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    萃取法與索氏提取法提取當歸中阿魏酸含量結果的比較

    2011-05-02 03:01:50張培培韓春超
    藥學研究 2011年5期
    關鍵詞:索氏冰醋酸項下

    張培培,韓春超

    (山東中醫(yī)藥大學藥學院,山東 濟南 250355)

    當歸為傘形科植物Angellica sinensis(Oliv)Diels.的根。具有補血調(diào)經(jīng),活血止痛,潤腸通便的功效。主要用于熱血虛諸癥,血虛血瘀,月經(jīng)不調(diào),經(jīng)閉,痛經(jīng),虛寒性腹痛,跌打損傷,癰疽瘡瘍,風寒痹痛,血虛腸燥便秘[1]。當歸所含有效成分主要是阿魏酸[2],具有促進細胞免疫和體液免疫,增強單核細胞的吞噬功能[3]。本實驗以阿魏酸為指標綜合評判,對萃取法與索氏提取法進行對比研究。

    1 儀器與材料

    MA110型電子分析天平(上海第二分析儀器廠);KQ—100B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);LXI—Ⅲ離心沉淀器(上海醫(yī)療器械三廠);Agilent 1100高效液相色譜儀。

    阿魏酸對照品(批號:110773-200611,供含量測定用)購自中國藥品生物制品檢定所;甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純。

    2 方法與結果

    2.1 樣品液的制備 將當歸中藥材粉碎,稱取10~20目的當歸粗粉25 g,浸泡0.5 h,用中性水加熱回流提取3次(加水量依次為藥材重量的10,8,8倍,提取時間依次為3.0,3.0,3.0 h),提取液用8層紗布分別濾過,濾液離心(3000 r·min-1,15 min),合并上清液,在水浴鍋上濃縮并定容。

    2.2 提取方法比較

    2.2.1 索氏提取法制備供試液 取樣品液于蒸發(fā)皿中水浴蒸至近干,加硅藻土3 g,攪勻,烘干,研細,以甲酸-乙酸乙酯(1∶19)索氏提取2 h,回收溶劑,殘渣加適量甲醇使溶解,轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,得到供試液A。

    2.2.2 萃取法制備供試液 取樣品液用甲酸-乙酸乙酯(1∶19)萃取(20 mL×6次),合并萃取液,回收溶劑至干,殘渣加適量甲醇使溶解,轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,得到供試液B。

    2.3 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品2.370 mg,用甲醇-1%冰醋酸(30∶70)溶解并定容至5 mL,制成對照液A(每1 mL含當歸液0.474 mg),取對照液A,用甲醇-1%冰醋酸(30∶70)稀釋成 0.0077 mg·mL-1,0.0159 mg·mL-1,0.0316 mg·mL-1,0.0633 mg·mL-1,0.1263 mg·mL-1對照液 A1~5。

    2.4 阿魏酸的含量測定

    2.4.1 色譜條件 色譜柱為 Kromasil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm);流動相為甲醇-1%冰醋酸(30∶70);檢測波長320 nm;進樣量20 μL;柱溫30 ℃。

    2.4.2 線性關系考察 精密吸取2.3項下對照品溶液A1~5,按2.4.1項下色譜條件,依法測定。以進樣濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,計算回歸方程為:Y=3151.9X-3.7704,r=0.9999,表明在0.0077~0.1263 mg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關系良好。

    2.4.3 含量測定[4]依次吸取阿魏酸對照品溶液和2.2項下供試液A、B,按2.4.1項下色譜條件,依法測定,結果見圖1、圖2 和圖3、表1。

    圖3 索氏提取法的阿魏酸圖譜

    表1 2種供試液中阿魏酸成分的含量比較

    3 小結與討論

    3.1 根據(jù)阿魏酸含量測定結果比較,索氏提取法提取阿魏酸高于萃取法,表明當歸有效成分的提取索氏提取法優(yōu)于萃取法。

    3.2 采用不同比例甲醇-水溶液進行試驗,結果發(fā)現(xiàn)加入冰醋酸可明顯改善峰形,提高柱效??梢罁?jù)不同色譜柱,調(diào)整甲醇與水的比例,以縮短分析時間。

    [1]高學敏.中藥學[M].2版.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:460.

    [2]匡海學.中藥化學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2003:99.

    [3]袁麗霞,王紅.HPLC法測定當歸苦參丸中阿魏酸的含量[J].中國藥事,2008,22(1):61.

    [4]張兆旺,王英姿,孫秀梅.當歸苦參丸2種方法提取液的成分比較[J].中國中藥雜志,1999,24(12):734-735.

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