竇 鑫,吳燕燕
(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品加工重點實驗室,廣東廣州 510300;2.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院,上海 201306)
我國是水產(chǎn)品生產(chǎn)消費大國,人們對水產(chǎn)品的需求不斷增加,推動了我國深遠海魚類捕撈產(chǎn)業(yè)和海水魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展。目前,我國海水魚產(chǎn)量逐年提高,據(jù)《2019 中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒》[1]顯示,2018年我國水產(chǎn)品的生產(chǎn)總量達到6457.66 萬噸,魚類產(chǎn)量為4991.06 萬噸。隨著海水魚類加工業(yè)的迅猛發(fā)展,其在加工過程產(chǎn)生了大量的副產(chǎn)物,如魚頭、魚骨、魚皮、魚鱗、魚鰾、魚內(nèi)臟等,這些魚副產(chǎn)物約占原料魚體質(zhì)量的40%~55%[2?3]。在產(chǎn)生的大量加工廢棄物中,魚內(nèi)臟占一定比例(約10%)[4],且目前海水魚內(nèi)臟除少量作為飼料或制備成魚油外[5],不能得到更高價值的處理及應(yīng)用,這不僅造成了資源的浪費也造成了環(huán)境的污染。相較于畜禽類動物肝臟會涉及到雞瘟、豬流感、瘋牛病等傳染性疾病[6?7],海水魚的生存環(huán)境使其免于接觸到各種傳染性疾病的病原體,賦予其更高的安全性。因此,如何處理海水魚在加工過程中產(chǎn)生的大量內(nèi)臟及其他下腳料,實現(xiàn)廢料的高值化利用及提升產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟效益成為人們十分關(guān)注的問題。為更好了解海水魚內(nèi)臟的研發(fā)情況,本文綜述了國內(nèi)外近年來海水魚內(nèi)臟的研發(fā)現(xiàn)狀,并對今后的發(fā)展和研發(fā)重點提出展望。
目前資源的短缺日益加劇,如何使現(xiàn)有資源得到更充分的利用是科研工作者們攻堅的目標(biāo),海水魚副產(chǎn)物中的內(nèi)臟含有大量優(yōu)質(zhì)蛋白及多種功能活性物質(zhì),魚內(nèi)臟蛋白質(zhì)含量可達內(nèi)臟干質(zhì)量的20%以上[8?9],這是制備生物活性肽很好的原料。因此,從內(nèi)臟中分離純化出不同的生物活性肽[10],并開發(fā)其特異性功能,不僅為資源的不合理利用提供了解決方案,也可以帶動水產(chǎn)行業(yè)獲得高額利潤[11]。
生物活性肽被認(rèn)為是在親本蛋白序列內(nèi)無活性的特定蛋白片段[12]。它們在酶的作用下水解釋放,可以發(fā)揮各種生理功能,這些肽的大小為2~20 個氨基酸[13],分子量小于6000 Da[14]。氨基酸組成和序列影響生物肽活性,基于它們的結(jié)構(gòu)特性及其氨基酸組成和序列,這些肽可以發(fā)揮各種作用,使海水魚內(nèi)臟蛋白在人類營養(yǎng)和健康管理中變得日益重要[15]。海洋生物活性肽可用于功能性食品、營養(yǎng)品和藥物中,制備成抗氧化肽、抗高血壓肽、抗腫瘤肽、抗疲勞肽和抗微生物等組分[16]。而海水魚內(nèi)臟目前的研究主要集中在抗氧化肽、抗疲勞肽和抗高血壓肽。
有研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)人體內(nèi)的自由基在產(chǎn)生與消除的過程中失去平衡時,多余的氧自由基會使細(xì)胞受損,對機體造成傷害,進而引起衰老及癌癥等疾病的產(chǎn)生[17]?,F(xiàn)階段雖有許多以化學(xué)合成物為主要來源的抗氧化劑,但相對而言,天然生物來源的抗氧化肽具有更好的抗氧化活性且對身體無害,因而以海洋生物制備的生物活性肽將會是眾多消費者更好的選擇[16,18]。
現(xiàn)階段抗氧化肽制備主要以酶法水解為主,它相較于酸堿水解法更為溫和,具有品質(zhì)可控、副產(chǎn)物少的特點[19],其抗氧化活性的測定多以體外活性測定為主,一般通過比較自由基清除能力、還原力以及羥基自由基和過氧化氫的抗氧化活性來選擇最佳組分。Je等[10]使用四種不同的蛋白酶(風(fēng)味蛋白酶、堿性蛋白酶、復(fù)合蛋白酶和中性蛋白酶)對金槍魚肝臟進行酶解,經(jīng)兩次水解后,用MALDI-TOF質(zhì)譜法測定水解產(chǎn)物的分子量分布并測定其自由基清除能力、還原力以及羥基自由基和過氧化氫的抗氧化活性,比較兩次水解產(chǎn)物的抗氧化活性。李致瑜等[20]分別使用復(fù)合蛋白酶及堿性蛋白酶酶解大黃魚內(nèi)臟,經(jīng)超濾分級分離后,篩選出最強的抗氧化活性組分進而制備抗氧化肽,其中最佳抗氧化組分的DPPH自由基清除率為85.97%,羥自由基清除率為75.79%。李娜等[21]使用六種不同的蛋白酶酶解鱈魚魚鰾,以蛋白水解度和DPPH自由基清除能力為測定指標(biāo),通過單因素實驗及響應(yīng)面優(yōu)化試驗進行抗氧化肽的制備,測得最佳工藝條件下DPPH自由基清除率為61.1%。劉丹[22]以秋刀魚為原料,酶解制備抗氧化肽,利用體外化學(xué)模型和體內(nèi)動物模型綜合評價了秋刀魚多肽的抗氧化特性,所制得的抗氧化肽得率為53.03%。Jai等[23]以烏鲹內(nèi)臟為原料,使用多種蛋白酶水解以提取抗氧化肽,并通過自由基清除能力、金屬螯合物評估粗水解產(chǎn)物的抗氧化活性,其中DPPH自由基清除能力最佳可達61.7%。林慧敏等[24]以脫脂鮟鱇魚肝為原料,使用五種不同的蛋白酶(木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶)進行水解,經(jīng)過單因素及二次正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗確定最佳的抗氧化肽的制備工藝,測定最佳工藝下羥基自由基清除率為76.74%。由此可見,海水魚內(nèi)臟中制備抗氧化肽的研究已經(jīng)較為成熟,且具有很好的抗氧化活性。
抗疲勞肽是一種可以消除體力疲勞與緩解神經(jīng)疲勞[25]的生物活性肽,主要由2-10 個氨基酸形成的直鏈寡肽或小肽,也有部分是多于10 個氨基酸的多肽[26],其能很好的消除疲勞代謝所積累的產(chǎn)物。已經(jīng)有很多研究表明自由基的大量產(chǎn)生是引起疲勞產(chǎn)生的主要原因,由于抗氧化肽與抗疲勞肽有一定的關(guān)聯(lián),目前已經(jīng)有多種抗氧化肽被證實有抗疲勞的功效[27]。
對于抗疲勞肽活性的驗證,多以體外與體內(nèi)動物實驗相結(jié)合。體外實驗一般通過比較自由基清除能力、還原力以及羥基自由基清除率進行篩選,而體內(nèi)動物實驗通過小鼠爬桿時間及游泳時長可驗證抗疲勞肽的功效。Zhao等[28]從大黃魚魚鰾的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物中分離出魚鰾分離肽(SBP-III-3),并且使用體外和體內(nèi)方法測定其抗疲勞活性,結(jié)果顯示SBPIII-3 具有良好的抗疲勞能力,其中小鼠游泳的時長最高可達33.41 min,同對照組(16.1 min)相比有明顯提高。王勇剛等[29]酶解魚精蛋白提取魚精多肽,研究了魚精多肽的體外自由基清除能力以及體內(nèi)抗疲勞方面的作用,可以得出魚精多肽有較強的羥自由基清除活性,·OH的半數(shù)抑制濃度(IC50)值為 7.66 mg/mL。且Wistar大鼠的抗疲勞能力也得到了顯著提高,藥物組大鼠的爬桿時間是對照組的1.8 倍。Xu等[30]用鮟鱇魚肝制備抗疲勞肽,其功能特性通過小鼠實驗進行驗證,與對照組相比爬桿時長可增加48.03%。通過動物實驗可以明顯的看出,從魚內(nèi)臟所制備的肽有明顯的抗疲勞作用。
高血壓是與心血管疾病相關(guān)的主要危險因素之一,這種疾病主要由血管緊張素-轉(zhuǎn)換酶(EC 3.4.15.1;ACE)引起的,抑制ACE活性可以起到很好的抗高血壓作用[10]。ACE產(chǎn)生的血管緊張素II,是一種強效的血管收縮劑和血管擴張劑(如緩激肽)的驅(qū)逐劑[31?32],這種酶是預(yù)防和治療高血壓的關(guān)鍵因素。目前,主要采用化學(xué)合成來制備降血壓肽,但是其具有一定副的作用。因此,從天然物質(zhì)中尋找具有ACE抑制活性的肽[33]是人們今后探究的重點。
Bougatef等[34]通過蛋白酶水解沙丁魚(Sardina pilchardus)內(nèi)臟,所獲得的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物均表現(xiàn)出對ACE的抑制活性,其IC50值范圍為1.24~7.40 mg/mL,研究認(rèn)為所制備的肽具有預(yù)防和治療高血壓的功效。Je等[10]使用五種蛋白酶對金槍魚肝進行酶解。通過MALDI-TOF質(zhì)譜法測定水解產(chǎn)物的分子量范圍為1000~3000 Da,且水解產(chǎn)物具有較好的ACE抑制特性。
綜上所述,通過海水魚內(nèi)臟制備的生物活性肽所具備的生物活性尚未像牛奶和植物肽那樣進行了廣泛研究[35],目前對于海水魚內(nèi)臟中抗氧化肽、抗高血壓肽、抗疲勞肽已進行了相關(guān)研究,而其他生物活性肽,如抗菌肽、抗高血糖肽、抗尿酸肽、抗炎癥肽、抗腫瘤肽、抗輻射肽等還應(yīng)繼續(xù)進行深入開發(fā)[36]。通常情況下,水生環(huán)境中魚內(nèi)臟的重金屬含量相較其他組織要高,因此也需對其重金屬離子的含量進行把關(guān),使其滿足相關(guān)的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
酶作為參與生物體內(nèi)一切生物化學(xué)反應(yīng)過程的生物催化劑,其應(yīng)用范圍已經(jīng)遍及工業(yè)、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、化學(xué)分析、環(huán)境保護和生命科學(xué)等各個方面[37]。近年來,隨著海水魚副產(chǎn)物高值化利用的不斷深入[5],選用海水魚內(nèi)臟作為工業(yè)生產(chǎn)酶的原料來源有很強的可行性,海水魚內(nèi)臟所含的酶種類豐富,目前研究較多的有蛋白酶[38]、超氧化物歧化酶[39]、膽堿酯酶[40]、酸(堿)性磷酸酶[40?41]等。
蛋白酶能水解蛋白質(zhì),在動物的內(nèi)臟、植物的莖葉、果實和微生物中存在較為廣泛[38]。魚類的機體里面本身就含有內(nèi)源性蛋白酶,如胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、膠原酶和彈性蛋白酶[42],其最大優(yōu)點就是跟底物的結(jié)合度較高、活性好、成本低。因此,利用內(nèi)源酶本身的自溶性來水解魚內(nèi)臟所含有的蛋白質(zhì)效果會更明顯[43]。故可以將海水魚內(nèi)臟用做提取蛋白酶的原料。
肖鑫鑫[44]以金鯧魚內(nèi)臟為研究對象,通過除脂、破碎、鹽析、離心以及SephadexG-100 凝膠分離等步驟從其內(nèi)臟中提取酸性蛋白酶,用其酶解明膠發(fā)現(xiàn)其活性高于胃蛋白酶活性。Ben等[45]以沙丁魚內(nèi)臟為原料使用硫酸銨沉淀和Sephadex G-100 凝膠進行過濾純化出新的低分子量(LMW)絲氨酸蛋白酶,酶活性的最佳pH和溫度分別為pH8.0 和60 ℃,并驗證其比活性提高了3.82 倍。Taghizadeh等[46]從虹鱒內(nèi)臟中回收粗堿性蛋白酶,并通過篩選最佳飽和度的硫酸銨進行部分純化保證最大的粗酶制備產(chǎn)量,所提取的蛋白酶的分子量在8~24 kDa之間,且在溫度范圍(30~55 ℃)和pH4~12 下具有酪蛋白水解活性。吳燕燕等[47]以超聲波法提取羅非魚內(nèi)臟中蛋白酶,并確定該胃蛋白酶提取的最佳工藝。Aten等[48]從鯰魚內(nèi)臟中提取了酸性蛋白酶和堿性蛋白酶,確定了最佳pH、pH穩(wěn)定性、溫度、熱穩(wěn)定性、鹽穩(wěn)定性以及對牛肌肉蛋白和明膠的水解活性。由此可見,從海水魚內(nèi)臟中所提取的蛋白酶多為高活性蛋白酶,相比現(xiàn)有蛋白酶其活性有明顯增加,且適溫范圍廣,熱穩(wěn)定性好,其用于水產(chǎn)品酶解制備高活性物質(zhì)更有優(yōu)勢,有很好的開發(fā)前景,需進一步研究其制備技術(shù)及應(yīng)用條件。
超氧化物歧化酶(SOD)是自然界中已知的最有效的抗氧化劑之一,并且是抗氧化應(yīng)激的細(xì)胞防御的重要組成部分。該酶顯示了非常高的催化反應(yīng)速率和對物理化學(xué)應(yīng)力的高穩(wěn)定性[49],且SOD具有抗炎、抗病毒、抗輻射、抗衰老等作用,在病毒性疾病、自身免疫性疾病、心血管疾病、輻射病、癌癥和癌癥的放射治療預(yù)防以及人類長壽等領(lǐng)域的研究中已有突破性進展[50?51]。目前SOD產(chǎn)品主要來自于豬牛血、內(nèi)臟等動物組織,但畜禽類動物本身容易攜帶各種細(xì)菌病毒,而新開發(fā)的植物源SOD活性較低。研究發(fā)現(xiàn)魚內(nèi)臟中含有大量的生物酶類,可以從中提取SOD酶。
孫繼鵬等[52]以金鯧魚內(nèi)臟為超氧化物歧化酶(SOD)提取原料,比較其提取物料比、溫度、時間、pH、緩沖液濃度,結(jié)合單因素和正交實驗,優(yōu)化SOD提取工藝,制得的每克物料提取SOD活力為994 U。張爾賢等[53]從鯊魚肝中分離提純超氧化物歧化酶(SOD),采用72 ℃熱處理,硫酸銨分級分離和 Sephadex G-100 柱層析工藝,根據(jù)聚丙烯酰胺凝膠電泳、比活、相對分子量及紫外吸收光譜等性質(zhì)的測定結(jié)果,證實了所提純的SOD是均一的。吳燕燕等[39]以奧尼羅非魚肝臟為原料,研究加熱法提取超氧化物歧化酶(SOD)的工藝條件,丙酮沉淀回收酶法和HitrapTMQ FF陰離子柱純化Cu,Zn-SOD,并對其酶學(xué)性質(zhì)進行分析。綜上所述,由于海水魚內(nèi)臟資源豐富且價格低廉,十分適宜作為生產(chǎn)SOD的主要原料,可以很好地降低生產(chǎn)成本,且有著極大的市場前景。
膽堿酯酶分為乙酰膽堿酯酶和擬膽堿酯酶,目前研究表明,膽堿酯酶對有機磷化合物的反應(yīng)靈敏度高、特異性強。目前針對于海水魚魚肉[54]的膽堿酯酶研究較多,但是海水魚內(nèi)臟的膽堿酯酶的開發(fā)研究還較少,郝志明等[40]將從羅非魚肝臟中提取的膽堿酯酶酶活量與鰻魚肝和鰻魚頭提取的膽堿酯酶酶活量進行比較。羅非魚肝提取膽堿酯酶酶活性為231 U·g?1,鰻魚肝和鰻魚頭提取的酶活性分別為157 U·g?1和64 U·g?1,驗證了膽堿酯酶是一種非常稀缺的酶,所以從羅非魚肝臟中有較高的提取膽堿酯酶的價值。
酸性磷酸酶是一種在酸性條件下催化磷酸單酯水解成無機磷酸的水解酶,是溶酶體的標(biāo)志酶,而溶酶體的基本功能是對生物大分子的強烈消化作用,以維持細(xì)胞的正常代謝活動[55]。堿性磷酸酶是一種具有廣泛使用價值的生化試劑,在酶標(biāo)免疫方面擁有巨大的價值[41]。對于酸(堿)性磷酸酶,畜禽類動物肝臟在此部分的研究較多,在海水魚內(nèi)臟中研究較少,只在重金屬對魚內(nèi)臟中酸性磷酸酶和堿性磷酸酶的影響[56?57]進行了相應(yīng)研究。
黃毅等[58]通過Tris-HCl緩沖液(pH8.6)抽提,正丁醇脫脂,硫酸銨分級沉淀分離,DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacry IS-200 柱層析等步驟,從黃鱔內(nèi)臟中提取出電泳純的堿性磷酸酶。郝志明等[40]以羅非魚內(nèi)臟為原材料來提取酸性磷酸酶和堿性磷酸酶,將羅非魚內(nèi)臟中的兩種酶與鰻魚肝臟中的兩種酶進行比較,發(fā)現(xiàn)羅非魚中的酸性磷酸酶和堿性磷酸酶都具有比較高的活性,因而具有比較高的提取價值。
綜上所述,魚內(nèi)臟所含有的酶通常具有很高的酶活性,值得科研人員進行深入的研究與利用?,F(xiàn)階段海水魚內(nèi)臟中對蛋白酶和超氧化物歧化酶的研究較為廣泛,而其他酶在海水魚內(nèi)臟中提取和研究較少?,F(xiàn)今各個種類的蛋白酶在市場上有很大需求,價位也相對較高,而海水魚內(nèi)臟有著原料豐富、價格低廉的特點,用其進行酶類的制備有著極大的市場競爭優(yōu)勢,且魚內(nèi)臟中的酶活性較高,也為提取高活性的酶提供了保障,故對海水魚內(nèi)臟中酶的研究還需要繼續(xù)開發(fā)。
海水魚內(nèi)臟中除了含有可開發(fā)利用的生物活性肽、酶源外,內(nèi)臟油脂也是下腳料的重要組成部分,具有很大的開發(fā)潛力。目前已經(jīng)對魚內(nèi)臟脂質(zhì)中的磷脂、脂肪酸以及不皂化脂質(zhì)進行了一定程度的研究。
磷脂是指含磷酸根的脂質(zhì),主要包括甘油磷脂和鞘磷脂兩類。海洋物種(包括甲殼綱動物,軟體動物和魚類)的磷脂具有很高的價值,可用于營養(yǎng)、制藥、醫(yī)藥以及基礎(chǔ)研究等各個領(lǐng)域[59]。具有預(yù)防心腦血管疾病、延緩大腦衰老和抑制腫瘤細(xì)胞生長等功能,有利于高血脂、脂肪肝等疾病的治療和人體的正常發(fā)育。作為一種混合物,海洋磷脂主要含有磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PI)等組分[60?61]。
對于內(nèi)臟磷脂的制備,國內(nèi)外均進行了相應(yīng)的研究。Zhang等[62]采用超臨界二氧化碳和有機溶劑乙醇的方式來提取秋刀魚內(nèi)臟磷脂,使用蒸發(fā)散射光檢測器的高效液相色譜法定量分析磷脂提取物的主要成分。測得主要磷脂及次要磷脂,且相較于大豆磷脂,秋刀魚內(nèi)臟磷脂中n-3 脂肪酸,特別是DHA更為豐富,對治療如阿爾茲海默癥類神經(jīng)衰退性疾病有很好的效果。葉彬清等[63]采用超臨界二氧化碳(SCCO2)萃取技術(shù)從秋刀魚內(nèi)臟中萃取魚油和卵磷脂,卵磷脂中多不飽和脂肪酸含量尤其是DHA含量最為豐富。程新偉[64]測定了大黃魚魚卵中磷脂的含量并分離純化大黃魚魚卵磷脂酰膽堿。梁鵬等[65]研究了大黃魚魚卵磷脂對高脂血癥小鼠的降血脂作用影響。由此可見,海水魚內(nèi)臟中含有豐富的磷脂,DHA含量較高,目前海水魚內(nèi)臟磷脂的制備技術(shù)較為成熟,相應(yīng)的制備工藝可為磷脂的開發(fā)利用提供技術(shù)參考。
魚肝臟中含有豐富的脂肪酸,脂肪酸中必需脂肪酸(EFA)對于心血管疾病、炎癥、腫瘤等多方面有影響,多不飽和脂肪酸(PUFA)可用于預(yù)防心血管疾病和阿爾茨海默病[66?67]。魚類尤其是海水魚脂肪酸富含多不飽和脂肪酸[68],這些化合物人體無法合成,因而被認(rèn)為是必需脂肪酸[69]。除磷脂外,多不飽和脂肪酸中也可以提取出DHA、EPA,其中DHA、EPA是天然來源中發(fā)現(xiàn)的最豐富的長鏈 PUFA(碳鏈中有超過20 個原子)[70]。相較于油籽和葉類蔬菜中PUFA含量,海洋生物(如魚類、軟體動物、甲殼類動物)的含量更為豐富[71]。
Fiori等[72]采用超臨界二氧化碳從鱒魚內(nèi)臟中提取脂質(zhì),測定出不飽和脂肪酸的量(占總脂肪酸的百分比)為72.6%~75.3%。胡衛(wèi)強等[73]采用氣質(zhì)聯(lián)用法對草魚內(nèi)臟魚油的脂肪酸組成進行分析,共檢測出19 種脂肪酸,其中飽和脂肪酸有7種,不飽和脂肪酸有12 種,其脂肪酸的主要組成為不飽和脂肪酸。劉國艷等[74]以小黃魚內(nèi)臟為原料,采用氣相色譜法測定所提魚油的脂肪酸含量,結(jié)果顯示,其含有豐富的多不飽和脂肪酸,其中DPA為1.28%、EPA為4.95%、DHA為9.57%。相朝清等[75]以斑點叉尾回魚內(nèi)臟為原料,通過單因素試驗及響應(yīng)面優(yōu)化確定了最佳的脂肪酸提取工藝。王正云等[76]采用微波輔助酶法水解青魚內(nèi)臟,通過單因素實驗及響應(yīng)面法確定了最佳的提取工藝,并對脂肪酸進行分析。易翠平等[77]比較了鱤魚不同部位的脂肪含量及脂肪酸組成,測得鱤魚內(nèi)臟中的脂肪及脂肪酸含量較為豐富。海水魚內(nèi)臟中脂質(zhì)含量豐富,在魚油的提取制備過程中,通過不斷優(yōu)化的制備工藝增加了海水魚內(nèi)臟魚油的提取率,也保障了制備的脂肪酸品質(zhì)。
角鯊烯和烷氧基甘油(AKGs)是一種高度不飽和的直鏈三萜類化合物,主要存在于鯊魚肝油。目前有99%以上的角鯊烯來源于鯊魚肝油,且具有多種生理活性功能,如抗癌抗腫瘤[78]、抗感染[79]、抗氧化[80]等,被廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域[81]。烷氧基甘油是一類甘油醚化合物,主要存在于深海魚油(尤其是鯊魚肝油)中。烷氧基甘油具有多種生理功能,如防止疾病和感染[82?83]、抗氧化[79]、抗腫瘤[84]、降低化療損傷等。
唐小紅[81]用GC-MS方法對鯊魚肝油中的角鯊烯進行定性分析和定量測定,建立了以正二十六烷為內(nèi)標(biāo)物的角鯊烯GC-MS分析檢測方法,結(jié)果表明所有鯊魚肝油樣品的角鯊烯含量都在70 mg/g以上,含量較高。又研究了鯊魚肝油中AKGs的GC-MS定性定量分析方法。以正二十六烷為內(nèi)標(biāo)物,建立了鯊魚肝油中AKGs含量測定的GC-MS分析方法,結(jié)果表明樣品中含有4 種AKGs,并對其進行了準(zhǔn)確定量。郭正霞[85]對脫角鯊烯的鯊魚肝油進行相關(guān)脂質(zhì)組成分析,結(jié)合乙酯化反應(yīng)和分子蒸餾技術(shù)建立了富集鯊魚肝油中的方法,在鯊魚肝油中檢測出了14 種AKGs。
綜上所述,海水魚內(nèi)臟中脂質(zhì)的制備工藝已經(jīng)十分成熟,諸如超臨界CO2萃取法和酶解法。微博輔助酶解法、超聲輔助酶解法等比較新穎的提取工藝已經(jīng)進行了深入的研究。同時,海水魚內(nèi)臟中脂肪含量較高,內(nèi)臟脂質(zhì)中的磷脂、脂肪酸以及不皂化脂質(zhì)可以對人的身體起到有益的功效。對于有針對性的疾病治療,如抗癌抗腫瘤、抗感染、抗氧化以及治療神經(jīng)衰退等疾病也有一定的研究。因此,積極開發(fā)利用海水魚內(nèi)臟油脂,制備不同用途的脂質(zhì)產(chǎn)品是今后需要深入研究開發(fā)的技術(shù)之一。
要加大和提高海水魚內(nèi)臟資源的利用。目前雖然有一些海水魚加工副產(chǎn)物的利用,但主要還是以全臟器提取為主。海水魚類內(nèi)臟中主要包括魚肝、魚胃、魚鰾、魚精、魚卵以及魚腸等,在目前的開發(fā)利用中多將內(nèi)臟混合進行生產(chǎn)制備,今后可根據(jù)海水魚內(nèi)臟各部位特點,有針對性的制備功能活性物質(zhì),使得其物盡其用。更大地提高海水魚內(nèi)臟的利用率。
海水魚內(nèi)臟生物活性肽的制備、活性保持及工業(yè)化應(yīng)用仍需加強。目前從內(nèi)臟中提取生物活性肽的研究有所失衡,局限于抗氧化肽、抗疲勞肽和降血壓肽這幾種活性肽的研究,而其余的生物活性肽還有待發(fā)掘。此外,對于海水魚內(nèi)臟的活性肽研究大多是從活性肽的制備工藝、分離、純化到結(jié)構(gòu)鑒定,對于活性肽的構(gòu)效關(guān)系、作用機理、分子修飾等方面的研究并不深入,且活性肽的提取在國內(nèi)還屬于實驗階段,距離達到工業(yè)化程度還需要進一步的研究,所以要進一步地研究如何實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化及產(chǎn)品中活性肽功能的保持。
要挖掘開發(fā)海水魚內(nèi)臟酶類,不同的海水魚內(nèi)臟中含有的酶類不同且功能各異,而目前一些研究也表明魚類內(nèi)臟蛋白酶或SOD酶都具有較好的穩(wěn)定性,特別適合作為水產(chǎn)品水解酶。所以我們可以從海水魚內(nèi)臟中挖掘更多具有特殊功能的酶類,用于水產(chǎn)品的高質(zhì)化生物加工。
海水魚內(nèi)臟中含脂質(zhì)較高,具有很高的開發(fā)價值,但是如何最大程度的利用這些脂質(zhì)是目前較為重要的任務(wù)。不同的提取工藝和方法對脂質(zhì)中的脂肪酸、磷脂以及不皂化脂質(zhì)等的質(zhì)量、提取得率有一定的影響,同時也應(yīng)考慮提取過程中對環(huán)境的影響并盡可能使企業(yè)達到更好的收益。