急性白血病患者骨髓象分型與血象和免疫學(xué)分型研究

溫衛(wèi)衛(wèi)

白血病是一組起源于造血干細(xì)胞惡性變的一種惡性腫瘤，其特點(diǎn)是骨髓中有不能控制的白血病細(xì)胞大量增生、分化成熟障礙，凋亡減少，同時(shí)浸潤(rùn)其他組織和臟器，并進(jìn)入外周血中。白血病成熟障礙可阻滯在不同階段，阻滯在細(xì)胞較早階段稱為急性白血?。ˋL）。AL起病急，生存期短，致死率高，需早期及時(shí)救治[1]。根據(jù)受累細(xì)胞系列來(lái)分，急性白血病分為急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）和急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）兩大類，而ALL和AML又根據(jù)細(xì)胞形態(tài)不同分為多個(gè)亞型，不同亞型的患者臨床治療及預(yù)后存在差異，準(zhǔn)確鑒別和診斷是有效救治的關(guān)鍵。除形態(tài)學(xué)分型外，血象檢查與免疫分型檢查也是臨床診斷急性白血病常用方法，以往研究發(fā)現(xiàn)不同亞型的急性白血病實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)存在一定差異[2]。文章現(xiàn)擇取本院近年收治病例，探究急性白血病患者骨髓象分型與血象和免疫學(xué)分型的關(guān)系，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2019年1月-2020年12月收治的60例急性白血病患者進(jìn)行研究。納入標(biāo)準(zhǔn)：成人病例；ALL診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)文獻(xiàn)[3]《中國(guó)成人急性淋巴細(xì)胞白血病診斷與治療指南（2016年版）》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；AML診斷符合文獻(xiàn)[4]《急性髓系白血病治療的專家共識(shí)（第一部分）》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料不全。入選病例中男33例，女27例；年齡最小20歲，最大80歲，平均（39.77±8.42）歲。本研究獲倫理委員會(huì)審批通過(guò)，患者簽署知情同意書。

1.2 方法

所有患者取側(cè)臥位，在髂后上棘進(jìn)行骨髓穿刺，抽取骨髓液。將所取骨髓液制作骨髓涂片，干燥后進(jìn)行瑞士-吉姆薩染色，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及大小，確定形態(tài)學(xué)分型。另外進(jìn)行細(xì)胞免疫學(xué)分型，采用單克隆抗體，利用一系列分化抗原對(duì)細(xì)胞系列、細(xì)胞發(fā)育階段做出判斷。同時(shí)采集患者靜脈血，常規(guī)送檢實(shí)驗(yàn)室。以全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定患者血象指標(biāo)血紅蛋白（Hb）、白細(xì)胞（WBC）和血小板（PLT）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果。

2.1 骨髓象檢驗(yàn)分型結(jié)果

60例患者中，ALL 23例，占比38.33%，AML 37例，占比61.67%?；陲@微鏡檢的細(xì)胞形態(tài)學(xué)結(jié)果，根據(jù)FAB分型，ALL患者中L1型6例（26.09%）、L2型 12例（52.17%）、L3型 5例（21.74%）；AML患者中M1型5例（13.51%），M2型7例（18.92%），M3型13例（35.14%），M4型8例（21.62%），M5型4例（10.81%），M0、M6和 M7病例均為0。

2.2 不同骨髓象分型患者血象指標(biāo)水平比較

ALL患者中L1型、L2型、L3型患者Hb、WBC、PLT水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），AML患者中M3型患者WBC與PLT水平明顯低于M1型、M2型、M4型、M5型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），M1型、M2型、M3型、M4型、M5型患者Hb水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 不同骨髓象分型患者血象指標(biāo)水平比較（±s）

表1 不同骨髓象分型患者血象指標(biāo)水平比較（±s）

*與M1型、M2型、M4型、M5型比較，P＜0.05。

分型 Hb（g/L） WBC（×109/L） PLT（×109/L）ALL L1型（n=6） 52.59±29.76 2.46±1.34 39.83±12.66 L2型（n=12） 54.84±28.40 2.31±1.27 44.91±13.07 L3型（n=5） 51.76±26.82 2.59±1.18 41.25±14.83 F值 0.026 0.076 0.332 P值 0.975 0.927 0.721 AML M1型（n=5） 54.12±27.64 2.88±1.76 39.83±9.82 M2型（n=7） 53.57±28.21 2.81±1.52 42.02±13.25 M3型（n=13） 51.69±24.65 1.39±0.77* 20.86±11.40*M4型（n=8） 52.34±27.08 2.62±1.45 37.52±11.83 M5型（n=4） 54.17±26.39 2.57±1.38 41.89±10.33 F值 0.022 4.632 10.674 P值 0.979 0.017 0.000

2.3 不同骨髓象分型患者免疫學(xué)分型

ALL患者免疫學(xué)分型中陽(yáng)性表達(dá)占比居前三位的抗體依次為CD19（82.61%）、CD68（78.26%）和CD13（69.57%），見(jiàn)表2。AML患者免疫形態(tài)學(xué)中陽(yáng)性表達(dá)占比居前三位的抗體依次為CD33（86.49%）、HLA-DR（83.78%）和CD19（75.68%），見(jiàn)表3。

表2 ALL不同骨髓象分型患者免疫學(xué)分型陽(yáng)性率[例（%）]

表3 AML不同骨髓象分型患者免疫學(xué)分型陽(yáng)性率[例（%）]

3 討論

急性白血病是造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，骨髓中異常原始細(xì)胞和幼稚細(xì)胞大量增值從而抑制骨髓正常造血并侵襲髓外器官。依據(jù)FAB分型標(biāo)準(zhǔn)，ALL分為L(zhǎng)1～L3型，AML分為M0～M7型，本研究中AML占比61.67%，高于ALL，考慮與納入病例為成人有關(guān)，成年患者多易罹患AML，而且臨床以M1～M3型較為常見(jiàn)，其中M3型預(yù)后最好，M6和M7最為少見(jiàn)。

急性白血病患者骨髓象分型與血象檢查可見(jiàn)明顯的細(xì)胞形態(tài)異常，病態(tài)感強(qiáng)烈，反映了急性白血病病理細(xì)胞的增殖和浸潤(rùn)[5]。有研究發(fā)現(xiàn)，急性白血病患者網(wǎng)狀細(xì)胞分化程度低，甚至僅為單核樣網(wǎng)狀與淋巴細(xì)胞，喪失正常吞噬功能[6]。另外，患者巨核細(xì)胞數(shù)量銳減，血小板功能出現(xiàn)異常，可見(jiàn)本病會(huì)破壞細(xì)胞組織，破壞的類型與數(shù)目可以為本病診斷提供重要依據(jù)，主要原因在于急性白血病細(xì)胞破壞異常率高，細(xì)胞病理性損害后會(huì)改變外膜結(jié)構(gòu)[7]。而在本研究中發(fā)現(xiàn)，M3型急性白血病患者的血WBC與PLT水平明顯低于M1型、M2型、M4型、M5型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與文獻(xiàn)[8]報(bào)道結(jié)論相符，提示血象檢查可以為本病分型鑒別診斷提供依據(jù)，可用于初步篩查。

骨髓象形態(tài)學(xué)分型是目前臨床最常用急性白血病分型方法，但是不能夠反映細(xì)胞來(lái)源與發(fā)育階段，臨床應(yīng)用受限，可能導(dǎo)致不典型白血病漏誤診[9]。細(xì)胞免疫學(xué)分型的基礎(chǔ)是利用造血細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞的過(guò)程中出現(xiàn)的一系列免疫表型的變化，某些抗原表達(dá)只見(jiàn)于特定系列的不同發(fā)育階段細(xì)胞上。而異常增生的惡性造血干細(xì)胞會(huì)表達(dá)特異性抗原，通過(guò)免疫學(xué)檢查明確抗原的性質(zhì)及數(shù)量可用于判斷細(xì)胞的來(lái)源與分化程度，從而彌補(bǔ)形態(tài)學(xué)分型的不足，提高鑒別診斷效果[10]，更好地為臨床提供指導(dǎo)。本次臨床研究中，ALL患者免疫學(xué)分型中陽(yáng)性表達(dá)占比居前三位的抗體依次為CD19（82.61%）、CD68（78.26%）和CD13（69.57%），AML患者免疫形態(tài)學(xué)中陽(yáng)性表達(dá)占比居前三位的抗體依次為CD33（86.49%）、HLA-DR（83.78%）和CD19（75.68%），與文獻(xiàn)[11]報(bào)道結(jié)論相符，可以為ALL和AML的臨床診斷提供有價(jià)值的參考。不過(guò)，由于尚未發(fā)現(xiàn)白血病細(xì)胞的特異抗原所以不能區(qū)分正常細(xì)胞和白血病細(xì)胞，只能用于判斷細(xì)胞的系列來(lái)源、分化階段和成熟程度。

同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞遺傳學(xué)方面多數(shù)急性白血病有染色體異常，在分子生物學(xué)方面多數(shù)白血病患者有基因突變、基因重排及融合基因的形成，與白血病發(fā)病機(jī)制、診斷、治療和預(yù)后有密切關(guān)系[12]。

綜上所述，急性白血病患者骨髓象檢驗(yàn)分型與血象檢查和免疫學(xué)分型的聯(lián)合應(yīng)用，可以為急性白血病鑒別診斷及治療方案的設(shè)計(jì)提供有價(jià)值的依據(jù)。