兩種不同免疫檢驗方法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志物的效果分析

龔 帥，黎紅梅*

（重慶市墊江縣人民醫(yī)院，重慶 408300）

乙型病毒性肝炎是臨床常見的肝臟疾病，主要由乙型肝炎病毒引起，病變部位以肝臟為主。為實現(xiàn)對該疾病的盡早診斷及治療，需加強可靠檢出方法的研究[1]。現(xiàn)階段主要采用酶聯(lián)免疫吸附法和電化學發(fā)光法檢測乙型肝炎病毒感染血清標志物[2]。筆者對ECLIA、ELISA兩種免疫檢驗方法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志物的陽性檢出率進行了比較，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 標本來源

選取2019年1月—2020年1月期間在我院接受治療的乙型肝炎患者90例，所有乙型肝炎病毒感染患者均符合《病毒性肝炎的防治方案》中的診斷標準[5]?；颊咧心挲g最小的患者為24歲，年齡最大的患者為44歲，患者的平均年齡為（34.8±4.2）歲，其中男性患者有56例，剩余患者全部為女性患者。

1.2 儀器與試劑

全自動電化學發(fā)光免疫分析儀（Cobas E601）（德國羅氏診斷公司）；科華ST-360本酶標儀。ECLIA法檢測試劑：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc試劑盒（德國羅氏診斷公司）；ELISA法檢測試劑：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc試劑盒（英科新創(chuàng)科技有限公司），HBsAg血清標準物（北京康徹斯坦公司）。

1.3 方法

①采集患者空腹外周靜脈血5 ml，離心處理10 min，速度為3000 r/min，將分離后的血清置于-20℃的冰箱中進行冷凍保存?zhèn)錅y。然后分別采用電化學發(fā)光法法和用酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙型肝炎患者血清標本感染標志物，其中檢測的項目主要包含HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb等。按試劑說明書操作。對這兩種方法的檢測結(jié)果進行比較分析。②將HBsAg血清標準物質(zhì)（1 IU/ml）按倍比稀釋（1.0、0.5、0.25、0.125、0.063、0.032），將稀釋后的標本分別使用ELISA法和ECLIA法檢測，檢測重復5次，平均值作為檢測結(jié)果，將能測出的最低濃度作為檢出限。

1.4 結(jié)果判讀

參照試劑盒說明書。①ECLIA檢測：測定結(jié)果以COI表示，HBsAg、HBeAg COI≥1.0時為陽性，抗-HBe、抗-HBc COI＜1.0時為陽性，抗-HBs≥10 IU/L為陽性。②ELISA檢測：測定結(jié)果以S/CO表示，HBsAg、HBeAg、抗-HBs S/CO≥1.0為陽性；抗-HBe、抗-HBc S/CO＜1.0時為陽性。

1.5 統(tǒng)計學處理

研究中相關數(shù)據(jù)應用SPSS 21.0軟件處理分析，使用%表示研究中的計數(shù)資料，（±s）表示計量資料。采用t對組間對比進行檢驗，有統(tǒng)計學意義應用P＜0.05進行表示。

2 結(jié) 果

電化學發(fā)光法對于HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率均高于酶聯(lián)免疫吸附試驗，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩種檢測方法對于HBsAb、HBcAb陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩種檢測方法血清標志物的陽性檢出率

3 討 論

近年來，乙肝的發(fā)病率呈逐年攀升，發(fā)病年齡呈年輕化趨勢。早期積極檢查，及時確診是防止疾病進展的重要手段[3]。目前，臨床上主要通過ELISA、ECLIA等檢測手段對乙肝病毒血清學進行檢驗，為疾病的早期確診以及后續(xù)治療方案的實施提供參考[4]。

目前，酶聯(lián)免疫吸附法在臨床上廣泛應用，是早期檢驗乙肝病毒血清學的主要手段之一。但ELISA法的檢測結(jié)果容易受到人為操作因素的影響，如加樣后加酶結(jié)合物間隔時間、終止反應后延時比色時間、洗板次數(shù)、反應溫度等[5]，這些因素甚至會直接影響陰陽性結(jié)果的判斷。而且因為試劑制作工藝的差異以及保存方式的不同等原因，會導致此檢測方法的穩(wěn)定性不足，只能進行定性檢測，無法得知各標志物的真正濃度，在臨床使用上有一定的局限性。

隨著我國醫(yī)療技術的不斷發(fā)展，電化學發(fā)光法是目前臨床檢測中最為先進的技術。電化學發(fā)光法主要將發(fā)光技術和免疫測定技術相互結(jié)合，對患者進行半定量或定量的抗原檢測及微量抗體檢測。此次研究中對患者的乙型肝炎病毒感染血清標志物進行檢測時，電化學發(fā)光法對于HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性檢出率均高于酶聯(lián)免疫吸附試驗，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩種檢測方法對于HBsAb、HBcAb陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。由此可知，對乙型肝炎患者病毒感染血清標志物進行檢測時，電化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附法相比具有更高的靈敏度和準確度，而且操作起來也十分簡單?？捎行浹a人為操作的不足之處，最大限度降低漏診率、誤診率，提升臨床檢驗準確性。

綜上所述，將電化學發(fā)光法應用于乙肝病毒血清檢驗的效果更為顯著，且靈敏度較高，特異性好，適用于大規(guī)模自動化操作和定量檢測。具有更廣闊的發(fā)展前景。