菖蒲郁金湯治療病毒性腦炎

繆亞秀，柯進(jìn)，戴其軍

海安市中醫(yī)院，江蘇海安226600

病毒性腦炎是由病毒侵犯機(jī)體后誘發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染而引起的神經(jīng)內(nèi)科疾病，好發(fā)于小兒和青年，且具有較高發(fā)病率［1］。該病臨床表現(xiàn)以頭痛、發(fā)熱、神志異常等為主，由于起病急、進(jìn)展速度快，重癥患者會(huì)出現(xiàn)嘔吐、抽搐、肌力降低等癥狀，一旦治療不及時(shí)，可能會(huì)發(fā)生腦疝，甚至引起死亡［2］。由于目前尚無(wú)特異性治療方法，臨床治療常采用抗病毒、抗感染及營(yíng)養(yǎng)支持等手段，但部分患者效果一般［3］。近年來(lái)，中藥由于具有廣譜抗病毒的特點(diǎn)，在病毒性腦炎的治療中被廣泛應(yīng)用，并取得了顯著的療效［4-5］。研究發(fā)現(xiàn)，菖蒲郁金湯具有清熱化痰、開(kāi)竅醒神之功，輔助治療病毒性腦炎，能夠有效緩解患者癥狀，改善神經(jīng)功能，但其作用機(jī)制尚不明確［6］。內(nèi)皮糖萼是覆蓋在內(nèi)皮細(xì)胞表面的一種多糖蛋白類復(fù)合物，對(duì)于保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞和維持血腦屏障完整性具有重要作用［7］。研究表明，內(nèi)皮糖萼損傷可引起血腦屏障破壞，在病毒性腦炎的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用［8］。本研究系統(tǒng)觀察了菖蒲郁金湯治療病毒性腦炎的臨床療效，并分析其對(duì)患兒神經(jīng)功能、炎性因子及內(nèi)皮糖萼的影響，初步探討其治療病毒性腦炎的作用機(jī)制，從而為臨床應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇海安市中醫(yī)院2017年12月至2019年10月期間收治的病毒性腦炎患兒150例，采用隨機(jī)數(shù)字表法，平均分為對(duì)照組和觀察組，每組各75例。兩組患兒年齡、性別、病程、臨床體征等基線資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患兒家屬知情并簽署知情同意書(shū)。

表1 兩組患兒一般資料比較例

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)編著《臨床診療指南——神經(jīng)病學(xué)分冊(cè)》中關(guān)于病毒性腦炎相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］；中醫(yī)標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家中醫(yī)藥管理局制定的《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》［10］，并結(jié)合病毒性腦炎患兒的常見(jiàn)臨床癥狀。

1.3 病例納入與排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)，確診為病毒性腦炎；②年齡1～10歲；③病程＜10 d，無(wú)研究藥物過(guò)敏史；④依從性好，配合度高；⑤知情同意，患兒家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往有腦血管病史；②既往有運(yùn)動(dòng)或神經(jīng)功能障礙者；③合并有心腦血管或內(nèi)分泌系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者；④患有嚴(yán)重傳染性疾病者；⑤依從性差，不配合治療者；⑥精神障礙者；⑦對(duì)本研究所用藥物過(guò)敏者。

1.4 治療方法所有患兒在入院后均接受常規(guī)治療，包括抗病毒、抗感染、脫水降顱壓、緩解抽搐、非甾體退熱藥退熱、維持電解質(zhì)平衡等對(duì)癥支持治療。對(duì)照組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予丙種球蛋白，每日靜脈注射1次，連續(xù)使用3 d。觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合菖蒲郁金湯治療，方藥組成：石菖蒲20 g，郁金15 g，梔子20 g，連翹15 g，牡丹皮15 g，天竺黃15 g，竹葉30 g。以上中藥均來(lái)自本院藥房，水煎至200 mL，分早晚兩次溫服，連續(xù)應(yīng)用14 d后，觀察兩組療效指標(biāo)。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 中醫(yī)證候消失時(shí)間觀察并記錄兩組患兒頭暈?zāi)垦?、納呆惡心、神志昏蒙、四肢懈怠及身熱不退等中醫(yī)證候消失時(shí)間。

1.5.2 神經(jīng)功能指標(biāo)分別于治療前后，酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定兩組患兒腦脊液中S100-β蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）及人腦髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）水平。

1.5.3 炎性因子水平采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定兩組患兒治療前后血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis fact-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、IL-17等炎性因子水平。

1.5.4 內(nèi)皮糖萼采用Western blot法測(cè)定治療前后血漿多配體聚糖1（syndecan-1）、乙酰肝素酶1（heparanase-1）、血管生成素受體2（Angiopoietin receptor 2，Tie2）等糖萼損傷標(biāo)志物水平。

1.6 臨床療效判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)療效進(jìn)行判定［10］。①治愈：臨床癥狀完全消失，意識(shí)清醒，腦電圖及腦脊液檢查結(jié)果顯示正常；②顯效：臨床癥狀基本消失，腦電圖及腦脊液檢查明顯改善，輕微后遺癥；③有效：臨床癥狀有所緩解，意識(shí)好轉(zhuǎn)，腦電圖有所改善，腦脊液顯示輕度異常，有后遺癥；④無(wú)效：臨床癥狀無(wú)好轉(zhuǎn)，病情加重或死亡。

有效率＝（治愈＋顯效＋有效）／n×100%

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒臨床療效比較治療后，觀察組治愈28例，顯效28例，有效15例，無(wú)效4例，有效率為94.7%；對(duì)照組治愈20例，顯效29例，有效15例，無(wú)效12例，有效率為84.0%。觀察組有效率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組患兒臨床療效比較例

2.2 兩組患兒治療后中醫(yī)證候消失時(shí)間比較治療后，觀察組頭暈?zāi)垦?、納呆惡心、神識(shí)昏蒙、四肢懈怠及身熱不退消失時(shí)間均明顯低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組患兒中醫(yī)證候消失時(shí)間比較（±s，d）

表3 兩組患兒中醫(yī)證候消失時(shí)間比較（±s，d）

頭暈?zāi)垦＜{呆惡心神識(shí)昏蒙四肢懈怠身熱不退對(duì)照組75 1.71±0.89 3.43±0.93 7.35±1.56 6.91±1.28 3組別n.67±0.88觀察組75 1.29±0.52 2.31±0.78 6.58±1.39 5.82±1.33 2.96±0.76 t值3.529 7.991 3.191 5.114 5.288 P值0.000 0.000 0.002 0.000 0.000

2.3 兩組患兒治療前后神經(jīng)功能指標(biāo)比較治療前兩組患兒腦脊液S100-β蛋白、NSE及MBP水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，兩組患兒S100-β蛋白、NSE及MBP水平均顯著低于治療前（P＜0.05）；且觀察組治療后各指標(biāo)水平顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表4。

表4 兩組患兒治療前后神經(jīng)功能指標(biāo)比較（±s，ng·L-1）

表4 兩組患兒治療前后神經(jīng)功能指標(biāo)比較（±s，ng·L-1）

注：與本組治療前比較，*P＜0.05

組別n S100-β蛋白NSE MBP治療前治療后對(duì)照組75 21.45±2.56 15.74±1.63*21.98±3.19 15.26±2.03*1.76±0.33 0.86±0.13治療前治療后治療前治療后*觀察組75 20.89±2.14 12.88±1.42*22.72±2.98 13.23±1.86*1.84±0.42 0.74±0.11*t值1.453 11.457 1.468 6.385 1.297 6.103 P值0.074 0.000 0.072 0.000 0.098 0.000

2.4 兩組患兒治療前后TNF-α、IL-6、IL-17

水平比較治療前，兩組患兒TNF-α、IL-6、IL-17水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，兩組患兒的TNF-α、IL-6、IL-17水平均顯著低于治療前（P＜0.05）；且觀察組治療后各指標(biāo)水平顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表5。

2.5 兩組患兒治療前后內(nèi)皮糖萼損傷情況比較

治療后，兩組患兒Syndecan-1和Heparanase-1水平均明顯下降（P＜0.05），Tie2水平顯著升高（P＜0.05）；且觀察組的Syndecan-1和Heparanase-1水平顯著低于對(duì)照組，Tie2水平顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)圖1。

表5 兩組患兒治療前后TNF-α、IL-6、IL-17水平比較（±s，μg·L-1）

表5 兩組患兒治療前后TNF-α、IL-6、IL-17水平比較（±s，μg·L-1）

注：與本組治療前比較，*P＜0.05

組別n TNF-α IL-6 IL-17治療前治療后對(duì)照組75 64.25±13.07 42.43±9.54*50.32±9.25 36.66±7.31*37.94±6.85 28.35±5.63治療前治療后治療前治療后*觀察組75 62.89±13.47 31.23±7.44*51.06±8.83 27.88±5.28*38.22±7.08 20.65±4.89*t值0.628 8.017 0.501 8.432 0.246 8.942 P值0.266 0.000 0.309 0.000 0.403 0.000

圖1 兩組患兒內(nèi)皮糖萼損傷情況比較

3 討論

病毒性腦炎是由病毒感染引起的腦實(shí)質(zhì)炎癥，多急性起病，以發(fā)熱、頭痛、嘔吐、意識(shí)障礙、抽搐體征等為主要表現(xiàn)，急重癥者病情兇險(xiǎn)，臨床治療不及時(shí)可使病情加重，引發(fā)永久性神經(jīng)功能障礙，甚至危及生命［11］。目前研究認(rèn)為，病毒性腦炎主要是由腸道病毒、黏液病毒、單純皰疹病毒、腺病毒等通過(guò)各種途徑感染機(jī)體后進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，免疫系統(tǒng)未消滅的病毒，會(huì)通過(guò)血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，感染腦間質(zhì)細(xì)胞及腦神經(jīng)細(xì)胞，進(jìn)而損傷腦實(shí)質(zhì)或腦膜［12］。由于目前缺乏特異性治療方法，臨床治療主要采用對(duì)癥支持治療方法，但部分患兒療效并不理想［13］。

根據(jù)患兒臨床癥狀及病發(fā)誘因，中醫(yī)學(xué)將病毒性腦炎歸為“中風(fēng)”“驚風(fēng)”“癇病”等范疇，病理因素為風(fēng)、痰、熱，治療以清熱化痰、通腑開(kāi)竅為原則［14］。研究發(fā)現(xiàn)，菖蒲郁金湯具有開(kāi)胃化濕、醒腦開(kāi)竅的作用，對(duì)治療病毒性腦炎有較好的臨床效果［15-16］。菖蒲郁金湯主要組成為石菖蒲、郁金、梔子、連翹、牡丹皮、天竺黃、竹葉，石菖蒲味辛、苦，性溫，歸心、胃經(jīng)，具有化濕開(kāi)胃、開(kāi)竅豁痰、醒神益智等功效；郁金味辛、苦，性寒，歸肝、心、肺經(jīng)，可行氣化瘀、清心解郁及利膽退黃；梔子味苦，性寒，具有瀉火除煩、清熱利尿及涼血解毒的作用；連翹味苦，性微寒，具有清熱解毒、消腫散結(jié)的功效；牡丹皮味苦、辛，歸心、肝、腎經(jīng)，可清熱涼血、活血化瘀；天竺黃、竹葉，味甘，性寒，可清熱除煩、生津利尿、涼心定驚。本研究在常規(guī)治療基礎(chǔ)上采用菖蒲郁金湯治療病毒性腦炎，臨床結(jié)果顯示，觀察組治療有效率為94.7%，顯著高于對(duì)照組（84.0%）；觀察組患兒頭暈?zāi)垦?、納呆惡心、神識(shí)昏蒙、四肢懈怠及身熱不退等證候消失時(shí)間均明顯低于對(duì)照組，提示菖蒲郁金湯輔助治療可顯著提高臨床療效，有效緩解患兒癥狀。

神經(jīng)功能的恢復(fù)是評(píng)價(jià)病毒性腦炎治療情況的重要指標(biāo)，其中S100-β蛋白是一種鈣離子蛋白，主要存在于中樞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，腦組織受損后，其會(huì)釋放進(jìn)入腦脊液［17-18］。MBP是神經(jīng)組織所特有的膜蛋白成分，能夠維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定。腦細(xì)胞受損后，MBP首先釋放到腦脊液，然后通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血循環(huán)［19］。NSE主要存在于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，參與人體糖酵解，一旦中樞神經(jīng)受損，可引發(fā)神經(jīng)細(xì)胞壞死，同時(shí)釋放NSE進(jìn)入外周血循環(huán)［20-21］。因此，S100-β蛋白、NSE及MBP水平變化可作為評(píng)價(jià)神經(jīng)功能損傷的重要指標(biāo)，同時(shí)反映病毒性腦炎的治療情況。本研究結(jié)果顯示，與治療前比較，兩組患兒治療后腦脊液S100-β蛋白、NSE及MBP水平均明顯下降，且觀察組治療后各指標(biāo)水平顯著低于對(duì)照組。以上說(shuō)明，菖蒲郁金湯治療病毒性腦炎可以降低患者S100-β蛋白、NSE及MBP水平，促進(jìn)患兒神經(jīng)功能的恢復(fù)。

糖萼是覆蓋于內(nèi)皮細(xì)胞表面朝向血管腔的一層多分子結(jié)構(gòu)，作為內(nèi)皮屏障的重要組成部分，腦細(xì)胞表面的糖萼層對(duì)于維持血腦屏障的完整性具有重要作用。內(nèi)皮糖萼主要是由多配體聚糖1（Syndecan-1）和硫酸乙酰肝素等多種膜蛋白組成，其功能依賴于結(jié)構(gòu)完整［22］。當(dāng)內(nèi)皮糖萼損傷脫落時(shí)，其結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，血漿中Syndecan-1等成分水平增加；Heparanase-1能夠特異性降解糖萼成分硫酸乙酰肝素，從而導(dǎo)致糖萼破壞以及內(nèi)皮環(huán)境失衡［23］。Tie2作為血管生成素受體，是一種與糖萼重建相關(guān)的蛋白，在血管完整性和穩(wěn)定性中具有重要作用，激活Tie2受體，可抑制Heparanase-1的釋放，從而修復(fù)內(nèi)皮糖萼［24］。曹瑞娜等［25］研究發(fā)現(xiàn)，在腎損傷模型中抑制Heparanase-1活性或者激活Tie2受體，可降低血漿Syndecan-1水平，保護(hù)腎血管屏障。本研究結(jié)果顯示，與治療前比較，兩組患兒的Syndecan-1和Heparanase-1水平均顯著下降，Tie2水平明顯升高，且觀察組的Syndecan-1和Heparanase-1水平顯著低于對(duì)照組，Tie2水平顯著高于對(duì)照組。以上提示，菖蒲郁金湯可抑制Heparanase-1水平，激活Tie2受體，從而起到保護(hù)和修復(fù)糖萼層的作用。糖萼損傷部位伴有炎癥反應(yīng)發(fā)生，產(chǎn)生大量炎性因子，炎性因子會(huì)加劇內(nèi)皮細(xì)胞糖萼損傷，引起血腦屏障功能紊亂［26］。本臨床研究顯示，治療前病毒性腦炎患兒體內(nèi)炎性因子水平高，治療后兩組患兒的TNF-α、IL-6、IL-17水平均顯著下降，且觀察組各指標(biāo)水平顯著低于對(duì)照組。結(jié)果表明，菖蒲郁金湯可降低炎性因子水平，進(jìn)而減輕炎性因子對(duì)內(nèi)皮糖萼的損傷，加速內(nèi)皮糖萼修復(fù)，從而提高臨床療效。

綜上所述，菖蒲郁金湯治療病毒性腦炎，臨床療效顯著，有效緩解患兒癥狀，促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)，其作用機(jī)制可能是通過(guò)保護(hù)和修復(fù)受損的糖萼層，并抑制炎性因子的釋放，減輕炎癥對(duì)糖萼的損傷，從而改善血腦屏障功能，達(dá)到治療目的。