尿有形成分分析儀和人工鏡檢在尿液檢查中的應(yīng)用分析

費(fèi)虎

(江陰市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 江陰)

0 引言

尿液成分的變化對(duì)于泌尿系統(tǒng)和其他組織狀況的指示具有重要意義，借助尿液常規(guī)檢查，有助于醫(yī)生快速排查尿路感染、腎臟或其他器官疾病[1]。臨床常使用干化學(xué)法檢測(cè)尿液相關(guān)指標(biāo)，尿干化學(xué)分析法檢測(cè)標(biāo)本用量少，速度快，適合大批量標(biāo)本的篩查，其原理是利用尿分析試紙條與尿液化學(xué)成分反應(yīng)來(lái)檢測(cè)尿液相應(yīng)物質(zhì)的濃度，對(duì)于白細(xì)胞、紅細(xì)胞等成分并非直接檢測(cè)，不能觀察尿液細(xì)胞的形態(tài)，還易受各種外來(lái)因素的干擾[2]。如果有蛋白尿、亞硝酸鹽陽(yáng)性，或紅細(xì)胞、白細(xì)胞增多等，需將尿液標(biāo)本通過(guò)顯微鏡進(jìn)一步分析。人工鏡檢作為尿有形成分檢查的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]，可以直接觀察細(xì)胞、管型等成分的真實(shí)形態(tài)，但人工鏡檢需要經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員，難以標(biāo)準(zhǔn)化，需花費(fèi)大量時(shí)間，所以如今實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)通常使用自動(dòng)尿有形成分分析儀。本研究對(duì)比分析邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀和人工鏡檢檢測(cè)結(jié)果，探討其應(yīng)用于尿液檢查的價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2019 年12 月于我院就診患者隨機(jī)尿標(biāo)本581例，其中男性242 例，女性339 例。

1.2 方法

對(duì)同一患者標(biāo)本，分別用尿有形分析儀檢測(cè)和人工顯微鏡鏡檢。檢測(cè)儀器：深圳邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀，日本奧林巴斯CX21 型光學(xué)顯微鏡。尿分析儀每日按時(shí)維護(hù)保養(yǎng)，定期校準(zhǔn)，嚴(yán)格按儀器SOP 操作。人工鏡檢由從事尿液檢驗(yàn)多年的主管技師操作，按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]，用試管取尿液10mL，離心5min(400g 離心力)，上清液棄去，留管底沉淀物0.2mL，直接涂片鏡檢。所有標(biāo)本均于2h 內(nèi)檢測(cè)。

1.3 結(jié)果判定

尿分析儀檢測(cè)：以紅細(xì)胞＞7 個(gè)/ul，白細(xì)胞＞12 個(gè)/ul，管型＞0 個(gè)/ul 為陽(yáng)性。

人工鏡檢：紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)觀察10 個(gè)高倍視野(HPF)取均值，管型計(jì)數(shù)觀察20 個(gè)低倍視野(LPF)取均值，以紅細(xì)胞＞3 個(gè)/HPF，白細(xì)胞＞5 個(gè)/HPF，管型＞0 個(gè)/LPF 為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 21.0 軟件處理數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，一致性用kappa 值評(píng)價(jià)。

2 結(jié)果

邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀檢測(cè)陽(yáng)性率分別為：紅細(xì)胞(23.4%)，白細(xì)胞(27.9%)，管型(9.0%)；人工鏡檢檢測(cè)陽(yáng)性率分別為：紅細(xì)胞(19.8%)，白細(xì)胞(25.8%)，管型(6.7%)。兩種方法檢測(cè)紅細(xì)胞結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；檢測(cè)白細(xì)胞結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；檢測(cè)管型結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。對(duì)兩種方法測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型結(jié)果進(jìn)行kappa 一致性檢驗(yàn)，kappa 值分別為0.762、0.807、0.750。

3 討論

全自動(dòng)尿有形成分分析儀已被臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，用來(lái)代替人工鏡檢，目前全自動(dòng)尿有形成分分析系統(tǒng)依據(jù)其檢測(cè)原理一般分為兩類[5]：一種使用流式細(xì)胞術(shù)，類似于血細(xì)胞分析儀，利用熒光染液對(duì)尿液成分染色，結(jié)合電阻抗和光散射技術(shù)檢測(cè)尿液有形成分[6]；另一種采用圖像分析系統(tǒng)，其原理是模擬人工鏡檢，用機(jī)器、CCD 攝像系統(tǒng)采集尿有形成分影像，并轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)，再利用圖像處理系統(tǒng)，通過(guò)軟件自動(dòng)分析鑒別，并生成報(bào)告，邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀就是基于這種技術(shù)。

表1 兩種方法檢測(cè)尿液結(jié)果比較(n)

人工鏡檢是尿液有形成分形態(tài)學(xué)檢查的經(jīng)典方法，直觀可靠，缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)費(fèi)力，受人為因素影響大，污染率高，重復(fù)性差[7]。邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀運(yùn)用視覺(jué)成像識(shí)別技術(shù)，首先通過(guò)采樣器，自動(dòng)將標(biāo)本注入計(jì)數(shù)池，系統(tǒng)控制顯微鏡調(diào)焦定位，拍攝尿有形成分圖像，再對(duì)圖像分割計(jì)算，結(jié)合機(jī)器視覺(jué)技術(shù)，進(jìn)行計(jì)數(shù)和識(shí)別分類。在儀器的圖像處理過(guò)程中，細(xì)胞影像的分割和識(shí)別非常重要，也是最困難的，細(xì)胞識(shí)別的前提是分割影像的前景和背景，將需要的部分提取出來(lái)[8]。

本研究結(jié)果顯示，兩種方法測(cè)定紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型的結(jié)果比較，kappa 值均大于0.75，依據(jù)kappa 一致性評(píng)價(jià)判定標(biāo)準(zhǔn)，kappa 值小于0.4 認(rèn)為一致性差，大于0.75 認(rèn)為一致性程度高，在0.4 和0.75 之間認(rèn)為一致性一般，說(shuō)明兩種方法有較高的一致性，結(jié)果符合率很好。兩種方法檢測(cè)白細(xì)胞結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但是邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀的陽(yáng)性率稍高于人工鏡檢，因?yàn)槟蛞撼煞謴?fù)雜多樣，形態(tài)各異，易破損變化，會(huì)導(dǎo)致識(shí)別困難，實(shí)際檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀可能會(huì)把堆疊的紅細(xì)胞分割成一個(gè)整體[9]，從而被當(dāng)成白細(xì)胞，造成誤判。研究結(jié)果還顯示，兩種方法檢測(cè)紅細(xì)胞和管型結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，常見(jiàn)原因有：尿液結(jié)晶形態(tài)多樣，有些圓形的結(jié)晶、游離脂滴、酵母菌大小形態(tài)和紅細(xì)胞接近，常被歸類為紅細(xì)胞。一些呈細(xì)長(zhǎng)條狀的上皮細(xì)胞，如腎小管上皮細(xì)胞、尿路上皮細(xì)胞，人工鏡檢時(shí)就很容易和管型混淆，邁瑞EH-2080B尿有形成分分析儀對(duì)于這些細(xì)胞的分辨也不理想[10]。上述多種因素，導(dǎo)致邁瑞EH-2080 尿有形成分分析儀對(duì)紅細(xì)胞和管型識(shí)別分類錯(cuò)誤，使其陽(yáng)性檢出率高于人工鏡檢。不過(guò)邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀直接加樣至計(jì)數(shù)池，避免了離心造成的細(xì)胞形態(tài)缺失，并且檢測(cè)過(guò)程拍攝的圖片全部保存提供全景圖和分割圖審核模式，檢驗(yàn)人員可隨時(shí)切換進(jìn)行人工審核，對(duì)于其中可疑的成分，能夠很方便的人工識(shí)別分類實(shí)時(shí)保存修改結(jié)果，以較少的工作量，在電腦上達(dá)到了類似人工鏡檢的效果。

綜上所述，邁瑞EH-2080B 尿有形成分分析儀快速、簡(jiǎn)便、高效，檢測(cè)結(jié)果與人工鏡檢一致性很好，雖有不足，在實(shí)驗(yàn)室用于尿液有形成分篩查是必不可少的，配合人工復(fù)核，有很好的準(zhǔn)確性，是尿液分析檢測(cè)的有效手段。但對(duì)于異常細(xì)胞和管型的準(zhǔn)確分類，還是需用人工鏡檢確認(rèn)。