血漿Septin9基因甲基化與結(jié)直腸癌的研究進(jìn)展

許冠雄，吳釔江

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗科，重慶400010)

0 引言

結(jié)直腸癌是世界第四大致死癌癥，隨著經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展，人口老齡化進(jìn)程加快，國民生活習(xí)慣和飲食結(jié)構(gòu)也隨之轉(zhuǎn)變，近年來我國患有直結(jié)腸癌的患者比例逐年上升，發(fā)生率占據(jù)各腫瘤疾病發(fā)生的前5位且我國早期診斷率僅5-10%[1]。早期預(yù)防，早期篩查，早期診斷并采取有效措施進(jìn)行干預(yù)治療對于減少CRC的發(fā)病率和病死率，提高患者的帶病生存年限具有至關(guān)重要的作用。目前，結(jié)直腸癌常見的早期篩查方式為CEA檢測、FOB試驗和結(jié)直腸鏡檢。然而前兩者CEA與FOB的臨床應(yīng)用價值有限，而后者結(jié)直腸鏡檢雖為金標(biāo)準(zhǔn)、特異度高，但早期篩查敏度不甚理想，且其需腸道準(zhǔn)備、檢查禁忌證多、患者依從性差、侵入性操作易造成并發(fā)癥等諸多不便而應(yīng)用有限[2]。上述情況對于結(jié)直腸癌早期篩查、診斷造成一定的障礙。而血漿mSeptin9檢測的檢測標(biāo)本為血漿，可達(dá)到無創(chuàng)取樣、方便且檢測快速的目的，且在 CRC 中診斷價值較高，近年來逐漸開始用于結(jié)直腸癌的相關(guān)早期篩查、診斷之中。

1 SEPTIN9基因甲基化與CRC的發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)性

結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個由多種基因參與、受眾多因素影響，并需經(jīng)歷多階段演變的復(fù)雜過程，其確切機(jī)制尚不明確，目前較公認(rèn)的是“腺瘤→癌變”學(xué)說[3]，其致病機(jī)制主要包括有CpG島甲基化、微衛(wèi)星不穩(wěn)定和染色體不穩(wěn)定3種，其可單獨致病，也可多種途徑交錯綜合作用。Septin9基因在結(jié)直腸癌發(fā)生中起抑癌基因作用，若中央鳥核苷酸序列結(jié)構(gòu)域發(fā)生突變，該基因的抑癌功能就會喪失，從而導(dǎo)致細(xì)胞分裂的調(diào)控紊亂，并逐漸趨向癌變。研究表明[4, 5]，直結(jié)腸癌患者在患病的過程中約90%的患者SEPT9基因中的CpG島發(fā)生甲基化。Toth[6]等通過檢測CRC患者在不同階段中體內(nèi)mRNA及相關(guān)蛋白表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)Septin9 mRNA及相關(guān)蛋白表達(dá)水平會因為結(jié)腸癌細(xì)胞逆甲基化而增加，這說明mSeptin9狀態(tài)與CRC的發(fā)生、發(fā)展過程緊密相關(guān)，而且這個過程具有可逆性，所以mSeptin9將來也可能發(fā)展為CRC干預(yù)治療和預(yù)后監(jiān)測的重要指標(biāo)。綜上，從近年來相關(guān)研究中我們可以得出一個結(jié)論，CRC的發(fā)生、發(fā)展與mSeptin9具有高度相關(guān)性。

2 血漿mSeptin9檢測在結(jié)直腸癌中的臨床價值

mSeptin9的獨立早期篩查價值康倩[7]等研究發(fā)現(xiàn)，相比于高敏感，低特異的糞便潛血試驗，CRC患者血漿中mSeptin9檢測的檢測靈敏度為75.0%，特異度為98.1% ，具有較好的臨床應(yīng)用價值。Grutzmann R[8]等通過雙盲法病例對照研究血漿中的mSeptin9檢測情況，檢測結(jié)果顯示實驗組（CRC患者組）的陽性檢出率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組（健康人群），此差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。同時為更加充分地闡述Septinn9基因甲基化與結(jié)直腸癌的關(guān)系，該研究還納入非惡性疾病患者和其他惡性腫瘤患者作為研究對象,對照研究結(jié)果顯示CRC組的陽性檢出率明顯高于非惡性疾病患者和其他惡性腫瘤患者，該差異也有統(tǒng)計學(xué)意義。其他相關(guān)報道[9]也得出類似的結(jié)論:與非結(jié)直腸癌患者和正常健康人群相比,CRC患者血漿中mSeptin9水平明顯升高。另有研究表明[5]，直結(jié)腸癌患者在整個病程中約90%的患者Septin9基因中的CpG島發(fā)生甲基化，相比于正常的癌旁或結(jié)腸組織有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異，具有較高的特異性，已成為結(jié)直腸癌的早期診斷分子標(biāo)志之一。

當(dāng)然，這種方法也存在一定的不足。陳培[9]等研究發(fā)現(xiàn)mSeptin9陽性率在各結(jié)直腸癌臨床病理分化階段以及腫瘤存在部位的相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義。Warren[10]和Church[11]等針對結(jié)直腸腺瘤和息肉進(jìn)行研究，設(shè)置實驗組（結(jié)直腸腺瘤和息肉患者）和對照組，實驗結(jié)果顯示實驗組與對照組的陽性檢出率間的差異都沒有統(tǒng)計學(xué)意義，這說明血漿Septin9基因甲基化檢測在結(jié)直腸腺瘤和息肉等癌前病變中的特異性和敏感度極低，對于此類疾病的檢出效果非常不理想。李士杰[12]等也針對23例腺瘤患者進(jìn)行了mSeptin9檢測，結(jié)果也得出了類似的結(jié)論：該方法在腺瘤中的陽性檢出率極低。

綜上，我們可以得出結(jié)論，雖然血漿中mSeptin9檢測可適用于結(jié)直腸癌臨床病理分化程度各階段的患者，但是與其各階段間的相關(guān)性不大。且此方法在結(jié)直腸癌癌前病變患者中的檢出率極低，亦不能針對此類癌前病變進(jìn)行早期篩查、早期診斷。

mSeptin9與FOB或CEA聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用價值黎陽[2]等研究顯示，mSeptin9的ROC曲線下面積（AUC）為0.828，F(xiàn)OB的AUC為0.674，而mSeptin9與FOB聯(lián)合診斷的AUC為0.851，這說明二者聯(lián)合診斷的臨床應(yīng)用價值高于mSeptin9和FOB單獨檢測。吳東等[13]研究闡明mSeptin9聯(lián)合FOB檢測，其診斷大腸進(jìn)展期腺瘤的靈敏度為67.6%，特異度為47.4%，這說明二者聯(lián)合檢測對監(jiān)測結(jié)直腸的癌前病變也有一定的參考價值。鄧子昂[14]等以診斷為結(jié)直腸癌且尚未行抗腫瘤治療的患者為受試者進(jìn)行mSeptin9和CEA單獨檢測與聯(lián)合檢測的陽性率比較，發(fā)現(xiàn)mSeptin9單獨檢測診斷結(jié)直腸癌的陽性率和CEA比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；同時，當(dāng)mSeptin9和CEA兩者聯(lián)合檢測時，診斷結(jié)直腸癌陽性率為78.5%，顯著高于mSeptin9與CEA的單獨檢測的66.4%和41.1%，這證明了mSeptin9與CEA的聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用價值明顯高于二者單獨檢測。故mSeptin9與CEA或FOB的聯(lián)合檢測將大大提高結(jié)直腸癌的診斷陽性率，臨床應(yīng)用價值遠(yuǎn)高于三者單獨檢測對結(jié)直腸癌患者的診斷，且對監(jiān)測結(jié)直腸的癌前病變也有一定的參考價值。

mSeptin9在結(jié)直腸癌術(shù)后及預(yù)后的監(jiān)測價值黃劍輝[15]等通過對開展了腹腔鏡手術(shù)治療后的結(jié)直腸癌患者的mSeptin9、CEA的陽性率隨訪監(jiān)測中，發(fā)現(xiàn)2至6個月內(nèi)mSeptin9對結(jié)直腸癌術(shù)后轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的監(jiān)測準(zhǔn)確率為86.73%、靈敏度 73.68%、特異度 95.00%、陽性預(yù)測值90.32%、陰性預(yù)測值85.07%，其結(jié)果遠(yuǎn)高于CEA與之對應(yīng)的監(jiān)測準(zhǔn)確率62.24%、靈敏度 34.21%、特異度 80.00%、陽性預(yù)測值 52.00%、陰性預(yù)測值 65.75%。這表明血漿mSeptin9具有比血清CEA更高的結(jié)直腸癌術(shù)后監(jiān)測價值，作為結(jié)直腸癌腹腔鏡手術(shù)后隨訪項目具有一定的意義。楊寧等[16]研究表明有97.5%的結(jié)直腸癌患者在接受手術(shù)治療后1d mSeptin9的水平出現(xiàn)了明顯的下降乃至陰性，且術(shù)后7d內(nèi)mSeptin9水平呈現(xiàn)持續(xù)下降趨勢。這也可得出結(jié)論：mSeptin9的水平與疾病的進(jìn)展和預(yù)后有著良好好的相關(guān)性。由此，血漿mSeptin9檢測作為結(jié)直腸癌的早期篩查診斷指標(biāo)之外，其在結(jié)直腸癌的術(shù)后及預(yù)后中亦可起到一定的監(jiān)測價值，這對于通常以手術(shù)創(chuàng)傷程度、術(shù)后恢復(fù)速度與生存時間的傳統(tǒng)術(shù)后及預(yù)后評價方法來說也極具創(chuàng)新意義。

3 討論

經(jīng)證實，mSeptin9與CRC的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后呈現(xiàn)高度相關(guān)性?；谘獫{mSeptin9檢測方法具有微創(chuàng)，取樣方便，患者依從性高，檢出效果理想，特異性較高等優(yōu)點，適合于結(jié)直腸癌的臨床診斷，因此它可作為結(jié)直腸癌臨床診斷的重要腫瘤標(biāo)志物之一，更重要的是該指標(biāo)不受年齡、性別及腫瘤發(fā)生部位的影響。當(dāng)然我們對Septin9基因與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系的了解還只是冰山一角，目前尚無針對mSeptin9、FOB、CEA三者聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用價值進(jìn)行探討的報道；其次，mSeptin9聯(lián)合檢測對癌前病變的早期篩查價值雖有所改觀但有待進(jìn)一步的研究。希望通過今后不斷地深入研究，系統(tǒng)闡明Septin9基因的生物學(xué)功能和表達(dá)情況及其與結(jié)直腸癌的關(guān)系，進(jìn)一步探索其在結(jié)直腸癌治療干預(yù)和術(shù)后監(jiān)測的臨床應(yīng)用價值，使其成為早期預(yù)測結(jié)直腸癌發(fā)生的腫瘤標(biāo)志物和基因治療的理想靶點。

綜上所述，血漿mSeptin9檢測及其相關(guān)聯(lián)合檢測對于結(jié)直腸癌的篩查、診斷、進(jìn)展、預(yù)后評估等方面均有不錯的臨床應(yīng)用價值，具有臨床推廣意義。