‘琯溪蜜柚’中乙螨唑、啶蟲脒的殘留測(cè)定及套袋對(duì)殘留的影響

胡彧嫻

摘要：為評(píng)價(jià)乙螨唑、啶蟲脒在‘琯溪蜜柚’上使用的安全性以及套袋對(duì)殘留量的影響，對(duì)其殘留消解動(dòng)態(tài)進(jìn)行研究。在蜜柚上施藥進(jìn)行田間試驗(yàn)，2種施藥劑量分套袋和無套袋處理，QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行殘留檢測(cè)。結(jié)果表明，乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留消解動(dòng)態(tài)均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，乙螨唑套袋處理的半衰期（T1/2）為5.30～5.47天，無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天；啶蟲脒套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天。乙螨唑套袋處理的半衰期略長(zhǎng)于無套袋處理的半衰期，而套袋對(duì)啶蟲脒的半衰期影響不大。施藥后65天在蜜柚中沒有檢出乙螨唑和啶蟲脒殘留。

關(guān)鍵詞：乙螨唑；啶蟲脒；琯溪蜜柚；殘留；套袋

中圖分類號(hào)：S481.8文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A論文編號(hào)：cjas2020-0162

基金項(xiàng)目：2018年漳州市自然科學(xué)基金項(xiàng)目“琯溪蜜柚中多殘留QuEChERS HPLC-MS/MS檢測(cè)方法的建立及套袋控殘技術(shù)研究”（ZZ2018J30）。

Determination of Etoxazole and Acetamiprid Residue in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and Effect of Bagging on Residues

Hu Yuxian

（Zhangzhou Agricultural Test and Inspection Centre，Zhangzhou363000，F(xiàn)ujian，China）

Abstract： To evaluate the safety of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’and the effect of bagging on residues， a study on the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid was carried out. A field experiment was conducted on Citrus maxima‘Guanxi miyou’， two dosages were sprayed in bagging and non-bagging treatments， and then the residue was determined by QuEChERS combining with HPLC- MS/MS. The results showed that the residual degradation dynamics of etoxazole and acetamiprid followed the first-order kinetic equation， the half-life （T1/2） of etoxazole was 5.30-5.47 d in the bagging treatment， and 4.34-4.54 d in the non-bagging. T1/2 of acetamiprid was 3.42-3.80 d in the bagging treatment， and 3.04-3.70 d in the non-bagging. T1/2 of etoxazole was a little longer in the bagging treatment， but the T1/2 of acetamiprid had no obvious difference between the bagging and non- bagging treatment. The residues of etoxazole and acetamiprid in Citrus maxima‘Guanxi miyou’were not detected on the 65thday after spraying.

Keywords： Etoxazole； Acetamiprid； Citrus maxima‘Guanxi miyou’； Residue； Bagging

0引言

乙螨唑?qū)儆趪f唑類殺螨劑[1]，廣泛用于柑桔、棉花、花卉、蔬菜等作物上的葉螨防治[2]，具有殺卵、殺幼蟲活性[3]。啶蟲脒是一種廣譜的速效性殺蟲劑，具有觸殺、胃毒和較強(qiáng)的滲透作用[4]，在國(guó)內(nèi)廣泛用于防治蔬菜、水果等作物的蚜蟲[5]，對(duì)柑桔蚜蟲防治效果尤其突出[6]?！g溪蜜柚’是國(guó)內(nèi)柚類主栽良種之一[7]，原產(chǎn)于福建省平和縣[8]，是當(dāng)?shù)氐闹饕?jīng)濟(jì)作物。由于‘琯溪蜜柚’產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)效益較高，近年來種植規(guī)模不斷擴(kuò)大，現(xiàn)在平和已成為國(guó)內(nèi)最大的柚類生產(chǎn)基地縣和出口基地縣[8]。然而，隨著單一化種植及農(nóng)藥、化肥的不合理使用，蜜柚上的蟲害發(fā)生日趨嚴(yán)重，已影響到蜜柚的品質(zhì)和產(chǎn)量。乙螨唑和啶蟲脒作為防治蜜柚蟲害的主要農(nóng)藥品種之一，在生產(chǎn)上被廣泛使用。

國(guó)內(nèi)對(duì)乙螨唑的研究主要集中在藥效試驗(yàn)與復(fù)配研發(fā)方面[9-11]，對(duì)其檢測(cè)方法和殘留代謝研究報(bào)道并不多，僅在枸杞[12]、蘋果[13]、柑桔[14]上有相關(guān)報(bào)道。對(duì)啶蟲脒的檢測(cè)方法和殘留動(dòng)態(tài)方面已有諸多報(bào)道，主要集中在毛葉棗[15]、辣椒[16]、草莓[17]、黃瓜[18]、蘋果[19]、開心果[20]等作物上。但乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留及消解規(guī)律均沒有相關(guān)研究數(shù)據(jù)。

目前，果實(shí)套袋已成為生產(chǎn)綠色果品的主要栽培技術(shù)之一，其具有降低農(nóng)藥殘留[21]、減少果實(shí)病蟲為害及提高果實(shí)品質(zhì)[7，22]等優(yōu)點(diǎn)。筆者以‘琯溪蜜柚’為試材，建立QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速檢測(cè)方法，研究乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留動(dòng)態(tài)，并研究套袋對(duì)其殘留量的影響，旨在評(píng)價(jià)農(nóng)藥使用的安全性，為‘琯溪蜜柚’在種植過程中的科學(xué)用藥及其綠色化發(fā)展提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備

供試‘琯溪蜜柚’為7年生。供試農(nóng)藥為20%乙螨唑懸浮劑（100 mL/瓶，河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司）、 20%啶蟲脒可溶粉劑（25 g/袋，江蘇龍燈化學(xué)有限公司）。

乙螨唑、啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)品（100 mg/L，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）；無水MgSO4和NaCl均為分析純；N-丙基乙二胺（PSA，德國(guó)CNW公司）；乙腈、甲酸、甲醇均為色譜純。

T-18 basic ULTRA TURRAX高速勻漿機(jī)（德國(guó)IKA公司）；3-18K高速離心機(jī)（德國(guó)Sigma公司）；DIONEX Ultimate 3000- Thermo TSQ Quantum Ultra EMR高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)ThermoFisher公司）。

1.2田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

參照《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[23]，于漳州市平和縣小溪鎮(zhèn)厝丘村蜜柚園中實(shí)施田間試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)4個(gè)處理，2種施藥劑量，并分套袋和無套袋2種處理。每個(gè)處理6株蜜柚，設(shè)3個(gè)重復(fù)；以清水噴霧的無套袋處理為空白對(duì)照（表1）。

于2018年7月8日（此時(shí)蜜柚已謝花約90天）按常規(guī)方法對(duì)整株蜜柚進(jìn)行均勻施藥，施藥后2天內(nèi)無降雨，套袋處理待蜜柚表面的藥液完全干燥才能進(jìn)行。采用1次施藥多次采樣的方法，分別于施藥后0（約 2 h，此時(shí)果實(shí)表面藥液已干）、1、3、7、15、30、65天采集蜜柚樣品測(cè)定殘留量。

1.3分析方法

1.3.1提取與凈化參考蔡恩興[24]建立的QuEChERS方法。稱取10 g（精確至0.01 g）攪碎成勻漿的蜜柚全果樣品于50 mL離心管中，加入20.0 mL乙腈、1.0 g NaCl和4.0 g無水MgSO4，在勻漿機(jī)中高速勻漿提取2 min，4500 r/min離心5 min，吸取2.0 mL上清液加到內(nèi)含0.10 g PSA和0.30 g無水MgSO4的離心管中，渦旋1 min，過0.22μm有機(jī)濾膜，待高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。

1.3.2檢測(cè)條件

（1）液相色譜條件。色譜柱為Atlantis T3 Column（100 mm×2.1 mm，3μm）；流動(dòng)相為0.1%甲酸（A相）和甲醇（B相）；流速為0.25 mL/min；進(jìn)樣體積為2.0μL；乙螨唑保留時(shí)間為7.31 min；啶蟲脒保留時(shí)間為5.28 min；流動(dòng)相及梯度洗脫程序見表2。

（2）質(zhì)譜條件。質(zhì)譜掃描模式為電噴霧正離子掃描（ESI+）；離子傳輸管溫度為300℃；噴霧溫度為270℃；噴霧電壓為4000 V；鞘氣（N2）流速為3.62 L/min，輔助氣（N2）流速為5.38 L/min，放電電流為4.0μA，SRM檢測(cè)模式；乙螨唑和啶蟲脒質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)見表3。

2結(jié)果與分析

2.1質(zhì)譜條件的優(yōu)化

選擇ESI+離子源，將1 mg/L的農(nóng)藥標(biāo)樣經(jīng)注射泵注入質(zhì)譜，調(diào)節(jié)合適的注射泵流速及離子源氣流、電壓、溫度等使待測(cè)物信號(hào)大于106響應(yīng)，且響應(yīng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。通過全掃描確定母離子，選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM模式）進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜自動(dòng)優(yōu)化，分析質(zhì)譜圖及碰撞能量，最終確定單個(gè)農(nóng)藥的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)。

2.2線性范圍和靈敏度

將蜜柚空白樣品按上述QuEChERS方法進(jìn)行處理，得到空白基質(zhì)溶液，配制基質(zhì)匹配系列標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2種農(nóng)藥在0.5～500μg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，乙螨唑的線性回歸方程如式（1），啶蟲脒的線性回歸方程如式（2）。

以3倍和10倍信噪比（S/N）計(jì)算檢出限和定量限，乙螨唑的檢出限為0.05μg/kg、定量限為0.17μg/kg，啶蟲脒的檢出限為0.06μg/kg、定量限為0.20μg/kg。

2.3添加回收試驗(yàn)

在蜜柚空白樣品中分別加入2、20和200μg/kg 3個(gè)水平的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，每個(gè)水平重復(fù)5次。按1.3.1和1.3.2方法進(jìn)行前處理和上機(jī)測(cè)定，乙螨唑的回收率為86.6%～97.6%、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.6%～12.0%，啶蟲脒的回收率為80.2%～ 109.4%、RSD為7.2%～9.6%。表明該方法適用于蜜柚中乙螨唑和啶蟲脒的殘留測(cè)定。

2.4殘留動(dòng)態(tài)及消解規(guī)律

2.4.1殘留量與消解率乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚中的殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)結(jié)果（表4～5）顯示，不同施藥劑量處理的原始沉積量存在一定差異。按推薦劑量（5000倍液）處理，乙螨唑和啶蟲脒在蜜柚上的原始沉積量分別為0.115～0.121、0.132～0.143 mg/kg，而加倍劑量（2500倍液）處理分別為0.213～0.232、0.241～0.255 mg/kg，說明2種農(nóng)藥的原始沉積量與其施藥劑量有關(guān)。

在施藥劑量和采樣時(shí)間相同的條件下，2種農(nóng)藥套袋處理的消解率均略低于無套袋處理，但在施藥后30天消解率均大于98%，最終趨于一致。

2.4.2殘留消解規(guī)律及最終殘留對(duì)2種農(nóng)藥進(jìn)行回歸分析（表6～7），其殘留消解動(dòng)態(tài)均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程。乙螨唑在蜜柚中4種處理的相關(guān)系數(shù)（r）在0.9925～0.9960之間，消解系數(shù)（k）在0.1267～0.1596之間，套袋處理的半衰期（T1/2）為5.30～5.47天，消解99%所需要的時(shí)間（T0.99）為35.1～36.3天；無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天，T0.99為28.8～30.1天，套袋處理的半衰期略長(zhǎng)于無套袋的半衰期。

啶蟲脒4種處理的相關(guān)系數(shù)（r）在0.9941～0.9999之間，消解系數(shù)（k）在0.1824～0.2278之間，套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，T0.99所需要的時(shí)間為22.7～25.2天；無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天，T0.99為20.2～24.5天，套袋對(duì)啶蟲脒的半衰期影響不大。

在蜜柚成熟收獲時(shí)（施藥后65天）進(jìn)行采樣，測(cè)定其最終殘留量，2種農(nóng)藥的4種處理均未檢出其殘留。

3討論

本試驗(yàn)建立了QuEChERS結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜快速檢測(cè)方法，對(duì)蜜柚中乙螨唑和啶蟲脒的殘留量進(jìn)行測(cè)定。乙螨唑的檢出限為0.05μg/kg，定量限為0.17μg/kg，回收率為86.6%～97.6%；啶蟲脒的檢出限為0.06μg/kg，定量限為0.20μg/kg，回收率為80.2%～ 109.4%。該分析方法操作簡(jiǎn)單，靈敏度較高，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

2種農(nóng)藥在蜜柚中的殘留消解動(dòng)態(tài)均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，乙螨唑套袋處理的T1/2為5.30～5.47天，無套袋處理的T1/2為4.34～4.54天，套袋處理的半衰期略長(zhǎng)于無套袋的半衰期，原因可能是套袋后乙螨唑受光解、雨淋等外界環(huán)境因素影響較小，因而消解較慢。而啶蟲脒套袋處理的T1/2為3.42～3.80天，無套袋處理的T1/2為3.04～3.70天，套袋對(duì)啶蟲脒的半衰期影響不大，這可能與啶蟲脒具有內(nèi)吸性有關(guān)，在一定程度上受外界因素干擾較少，但有待于進(jìn)一步研究確認(rèn)。

目前，在GB 2763—2019[25]中最新規(guī)定乙螨唑、啶蟲脒在蜜柚上的最大殘留限量（MRL）分別為0.1、2 mg/kg，根據(jù)殘留消解動(dòng)力學(xué)方程測(cè)算（表6），乙螨唑套袋處理的安全間隔期分別為0.9、6.2天，無套袋處理的安全間隔期分別為0.9、5.7天，不同的施藥劑量對(duì)其安全間隔期有較大的影響；而啶蟲脒在蜜柚上的MRL值較大，按常規(guī)方法進(jìn)行噴施則無安全間隔期問題。本研究先充分施藥再進(jìn)行套袋，采用1次施藥多次采樣檢測(cè)的方法，并在果實(shí)成熟后測(cè)定其最終殘留量，2種農(nóng)藥的4種處理均未檢出其殘留，表明2種農(nóng)藥在蜜柚上使用具有較好的安全性。對(duì)蜜柚進(jìn)行套袋可以減少農(nóng)藥使用次數(shù)，節(jié)省生產(chǎn)成本，促進(jìn)蜜柚產(chǎn)業(yè)綠色發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1]王飛菲，解維星，呂文東，等.25%乙螨唑·噠螨靈懸浮劑的配方研究與開發(fā)[J].中國(guó)農(nóng)藥，2019（2）：37-40.

[2]王志靜，蔣迎春，何利剛，等.乙螨唑?qū)Ω探廴︱氖覂?nèi)毒力測(cè)定[J].中國(guó)南方果樹，2012，41（4）：75-76.

[3]戴煒鍔，程志明.新穎殺螨劑——乙螨唑的合成[J].浙江化工， 2009，40（7）：7-9.

[4]石貴華.50%啶蟲脒水分散粒劑在柑橘和土壤中殘留量及消解動(dòng)態(tài)[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2012，11（1）：46-49，53.

[5]王駿.HPLC/MS測(cè)定啶蟲脒在蔬菜、水果中殘留量[J].農(nóng)藥，2007， 46（8）：535-537.

[6]徐春明，儲(chǔ)春榮.啶蟲脒防治柑桔蚜蟲和潛葉蛾藥效試驗(yàn)[J].農(nóng)藥， 2000，39（7）：25-26.

[7]趙曉玲，佘文琴，林慧穎.不同套袋處理對(duì)琯溪蜜柚果實(shí)品質(zhì)的影響[J].中國(guó)南方果樹，2012，41（4）：62-64.

[8]李發(fā)林，曾瑞琴，危天進(jìn)，等.福建省平和縣琯溪蜜柚果園土壤磷環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)研究[J].中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2018，23（8）：1001-1009.

[9]岳建蘇，李鴻筠，冉春.乙螨唑及其復(fù)配劑對(duì)柑桔全爪螨田間藥效試驗(yàn)[J].中國(guó)南方果樹，2013，42（6）：54-55.

[10]李戎.乙螨唑水分散粒劑和阿維菌素微乳劑防治柑桔全爪螨藥效試驗(yàn)[J].中國(guó)南方果樹，2015，44（4）：21-22.

[11]石丹艷.18%阿維菌素·乙螨唑懸浮劑防治柑橘紅蜘蛛田間藥效試驗(yàn)初報(bào)[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2018，24（9）：77-78.

[12]牛艷，陳翔，楊靜，等.枸杞中乙螨唑殘留量的高效液相色譜測(cè)定方法及消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥，2018（12）：905-907.

[13]官帥，張樹秋，李慧冬，等.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定乙螨唑在蘋果和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2015，17（4）：480-485.

[14]王蒙岑，吳慧明，劉少穎，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析乙螨唑在柑桔和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2009，11（4）： 456-461.

[15]林濤，李泳波，陳興連，等.毛葉棗中多菌靈、吡蟲啉和啶蟲脒消解動(dòng)態(tài)研究[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2018，39（8）：1630-1635.

[16]郇志博，謝德芳.啶蟲脒在辣椒上的殘留行為研究及膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2014，35（10）：2093-2097.

[17]馬俊嶺，楊寶東，張志勇，等.啶蟲脒防治草莓蚜蟲的殘留動(dòng)態(tài)及膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].農(nóng)藥，2014，53（5）：346-349.

[18]丁悅，孫星，汪佳蕾，等.露地和大棚條件下啶蟲脒在黃瓜和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2014，16（1）：110-114.

[19]劉新剛，董豐收，楊爽，等.啶蟲脒在蘋果和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥，2007，46（10）：693-695.

[20]Faraji M， Noorbakhsh R， Shafieyan H， et al. Determination of acetamiprid， imidacloprid， and spirotetramat and their relevant metabolites in pistachio using modified QuEChERS combined with liquid chromatography-tandemmassspectrometry[J]. Foodchemistry， 2018，240：634-641.

[21]陳合，李祥，李利軍.套袋對(duì)蘋果果實(shí)重金屬及農(nóng)藥殘留的影響[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2006，22（1）：189-191.

[22]王建武，陳厚彬，周強(qiáng)，等.套袋對(duì)荔枝果實(shí)質(zhì)量和農(nóng)藥殘留的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2003，14（5）：710-712.

[23]農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，山西省農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室.NY/T 788—2004，農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004：2-4.

[24]蔡恩興.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水果蔬菜中烯肟菌胺殘留[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2017，38（10）：1963-1968.

[25]中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.GB 2763—2019，食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2019：72， 266.