北京特色炮制飲片炒白扁豆仁質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究*

張偉娜，趙穎，李錚

1.北京康仁堂藥業(yè)有限公司，北京 101300；2.北京康美制藥有限公司，北京 102629；3.北京市藥品檢驗(yàn)所，北京 102206

炒白扁豆仁為豆科植物白扁豆的炮制加工品。白扁豆仁炒制后性溫微香，能啟脾和胃，偏于健脾止瀉，用于脾虛泄瀉，白帶過多［1］，是北京地區(qū)特色炮制飲片，為北京地區(qū)習(xí)用品，應(yīng)用較為廣泛。

炮制炒白扁豆仁在歷代本草中有記載。宋代《類編朱氏集驗(yàn)醫(yī)方》載：“炒去皮”；明代《普濟(jì)方》載：“姜汁浸一宿，蒸過，去皮，焙干，微妙”；《奇效良方》載：“姜汁自然汁煮，去皮，炒”；《嬰童百問》載：“姜汁浸，去皮，炒”；《醫(yī)宗粹言》載：“炒熟去殼［2］”?，F(xiàn)代法規(guī)中最早收載于《中華人民共和國藥典》1963年版“白扁豆”的【炮炙】項(xiàng)下，名為“炒扁豆”［3］。在地方炮制規(guī)范中，炒白扁豆仁被收錄在北京、甘肅、山東三地的炮制規(guī)范中［4－6］，主要質(zhì)量控制項(xiàng)為性狀。僅山東省中藥飲片炮制規(guī)范中有顯微鑒別、薄層鑒別、檢查、浸出物等［6］，但研究對象為白扁豆和炒白扁豆，白扁豆仁和炒白扁豆仁參照研究結(jié)果制定。近年來，關(guān)于白扁豆的藥材鑒別、加工炮制、化學(xué)成分、藥理、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究報(bào)道較多［7－13］，但未檢索到關(guān)于炒白扁豆仁的研究。因此，需對炒白扁豆仁進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，以保證北京地區(qū)特色用藥的安全有效穩(wěn)定可控。

研究報(bào)道表明，白扁豆中止瀉的有效成分為派可林酸［14－16］。白扁豆經(jīng)炮制成炒白扁豆仁后健脾止瀉作用增強(qiáng)。因此，選用派可林酸作為炒白扁豆仁的有效成分和指標(biāo)性成分進(jìn)行薄層鑒別研究。通過用《中華人民共和國藥典》2020版四部通則中的方法對炒白扁豆仁檢查項(xiàng)進(jìn)行測定，通過比較白扁豆仁炒制前后不同提取溶劑中浸出物差異，選擇差異較大的溶劑進(jìn)行測定，綜合各項(xiàng)結(jié)果制定炒白扁豆仁的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料

1.1 試藥炒白扁豆仁飲片18批（分別由四家工廠用該廠的大生產(chǎn)設(shè)備按照指定炮制工藝生產(chǎn)，具體信息見表1。炮制工藝為：取凈白扁豆，置沸水鍋內(nèi)，不斷翻動(dòng)，煮至種皮微鼓時(shí)，撈出，搓去種皮，及時(shí)干燥，除去種皮為白扁豆仁。取白扁豆仁，置熱鍋內(nèi)，炒至表面微黃色，偶見焦斑，取出，晾涼。

表1 18批炒白扁豆仁信息

1.2 試劑對照品：派可林酸（中國食品藥品檢定研究院，批號：111751－200601）；乙醇、正丁醇、冰醋酸、甲醇、茚三酮均為分析純；硅膠G薄層板（煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司）。

1.3 儀器JY20002電子天平（上海舜宇恒平）；CPA224S電子分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；CAMAG薄層自動(dòng)點(diǎn)樣儀，CAMAG薄層成像系統(tǒng)，WSZ－200A回旋振蕩器（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），DK－98－IIA型恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）；展開缸、WGL－230B電熱鼓風(fēng)干燥箱（天津泰斯特儀器有限公司）；SX－G30103節(jié)能箱式電爐（馬弗爐）（天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)室電爐有限公司）。

2 方法

2.1 性狀鑒別按照《中華人民共和國藥典》炒白扁豆項(xiàng)下對其鑒別。

2.2 薄層色譜（thim layer chromatography，TLC）鑒別取樣品粉末1.5 g，加稀乙醇10 mL，超聲處理1 h，離心（離心半徑8.5 cm，10 000 r·min－1）10 min，取上清液作為供試品溶液。另取派可林酸對照品，加乙醇制成每1 mL含1.0 mg的溶液。照薄層色譜法（中國藥典2020年版通則0502）試驗(yàn)，吸取上述對照品溶液5μL，供試品溶液10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上（高效板），以正丁醇－冰醋酸－水（8:2:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。

2.3 檢查

2.3.1 雜質(zhì) 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部雜質(zhì)檢查法（通則2301）檢查。

2.3.2 水分 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部水分測定法（通則0832第二法）測定。

2.3.3 灰分 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部灰分測定法（通則2302）測定總灰、酸不溶性灰分。

2.3.4 二氧化硫殘留量 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部二氧化硫殘留量測定法（通則2302）測定。

2.4 浸出物

2.4.1 醇濃度選擇 比較白扁豆仁炒制前后熱浸法水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、無水乙醇作溶劑對飲片質(zhì)量的影響。

2.4.2 不同炮制參數(shù)浸出物比較 取同一白扁豆仁分別用文火和武火炒至表面微黃色，偶見焦斑，取出，晾涼，平行做3份，測定其30%乙醇浸出物含量，比較炒制火候?qū)ζ浣鑫锏挠绊憽?/p>

2.4.3 浸出物測定 按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部浸出物測定法（通則2201）項(xiàng)下醇溶性浸出物測定法的熱浸法對8批炒白扁豆仁浸出物測定，用30%乙醇作溶劑。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法經(jīng)SPSS 20.0數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 性狀鑒別根據(jù)18批炒白扁豆仁飲片性狀描述，確定“2枚子葉多分離，完整者呈扁橢圓形或扁卵圓形。表面微黃色至棕黃色，偶見焦斑，具輕微獨(dú)特焦豆香氣?！币妶D1。

3.2 TCL薄層鑒別18批炒白扁豆浸出物，有3批不合要求，15批炒白扁豆仁供試品色譜中，在與派可林酸對照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。見圖2、圖3。

3.3 檢查18批樣品的雜質(zhì)為0.2% ～2.6%，水分為5.6%～9.4%，總灰分為2.5% ～3.8%，酸不溶性灰分為0.4%～0.5%，二氧化硫殘留量均為0。雜質(zhì)不超過一般飲片的雜質(zhì)限度3%，水分不超過一般飲片的水分限度13%。因此，建議不對雜質(zhì)和二氧化硫殘留量進(jìn)行規(guī)定，將標(biāo)準(zhǔn)定為水分不超過11.0%，總灰分不超過4.0%，酸不溶性灰分不超過1.0%。見表2。

圖1 炒白扁豆仁性狀

圖2 15批炒白扁豆仁薄層鑒別圖

圖3 6批炒白扁豆仁薄層鑒別圖

3.4 浸出物

3.4.1 醇濃度 30%乙醇做溶劑時(shí)，炒白扁豆仁浸出物含量最高，且各炮制品（白扁豆－白扁豆仁－炒白扁豆仁）間差異最大，能夠體現(xiàn)出炮制程度對飲片質(zhì)量的影響。因此，選擇30%乙醇。見圖4。

表2 炒白扁豆仁檢查、浸出物測定結(jié)果 （%）

圖4 不同提取溶劑白扁豆炮制品浸出物

3.4.2 不同炮制參數(shù)浸出物比較 不同炒制火候炮制出的炒白扁豆仁浸出物含量有差異，文火炒制的較武火炒制出的樣品中浸出物顯著提高。63版藥典和各炮制規(guī)范中規(guī)定的炮制火候均為文火，浸出物測定結(jié)果驗(yàn)證了文火炒制的合理性。見表3、圖5。

表3 不同炮制參數(shù)浸出物測定結(jié)果 （%）

圖5 不同炮制參數(shù)浸出物測定結(jié)果

4 討論

傳統(tǒng)的炒制方式為用鐵鍋炒制，人工翻動(dòng)，較易出現(xiàn)焦斑，現(xiàn)在地方標(biāo)準(zhǔn)中的性狀中也均有“具焦斑”的規(guī)定，所以市場上主流商品的炮制工藝為燙斑（武火1～2 min），幾乎每粒炒白扁豆仁都帶有焦斑。4家單位按照給出的工藝用文火炮制時(shí)，由于炮制設(shè)備和炒制溫度、時(shí)間的差異，有的樣品中焦斑極為少見，有的樣品都帶有焦斑?，F(xiàn)階段應(yīng)用較為普遍的炒藥機(jī)為滾筒炒藥機(jī)，翻動(dòng)均勻，炒制出的物料均勻，炒到適宜程度時(shí)火色淺，極少出現(xiàn)焦斑。隨著新型設(shè)備的開發(fā)和應(yīng)用，炒制品不出現(xiàn)焦斑，顏色不加深是主流趨勢，如何確定炮制終點(diǎn)和從性狀上區(qū)別生制品是新的研究方向，對方便臨床調(diào)劑具有重要意義。

對比生產(chǎn)工藝發(fā)現(xiàn)，同一原料低溫長時(shí)間炒制（文火慢炒）所得到的炮制品中浸出物含量較高溫短時(shí)間炒制（武火快炒）所得到的炮制品中浸出物含量略高，能顯著提高浸出物含量。同一廠家中浸出物較低的（13% ～16%），需進(jìn)一步分析原料至成品的各個(gè)環(huán)節(jié)，找出影響浸出物的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

選用樣品為北京地區(qū)4家飲片廠采用不同大生產(chǎn)設(shè)備生產(chǎn)的炒白扁豆仁，具有規(guī)模大，樣品均勻，可重現(xiàn)性高的特點(diǎn)，避免了實(shí)驗(yàn)室自制樣品的人為因素導(dǎo)致的差異。派可林酸為白扁豆、白扁豆仁、炒白扁豆仁中共有成分，炒白扁豆仁中獨(dú)特的成分需進(jìn)一步研究探索。文火慢炒可顯著提高炒白扁豆仁中浸出物含量，其機(jī)制與物質(zhì)轉(zhuǎn)化及療效的關(guān)系仍需進(jìn)一步研究。