌群可在一定程度上反應(yīng)腸道內(nèi)菌落的異常。因此對炎癥性腸病患者加強(qiáng)完善糞便細(xì)菌學(xué)檢查，為臨床醫(yī)師了解患者腸道菌水平及分布情況的重要途徑，對炎癥性腸病患者制定治療方法有積極意義[7]。

相關(guān)研究指出，腸道菌群組成比例改變情況可作為判定炎癥性腸病患者易感性、疾病嚴(yán)重程度、疾病活動(dòng)性及治療有效性的重要指標(biāo)[8]。本研究對不同活動(dòng)期中的炎癥性腸病患者的腸道菌群數(shù)量進(jìn)行比較，得出：觀察組患者緩解期腸桿菌、腸球菌、酵母菌菌落數(shù)量明顯低于輕、中、重度活動(dòng)期（P＜0.05）；輕度活動(dòng)期上述菌落數(shù)明顯低于中、重度活動(dòng)期（P＜0.05）；中度活動(dòng)期上述菌落數(shù)明顯低于重度活動(dòng)期（P＜0.05），這一研究結(jié)果與既往文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[9]。不同活動(dòng)動(dòng)期的炎癥性腸病患者腸道菌群水平存在明顯差異，且重度活動(dòng)期患者比中、輕度活動(dòng)期患者致病菌數(shù)量增加變化更為顯著，考慮為炎癥性腸病患者腸道菌群失調(diào)所致。而患者腸粘膜屏障功能受損會導(dǎo)致慢性炎癥疾病的發(fā)生。重度活動(dòng)期菌群數(shù)量最多，提示炎癥性腸病患者菌群數(shù)量的增多該病疾病活動(dòng)度密切相關(guān)[10]。但由于本研究中收集的病例數(shù)較少易產(chǎn)生偏倚，且未進(jìn)行前瞻性研究，為進(jìn)一步分析腸道菌群的檢測分析在炎癥性腸病活動(dòng)度評估中的應(yīng)用價(jià)值，今后需多進(jìn)行相關(guān)研究以證實(shí)上述結(jié)論，為臨床治療炎癥性腸病患者提供更有力的指導(dǎo)依據(jù)。

綜上所述，炎癥性腸病患者糞便中內(nèi)腸桿菌、腸球菌、酵母菌菌群數(shù)量比無腸道疾病者高；炎癥性腸病患者腸病活動(dòng)度越高，腸道內(nèi)菌落數(shù)水平越高，提示患者病情越嚴(yán)重。臨床在治療炎癥性腸病患者過程中，可通過加強(qiáng)患者腸道菌群的檢測，以及時(shí)了解腸道菌群變化情況，腸道菌群的檢測對炎癥性腸病的診治有重要意義。