楊培民 金廣海 劉義新 王 雷 解 涵 胡宗云
(遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院, 遼寧省水生動(dòng)物病害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,遼寧 遼陽(yáng) 111000)
本研究以瓦氏雅羅魚(yú)和高體雅羅魚(yú)為試驗(yàn)材料,進(jìn)行了自交、正反交苗種繁育試驗(yàn),成功獲得了自交和雜交苗種,并對(duì)比了不同苗種的早期生長(zhǎng)速度,旨在為雅羅魚(yú)苗種繁育和雜交育種提供參考。
瓦氏雅羅魚(yú)和高體雅羅魚(yú)分別引自鴨綠江和額爾齊斯河水系,瓦氏雅羅魚(yú)親魚(yú)全長(zhǎng)(28.00±1.41)厘米,個(gè)體重(275.74±44.72)克;高體雅羅魚(yú)親魚(yú)全長(zhǎng)(29.33±0.47)厘米,個(gè)體重(308.35.74±21.24)克。
催產(chǎn)試驗(yàn)在遼寧省淡水水產(chǎn)科學(xué)研究院試驗(yàn)基地進(jìn)行,挑選“追星”明顯、輕擠腹部有精液流出的雄魚(yú)和腹部膨大松軟的雌魚(yú)分別置于多個(gè) 2 米×1 米×1.5 米網(wǎng)箱內(nèi)暫養(yǎng),水溫為8~14℃,放養(yǎng)密度為10尾/米3。催產(chǎn)采用促黃體素釋放激素(LRH-A2)、絨毛膜促性腺激素(HCG)和馬來(lái)酸地歐酮(DOM)激素組合,雌魚(yú)每千克魚(yú)體重注射15 微克LRH-A2、2 000 單位HCG 和10 毫克DOM,將1 毫升由0.9%生理鹽水配制的激素混合液一次性由胸鰭基部注入體內(nèi),雄魚(yú)劑量減半,親魚(yú)注射激素后返回原網(wǎng)箱內(nèi)暫養(yǎng)。每隔12 小時(shí)檢查1 次親魚(yú),輕壓雌魚(yú)腹部有卵流出時(shí),按自交組(WW、GG)、正交組(WG∶瓦氏雅羅魚(yú)♀×高體雅羅魚(yú)♂)和反交組(GW:高體雅羅魚(yú)♀×瓦氏雅羅魚(yú)♂)分別進(jìn)行人工授精,雌雄親魚(yú)比例為1∶1,之后收集受精卵。本試驗(yàn)分兩批次進(jìn)行,第一批次的受精卵先附著于棕櫚皮上,然后置于 40 目網(wǎng)箱(2 米×1 米×1.5 米)內(nèi)靜水孵化(圖1-A);第二批次受精卵經(jīng)黃泥漿脫黏后置于孵化桶內(nèi)孵化(圖1-B)。兩種孵化方式均在同一池塘內(nèi)進(jìn)行,孵化期間水質(zhì)條件如下,pH 7.8~8.2、溶氧5.2~6.4毫克/升。
圖1 雅羅魚(yú)受精卵網(wǎng)箱孵化(A)和孵化桶孵化(B)
有10%的仔魚(yú)破膜后,將初孵仔魚(yú)和未破膜的卵一同轉(zhuǎn)入 40 目網(wǎng)箱(2 米×1 米×1.5 米)內(nèi)靜水孵化培育。為研究不同組合苗種早期生長(zhǎng)速度,以第一批次繁育的苗種為試驗(yàn)材料,取組合500尾仔魚(yú)置于 40 目網(wǎng)箱(2 米×1 米×1.5 米)中培育30 天,每隔10 天測(cè)量仔魚(yú)全長(zhǎng),每次測(cè)量樣本不低于20 尾。培育期間,苗種在7 日齡時(shí)開(kāi)始投喂品牌微顆粒飼料(S1型),直至試驗(yàn)結(jié)束。
所有數(shù)據(jù)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差由EXCEL2016處理完成;利用SPSS19.0 軟件中的ANOVA 對(duì)受精率和孵化率進(jìn)行方差分析,采用Turkey’s法進(jìn)行多重比較,取P<0.05為差異顯著;此外,按以下公式計(jì)算苗種全長(zhǎng)特定生長(zhǎng)率:
全長(zhǎng)特定生長(zhǎng)率=(lnLt2- lnLt1)/(t2-t1)×100%。
式 中: t1、 t2為 日 齡 ; Lt1、 Lt2分 別 為 t1、 t2時(shí)的全長(zhǎng)。
試驗(yàn)中所用的親魚(yú)均為初產(chǎn)魚(yú),在8~16℃暫養(yǎng)環(huán)境下,瓦氏雅羅魚(yú)雌魚(yú)效應(yīng)期為44.5~52 小時(shí),高體雅羅魚(yú)雌魚(yú)效應(yīng)期為52~75 小時(shí),孵化期在10~14 天(表1)。瓦氏雅羅魚(yú)產(chǎn)卵量為(4 642±348)粒/尾,高體雅羅魚(yú)產(chǎn)卵量為(4 059±397)粒/尾。瓦氏雅羅魚(yú)受精卵卵徑為(2.48±0.10)毫米,略大于高體雅羅魚(yú)受精卵的卵徑。試驗(yàn)中,各組間催產(chǎn)率變幅為62.5%~81.82%,其中以第二批GG 組催產(chǎn)率最高(81.82%),第一批次的WG 組和第二批次的WW 組次之(80%),第一批次GG組催產(chǎn)率最低(62.5%);各組間受精率在78.25%~81.75%,沒(méi)有顯著差異(P>0.05),而孵化率在11.50%~67.75%,采用黏附棕櫚皮后靜水孵化效果顯著低于脫黏后孵化桶孵化(P<0.05)。
各組合仔魚(yú)早期生長(zhǎng)狀況見(jiàn)表2,生長(zhǎng)數(shù)據(jù)表明,WW 和WG 組的初孵仔魚(yú)在7 毫米左右,略大于GG 和GW 組的出孵仔魚(yú)(6.34~6.57)毫米。在同樣培育條件下,WW 仔魚(yú)特定生長(zhǎng)率最高,達(dá)到1.71%,WG仔魚(yú)次之(1.63%),GW仔魚(yú)生長(zhǎng)最慢。
表2 雅羅魚(yú)不同組合所產(chǎn)仔魚(yú)生長(zhǎng)對(duì)比
瓦氏雅羅魚(yú)與高體雅羅魚(yú)自交、正反交組合受精率在80%左右,且不同組合之間沒(méi)有顯著差異,這表明兩種雅羅魚(yú)之間不存在生殖隔離。雅羅魚(yú)人工繁殖時(shí)最低溫度在8℃左右,為達(dá)到較好的催產(chǎn)效果,通常加大激素注射劑量,本試驗(yàn)中摸索出了一個(gè)較適宜的激素組合:15 微克LRHA2+ 2 000 單 位 HCG + 10 毫 克 DOM, 催 產(chǎn) 效 率 在60%~85%,適用于雅羅魚(yú)規(guī)?;庇J芫逊趸谂c孵化溫度成反比,本試驗(yàn)中水溫在8~16℃,雅羅魚(yú)孵化期最長(zhǎng)可達(dá)兩周,這給水霉病的防治帶來(lái)了困難。通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),脫黏孵化效果遠(yuǎn)好于附著基孵化,這可能因?yàn)楦街趸瘯r(shí)死卵感染水霉病后更易感染與之相鄰的好卵,最后造成更多的卵感染水霉,從而降低了孵化率。仔魚(yú)早期生長(zhǎng)數(shù)據(jù)表明,雜交組合(WG、GW)仔魚(yú)大小和生長(zhǎng)速度與各自母本相近,且在早期階段并未表現(xiàn)出雜交優(yōu)勢(shì),是否在魚(yú)種或成魚(yú)階段表現(xiàn)出一定的雜交優(yōu)勢(shì)有待進(jìn)一步研究。池塘生物餌料培育受水溫影響較大,水溫低時(shí)更不易在短時(shí)間內(nèi)培育出足夠多的生物餌料,本試驗(yàn)在仔魚(yú)培育階段采用了全人工飼料替代生物餌料,仔魚(yú)生長(zhǎng)速度和成活率與生物餌料之間沒(méi)有顯著差異(數(shù)據(jù)待發(fā)表),這表明雅羅魚(yú)繁殖時(shí)可用商品化的超微顆粒飼料替代生物餌料。
表1 雅羅魚(yú)不同組合催產(chǎn)、產(chǎn)卵、孵化情況比較
總之,本試驗(yàn)報(bào)道了利用瓦氏雅羅魚(yú)和高體雅羅魚(yú)生產(chǎn)雜交雅羅魚(yú)苗種的方法,并比較了不同組合的仔魚(yú)早期生長(zhǎng)速度,驗(yàn)證了全人工飼料替代生物餌料培育雅羅魚(yú)苗種的可行性,這些數(shù)據(jù)為雜交雅羅魚(yú)苗種繁育提供了參考。