咳寧糖漿的薄層色譜鑒別研究

曹鈴鈴

（江蘇省南通市通州區(qū)中醫(yī)院藥劑科，江蘇 南通 226300）

咳寧糖漿是由重樓、大青葉、枳殼、黃芪等11味中藥組成的復(fù)方制劑，具有清熱益氣、宣肺化痰的功效，主治風(fēng)熱犯肺癥，多用于治療急慢性支氣管炎和支氣管哮喘，尤其適用于反復(fù)發(fā)作、遷延不愈的頑固性咳嗽，臨床療效確切。重樓、枳殼、黃芪三味藥材是咳寧糖漿組方中的君藥，其成分含量與藥材質(zhì)量對(duì)制劑的療效有著直接影響。為控制咳寧糖漿產(chǎn)品質(zhì)量，筆者參考《中國(guó)藥典》（2010版）關(guān)于三味藥材或飲片的薄層色譜鑒別方法[1]，以及含有這三味藥材的中成藥制劑對(duì)藥材的鑒別方法，建立簡(jiǎn)單易行、專屬性強(qiáng)的薄層色譜法對(duì)三味藥材進(jìn)行定性鑒別。經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，增加了重樓、枳殼、黃芪的薄層色譜鑒別，并對(duì)其陰性對(duì)照進(jìn)行了薄層色譜鑒別的研究，效果滿意，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

儀器：瑞士GAMAG薄層色譜數(shù)碼成像系統(tǒng)，型號(hào)：TLC Visualizer；賽多利斯 BS110S電子天平，精度0.0000g；上海KZW-G型恒溫不銹鋼水浴鍋；昆山舒美KQ-250B型超聲波清洗機(jī)，超聲頻率20～40 KHz。

試藥：咳寧糖漿（批號(hào)：140825、140902、140903）及陰性對(duì)照，均由通州區(qū)中醫(yī)院提供；重樓對(duì)照藥材（121157-200402），購(gòu)自于中國(guó)食品藥品檢定研究院；枳殼對(duì)照藥材（120981-200403），購(gòu)自于中國(guó)食品藥品檢定研究院；黃芪甲苷（110781-200613），購(gòu)自于中國(guó)食品藥品檢定研究院。

試劑：硅膠G薄層板，產(chǎn)自青島海洋化工廠；乙腈為色譜純?cè)噭?；其他試劑均為分析純?/p>

2 方 法

2.1 重樓的薄層色譜鑒別

取咳寧糖漿20 ml，加入30 ml水飽和正丁醇液（混合比1:1）振搖提取，重復(fù)操作2次，將2次振搖提取的正丁醇溶液合并，加入氨試液20 ml洗滌，重復(fù)操作2次后，棄去氨試液，蒸干正丁醇液，取殘?jiān)? ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取重樓對(duì)照藥材1 g，加水50 ml煎煮30 min，濾過(guò)取液，濃縮至20 ml，加30 ml水飽和的正丁醇溶液，同法制成對(duì)照藥材溶液。

取一張硅膠G薄層板，上面分別點(diǎn)上供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各5 μ1，操作參照《中國(guó)藥典》（2010版附錄Ⅵ B）[2]，展開(kāi)劑為三氯甲烷-甲醇-水下層液，成分比15:5:1。樣本常規(guī)展開(kāi)、取出、晾干后，表面噴10%硫酸乙醇溶液，在烘箱105℃加熱至斑點(diǎn)清晰顯色，分別在日光下和紫外光燈下進(jìn)行檢視，紫外線波長(zhǎng)365 nm。供試品色譜中與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，是相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。

2.2 枳殼的薄層色譜鑒別

取咳寧糖漿用乙酸乙酯振搖提取，除此之外，供試品溶液與對(duì)照藥材溶液的制作方法同重樓一致。同法依照《中國(guó)藥典》，分別在硅膠G薄層板上滴加枳殼供試品溶液5 μl、對(duì)照藥材溶液10 μl，成分比100:17:13。展開(kāi)約5 cm后，取出晾干，再次使用展開(kāi)劑甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水上層液展開(kāi)，展開(kāi)劑成分比20:10:1:1。再次取出后晾干，表面噴三氯化鋁試液，熱風(fēng)吹干后，365 nm波長(zhǎng)紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，呈相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

2.3 黃芪的薄層色譜鑒別

取本品20 ml，用水飽和正丁醇振搖提取二次，每次30 ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌二次，每次40 ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干黃芪取用量、振搖提取方法、洗滌與蒸干方法等同重樓，殘?jiān)铀? ml溶解后，通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱，樹(shù)脂柱參數(shù)：直徑1.5 cm，高1.2 dm。依次使用水50 ml洗脫、稀乙醇50 ml、70%乙醇50 ml洗脫樣本，收集洗脫液，蒸干后殘?jiān)蛹状? ml溶解，制成供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加入甲醇制成比例為1 ml:1 mg的對(duì)照品溶液。同法硅膠G玻板上滴加兩種溶液各5 μ1，以三氯甲烷-甲醇-水下層液為展開(kāi)劑，成分比13:7:2，放置溫度10℃。展開(kāi)后取出晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱顯色后日光和紫外線下檢視，具體同重樓測(cè)定操作一致，其供試品色譜斑點(diǎn)的位置與顏色顯示情況也同重樓。

2.4 觀察指標(biāo)

獲取薄層鑒別色譜圖，觀察不同批次樣本重樓、枳殼、黃芪三味藥材與對(duì)照藥材的斑點(diǎn)情況，驗(yàn)證專屬性。

3 結(jié) 果

咳寧糖漿組方中重樓的薄層色譜鑒別色譜圖見(jiàn)圖1，發(fā)現(xiàn)不同批次的樣本均檢出與重樓對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的斑點(diǎn)，而缺重樓的陰性對(duì)照在相同位置未檢出斑點(diǎn)，說(shuō)明陰性對(duì)照無(wú)干擾，方法的專屬性較好。枳殼的薄層色譜鑒別圖見(jiàn)圖2，發(fā)現(xiàn)不同批次的樣品均檢出對(duì)照品斑點(diǎn)，且與枳殼對(duì)照藥材相應(yīng)的位置有相同的熒光斑點(diǎn)，缺枳殼的陰性對(duì)照無(wú)干擾，說(shuō)明方法的專屬性較好。此外，黃芪的薄層色譜鑒別圖上也可見(jiàn)不同批次的咳寧糖漿均檢出與黃芪甲苷對(duì)照品相對(duì)應(yīng)的斑點(diǎn)，陰性無(wú)干擾，說(shuō)明該薄層鑒別方法的專屬性比較好。

圖1 重樓薄層色譜鑒別圖

圖2 枳殼薄層色譜鑒別圖

4 討 論

薄層色譜法利用不同成分對(duì)吸附劑吸附能力的差異進(jìn)行成分分離，根據(jù)比移值與對(duì)照物按同法所得色譜圖比移值進(jìn)行對(duì)比，來(lái)鑒別藥品、檢查雜志或測(cè)定含量[3]。此法具有操作簡(jiǎn)單、分離能力強(qiáng)、展開(kāi)時(shí)間短、顯色方便、斑點(diǎn)集中、色譜直觀性強(qiáng)的技術(shù)特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)[4]，可以快速分離和定性分析少量物質(zhì)，靈敏度高，在藥品純度檢測(cè)與質(zhì)量控制方面發(fā)揮著重要作用[5]。本研究采用此法對(duì)我院自制咳寧糖漿中的三味君藥進(jìn)行定性鑒別，結(jié)果示專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，且無(wú)陰性干擾，提示用該制劑質(zhì)量控制有效可行，對(duì)我院自制制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高起到積極地推動(dòng)作用，有利于確保臨床用藥安全與有效，值得推廣使用。