69例假性血小板減少分析與處理

楊洪彩，閆麗娟

（無(wú)棣縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 無(wú)棣 251900）

血小板在生理止血過(guò)程中和血栓形成等病理過(guò)程中具有重要作用。血小板數(shù)量檢測(cè)成為臨床最常用項(xiàng)目之一。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好，但會(huì)有血小板計(jì)數(shù)偏低而與臨床癥狀不符的情況。鑒于儀器檢測(cè)原理及方法學(xué)限制，檢測(cè)干擾因素復(fù)雜，且血小板又易黏附聚集。當(dāng)遇到血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低時(shí)，甄別出血小板假性減少的情況尤為必要。并采用適合方法，以獲取這部分樣本的實(shí)際檢驗(yàn)結(jié)果?，F(xiàn)將我們的研究報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

邁瑞B(yǎng)C-6900全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、Olympus顯微鏡、EDTA-K2抗凝真空管、肝素抗凝真空管、草酸銨血小板稀釋液。參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第3版）》[1]用瑞氏-吉姆薩染液、儀器配套試劑及質(zhì)控品。

1.2 樣本

資料來(lái)自2018年1月～10月年來(lái)我院檢查就診的患者（排除血液?。?，采用全自動(dòng)血球分析儀進(jìn)行分析時(shí)，隨機(jī)跟蹤33760例。血小板計(jì)數(shù)值偏低的69例（≤99×109/L）。

1.3 方法

對(duì)69例血小板計(jì)數(shù)值異常偏低標(biāo)本，取同份血進(jìn)行涂片，瑞氏-吉姆薩法染色，在油鏡（×100倍）下觀察血小板的分布情況、大小形態(tài)、有無(wú)聚集等。在涂片中發(fā)現(xiàn)21例患者存在大血小板，同一標(biāo)本用牛-鮑氏計(jì)數(shù)板手工法計(jì)數(shù)，復(fù)檢。在涂片中發(fā)現(xiàn)有血小板聚集現(xiàn)象，分布情況與計(jì)數(shù)值明顯不符的48例，了解患者癥狀表現(xiàn)，均無(wú)皮膚黏膜出血點(diǎn)、紫癜等明顯的出血傾向、肝脾淋巴結(jié)不大。征得患者同意，再次抽血，同時(shí)采集EDTA-K2抗凝管、肝素鋰抗凝管、草酸銨稀釋液管。全自動(dòng)血細(xì)胞儀對(duì)兩份抗凝血進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)，對(duì)兩份標(biāo)本進(jìn)行涂片觀察血小板分布情況。草酸銨稀釋液管用牛-鮑氏計(jì)數(shù)板來(lái)手工計(jì)數(shù)，復(fù)檢。

2 結(jié) 果

21例存在大血小板的患者，手工法復(fù)檢的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果均高于初檢結(jié)果。有26例患者的EDTA抗凝標(biāo)本在血細(xì)胞儀復(fù)檢的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果仍降低，與初次檢驗(yàn)結(jié)果符合；而其肝素鋰抗凝標(biāo)本、手工法復(fù)檢的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果均在正常范圍內(nèi)。同時(shí)采集的EDTA-K2抗凝血涂片中，有明顯血小板聚集現(xiàn)象，而肝素抗凝血涂片中，血小板散在多見(jiàn)。22例采集不順的患者，三種方法復(fù)檢結(jié)果均在正常范圍內(nèi)。見(jiàn)表1、表2。

表1 血涂片鏡下血小板分布情況

表2 各種方法檢測(cè)結(jié)果比較（±s，×109）

表2 各種方法檢測(cè)結(jié)果比較（±s，×109）

注：P1：EDTA組與初檢結(jié)果比較 P2：肝素鋰組與初檢結(jié)果比較 P0：手工法與初檢結(jié)果比較 /：不采用

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3 討 論

除血液病外，血小板真性減少發(fā)生在：如特發(fā)性的血小板減少性紫癜、繼發(fā)于HCV、幽門(mén)螺旋桿菌慢性感染等。由同種抗體導(dǎo)致血小板減少，如母體抗體導(dǎo)致的免疫性新生兒血小板減少癥，多次輸血產(chǎn)生自身抗體等。肝腎疾病、藥物副作用[2]等也常見(jiàn)。檢驗(yàn)工作中，需要綜合考慮導(dǎo)致血小板假性減少的各種因素。

3.1 EDTA抗凝劑對(duì)血小板減少的影響

1969年，Gowland等首次報(bào)道了人對(duì)抗凝劑抵抗而導(dǎo)致血小板檢測(cè)值偏低的現(xiàn)象，即EDTA依賴(lài)性血小板減少。這種現(xiàn)象在健康、患病時(shí)均有出現(xiàn)，一過(guò)性的也有出現(xiàn)，其發(fā)生率約0.07%～0.20%，而我們的檢測(cè)發(fā)生率約為0.08%，與文獻(xiàn)報(bào)道基本相符。

3.2 大血小板的影響

全血細(xì)胞儀電阻抗法以體積大小來(lái)歸類(lèi)血小板和其它細(xì)胞。不同體積顆粒通過(guò)檢測(cè)孔產(chǎn)生不同脈沖，以此歸類(lèi)計(jì)數(shù)。通常血小板體積為2～15 fl，血小板體積閾值為2～30 fl。顯而，體積超過(guò)30fl的血小板儀器可能被誤記。腫瘤、急性心肌梗死等患者大血小板會(huì)增多，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性減少。

3.3 采血過(guò)程對(duì)血小板減少的影響

血小板檢測(cè)是一個(gè)系列操作過(guò)程，采集標(biāo)本是第一步，采血操作不順暢造成組織損傷，皮下水腫、出血等引起組織凝血因子混入血液，產(chǎn)生肉眼不可見(jiàn)的小凝塊，導(dǎo)致血小板假性減少。

3.4 冷凝集對(duì)血小板減少的影響

室溫條件下，高滴度的寒冷凝集素可凝集紅細(xì)胞、有核細(xì)胞和血小板，導(dǎo)致儀器檢測(cè)結(jié)果異常。凝集素同時(shí)也影響其它試驗(yàn)結(jié)果，可造成血型鑒定、交叉配血困難。

3.5 儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)短或過(guò)長(zhǎng)對(duì)血小板減少的影響

采血后30～60 min為血小板最佳檢測(cè)時(shí)間。因血小板離體后偽足形成，如立即檢測(cè)易被誤認(rèn)為小紅細(xì)胞，而不計(jì)入血小板范圍；相反，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，血小板易發(fā)生變形、自溶、黏附、聚集，導(dǎo)致計(jì)數(shù)減少。

3.6 妊娠對(duì)血小板減少的影響

高達(dá)5%～10%的孕婦發(fā)生血小板減少的血液異常。這可能與血液稀釋有關(guān)，或是免疫/非免疫機(jī)制造成的血小板破壞增加。

3.7 其他病理因素對(duì)血小板減少的影響

異常蛋白血癥、脂類(lèi)與蛋白的聚集的影響等。如心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、心臟瓣膜移植等，可促進(jìn)血液高凝狀態(tài)，血小板聚集性增高；像高血壓、糖尿病患者由于內(nèi)皮易損，可致血小板聚集，從而導(dǎo)致血小板降低[3]。

對(duì)于血小板減低的標(biāo)本，應(yīng)該結(jié)合儀器的報(bào)警提示，觀察血小板直方圖和散色圖。及時(shí)做涂片鏡檢，看是否有血小板凝集成堆現(xiàn)象，是否存在大血小板，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)血小板假性減少，以免給臨床帶來(lái)錯(cuò)誤的指導(dǎo)。對(duì)于血小板減低的標(biāo)本，不僅要及時(shí)查找原因，還要進(jìn)行一些對(duì)照試驗(yàn)。