復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑制備過(guò)程中的質(zhì)量控制及三組分的含量測(cè)定

陳智偉

復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑是臨床治療皮膚病的常見(jiàn)藥物，主要成分為曲安奈德、水楊酸及氯霉素等[1-2]。但需注意的是，由于復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑由多種組分混合，因而在對(duì)其含量測(cè)定時(shí)，常規(guī)的永停滴定法及比色法已經(jīng)無(wú)法使用。由于各種組分含量對(duì)治療效果影響較大，因而找出測(cè)量復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑三組分的有效手段，并根據(jù)含量制定有效的質(zhì)量控制方法非常重要[3-5]。本研究分析使用高效液相色譜法對(duì)復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑制備過(guò)程中的三組分含量測(cè)定方法，并制定在制備過(guò)程中的質(zhì)量控制手段，具體報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器資料：紫外分光光度儀(日本島津公司生產(chǎn)，UV-240IPC型)，電光分析天平(上海天平儀器廠(chǎng)生產(chǎn)，TG328B型)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科技有限公司生產(chǎn))。

1.1.2 試劑資料：藥物種類(lèi)為曲安奈德(天津太平洋化學(xué)制藥有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)170906)、水楊酸(鎮(zhèn)江前進(jìn)化工有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)170907)和氯霉素(南京白敬宇制藥廠(chǎng)生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)CH170813)。其他原料和輔料均符合藥用標(biāo)準(zhǔn)，使用試劑均為分析純。

1.2 研究方法

1.2.1 處方和制備方法：處方為曲安奈德25 g、水楊酸20 g、氯霉素10 g，甘油100 ml，乙醇500 ml，將純化水加至1 000 ml。制備過(guò)程中，首先按照處方量稱(chēng)取足量曲安奈德、水楊酸和氯霉素，溶于95%乙醇中，并且加入純化水及甘油至足量，過(guò)濾后攪勻即可。

1.2.2 質(zhì)量控制方法：(1)性狀控制。復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑應(yīng)為微黃色或無(wú)色粘稠澄清液體，pH值為4.5～6.5，呈酸性。(2)鑒別方法。曲安奈德鑒別：取復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑15 g，加入甲醇30 ml，充分搖勻，靜置，濾過(guò)。將濾液放置在蒸發(fā)皿中，水浴加熱至體積不再減少后將殘留物轉(zhuǎn)移到試管中，加入甲醇3 ml，加熱溶解。加入溫?zé)釅A性酒石酸試液2 ml混勻，水浴加熱2 h，試管底部出現(xiàn)磚紅色沉淀。水楊酸鑒別：取復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑樣品加入三氯化鐵液1滴，滴入后顯示紫色。氯霉素鑒別：取復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑10 ml，加入鋅粉50 mg和氯化鈣溶液3 ml，水浴加熱10 min，濾過(guò)。將濾液加入苯甲酰氯0.1 ml，強(qiáng)力搖勻1 min，加入三氯化鐵溶液0.5 ml和氯仿2 ml，強(qiáng)力搖勻，水層為紫紅色。取其1 ml加入乙醇制氫氧化鉀溶液1 ml中，水浴加熱15 min，溶液氯化物符合《中國(guó)藥典》一般鑒別項(xiàng)中的鑒別反應(yīng)。

1.2.3 含量測(cè)定：在測(cè)定波長(zhǎng)的選擇方面，首先需分別精密稱(chēng)取干燥的曲安奈德、水楊酸及氯霉素，加入適量乙醇溶解后，加入純化水稀釋。水楊酸為24 μg/ml，氯霉素12 μg/ml，曲安奈德28 μg/ml。將純化水作為空白對(duì)照。在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，得出紫外吸收光譜。通過(guò)對(duì)其紫外吸收光譜分析，將286 nm、296 nm和277 nm作為曲安奈德、水楊酸及氯霉素測(cè)定波長(zhǎng)。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備：在對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行制備過(guò)程中，首先可精密稱(chēng)取干燥曲安奈德250 mg、水楊酸202 mg及氯霉素102 mg，分別使用75%乙醇溶解，并且使用純化水定容到100 ml，將其作為儲(chǔ)備液。分別量取儲(chǔ)備液1.0 ml、1.2 ml、1.4 ml、1.6 ml、1.8 ml、2.0 ml，加入純化水將其稀釋至100 ml。將純化水作為對(duì)照組，在296 nm、286 nm和277 nm測(cè)定波長(zhǎng)位置對(duì)其吸光度進(jìn)行測(cè)量，并計(jì)算線(xiàn)性回歸方程，同時(shí)需通過(guò)回歸方程的方式計(jì)算相關(guān)系數(shù)。

1.2.5 回收率試驗(yàn)：需精密稱(chēng)取干燥曲安奈德200 mg、水楊酸147 mg及氯霉素77 mg，將其混合加入75%乙醇中，并使用純化水定容至100 ml。同時(shí)精密量取1.8 ml、2.0 ml和2.2 ml，使用純化水定容至100 ml，將純化水作為空白，在296 nm、286 nm和277 nm測(cè)定波長(zhǎng)位置對(duì)吸光度進(jìn)行測(cè)定，并將其代入回歸方程中，對(duì)回收率進(jìn)行計(jì)算。在對(duì)回收率進(jìn)行測(cè)定時(shí)，需平行操作2次。

1.2.6 含量實(shí)驗(yàn)：將本研究中制備的復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑量取5 ml，使用純化水定容至100 ml，并量取稀釋液3 ml，使用純化水定容至100 ml。在286 nm、296 nm和277 nm測(cè)定波長(zhǎng)位置對(duì)吸光度進(jìn)行測(cè)量，并且分別代入各自回歸方程中，對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定。

1.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)：取標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備過(guò)程中制作的曲安奈德溶液、水楊酸溶液及氯霉素溶液各10 ml，在室溫條件下放置0 h、2 h、4 h、和6 h。在不同的時(shí)刻測(cè)定吸光度，并計(jì)算RSD。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 對(duì)復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑中曲安奈德、水楊酸及氯霉素的含量、RSD及回收率進(jìn)行收集，并分析其線(xiàn)性關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1 曲安奈德、水楊酸及氯霉素的含量 本研究將標(biāo)示量作為含量測(cè)定結(jié)果，通過(guò)分析顯示曲安奈德、水楊酸及氯霉素的含量見(jiàn)表1。

表1 復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑樣品含量測(cè)定結(jié)果 (%)

2.2 曲安奈德、水楊酸及氯霉素的回收率 見(jiàn)表2。

表2 曲安奈德、水楊酸及氯霉素的回收率

2.3 曲安奈德、水楊酸及氯霉素的回收率RSD 見(jiàn)表3。

表3 復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑樣品RSD測(cè)定結(jié)果 (%)

3 討 論

復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑的主要成分為曲安奈德、水楊酸及氯霉素，將此三種藥物聯(lián)合使用，制備成復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑，可對(duì)諸多皮膚類(lèi)疾病起到較好療效。但需注意的是，復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑中的曲安奈德、水楊酸及氯霉素有一定毒性。在臨床治療時(shí)，若沒(méi)有嚴(yán)格按照含量要求進(jìn)行制備，則可能會(huì)導(dǎo)致治療時(shí)出現(xiàn)不良反應(yīng)或并發(fā)癥。因此，如何在復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑制備過(guò)程中對(duì)曲安奈德、水楊酸及氯霉素的含量進(jìn)行準(zhǔn)確有效的分析，并按照相關(guān)要求調(diào)整含量非常重要。

本研究分析復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑的三組分含量測(cè)定方法及質(zhì)量控制方法，通過(guò)使用紫外分光光度法對(duì)復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑中的曲安奈德、水楊酸及氯霉素的含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑的三組分含量基本符合相關(guān)要求，僅出現(xiàn)了輕微過(guò)量。同時(shí)曲安奈德、水楊酸及氯霉素的回收率和RSD也基本符合相關(guān)要求[6-8]。

但本研究仍暴露出一定問(wèn)題。雖然測(cè)定出復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑中的三組分含量基本符合相關(guān)要求，并且與規(guī)定含量差異不大，但所有組分均超出了規(guī)定含量。由此可見(jiàn)，在復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑實(shí)際的制備過(guò)程中，三組分含量有超出規(guī)定含量的趨勢(shì)，在日后的復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑制備中，需嚴(yán)密規(guī)定曲安奈德、水楊酸及氯霉素的加入量，以免超出規(guī)定含量，導(dǎo)致并發(fā)癥和不良反應(yīng)[9-12]。

綜上所述，復(fù)方曲安奈德水楊酸搽劑的處方組成簡(jiǎn)單，制備方法簡(jiǎn)便，可在較短時(shí)間內(nèi)制備完成并使用，同時(shí)使用紫外分光光度法更可在較短時(shí)間內(nèi)分析其有效成分含量，有較高使用價(jià)值，但在制備中，需著重注意各組分的含量應(yīng)符合相關(guān)要求，從而起到安全有效的治療效果。