GC-MS 法快速篩查可濕性粉劑農(nóng)藥中34 種非法添加殺蟲劑*

王 婷，李建兵 ,2，翟 鈺 ，祁 魁 ，王曉濱,2

（1.青島市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，山東 青島 266101；2.國(guó)家海洋精細(xì)化工及其生物制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，山東 青島 266101）

根據(jù)《農(nóng)藥管理?xiàng)l例》規(guī)定，在農(nóng)藥產(chǎn)品中添加的除標(biāo)簽、說明書標(biāo)注的有效成分之外的其它農(nóng)藥成分，都視為非法添加成分。非法添加成分的重復(fù)使用，特別是禁限用農(nóng)藥，會(huì)造成抗性增加，引發(fā)嚴(yán)重的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全事故或者農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)等問題[1,2]。2018 年農(nóng)業(yè)部關(guān)于農(nóng)藥產(chǎn)品抽查結(jié)果顯示，擅自添加其它成分占農(nóng)藥產(chǎn)品不合格的40%以上。殺蟲劑、殺菌劑和除草劑的不合格率分別為8.9%、4.0%和4.6%，由此可見，殺菌劑和除草劑的產(chǎn)品質(zhì)量要優(yōu)于殺蟲劑，而且在生物農(nóng)藥中也有殺蟲劑成分檢出。因此，需要對(duì)農(nóng)藥產(chǎn)品中添加的非法殺蟲劑進(jìn)行定性定量分析。

可濕性粉劑由原藥、載體和助劑組成，具有成本低，毒性小，持久性強(qiáng)，活性成分高等優(yōu)點(diǎn)，是我國(guó)傳統(tǒng)劑型之一。近年來隨著新劑型農(nóng)藥的發(fā)展，雖然可濕性粉劑每年新登記比率在下降，但數(shù)量仍占據(jù)前列，可見其在農(nóng)藥劑型中的重要地位[3]。目前，關(guān)于分析可濕性粉劑農(nóng)藥產(chǎn)品有效成分的國(guó)家和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)主要采用氣相或者液相色譜法，這些方法只能對(duì)已知的一種或者幾種農(nóng)藥成分進(jìn)行分析，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，而且農(nóng)藥中的非法添加成分種類繁多，在確證之前是未知的[4]，氣相或者液相色譜法無(wú)法滿足未知非法成分檢測(cè)的需要。而GC-MS 具有GC 的高分離度和MS 的定性優(yōu)勢(shì)[5]，結(jié)合自建或者商業(yè)數(shù)據(jù)庫(kù)，可以同時(shí)定性定量分析多種殺蟲劑，更適用于未知非法添加物的檢測(cè)。

本文選取了34 種高頻非法添加殺蟲劑，建立了其在可濕性粉劑農(nóng)藥產(chǎn)品中的氣相色譜-質(zhì)譜快速篩查方法，并對(duì)實(shí)際農(nóng)藥產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)證。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器 5975B+6890N 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent），ML204T/02，0.1mg 電子天平（METTLER）；MS205DU，0.01mg 電子天平（METTLER）。

試 劑 HPLC 級(jí) 甲 苯 （ACS），HPLC 級(jí) 甲 醇（CNW）。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 敵敵畏（0.25g，97.6%，Dr.Ehrenstorfer）；乙酰甲胺磷（0.25g，98%，Dr.Ehrenstorfer）；異丙威（0.1g，98.5%，Dr.Ehrenstorfer）；仲丁威（0.25g，98%，Dr.Ehrenstorfer）；滅線磷 （0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；殺蟲脒（0.1g，98.8%，Dr.Ehrenstorfer）；二嗪磷（0.25g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；樂果（0.25g，98.5%，Dr.Ehrenstorfer）；克百威（0.25g，99.5%，Dr.Ehrenstorfer）；氯唑磷（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；抗蚜威（0.25g，99.6%，Dr.Ehrenstorfer）；甲基毒死蜱（0.25g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；甲基對(duì)硫磷（0.25g，98.6%，AccuStandard）；毒死蜱 （0.25g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；氟蟲腈（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；馬拉硫磷（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；殺螟硫磷（0.25g，98.3%，Dr.Ehrenstorfer）；倍硫磷（0.25g，98%，Dr.Ehrenstorfer）；水胺硫磷（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）、喹硫磷（0.25g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；噻蟲嗪（0.1g，99.6%，Dr.Ehrenstorfer）；噻嗪酮 （0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；丙溴磷（0.25g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；蟲螨腈（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；殺撲磷（0.1g，98.3%，Dr.Ehrenstorfer）；聯(lián)苯菊酯（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；三唑磷（0.1g，98.9%，Dr.Ehrenstorfer）；甲氰菊酯（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；滅蟻靈（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；吡丙醚（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；氯菊酯（0.25g，97.7%，Dr.Ehrenstorfer）；蠅毒磷（0.1g，98%，Dr.Ehrenstorfer）；醚菊酯（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）；唑蟲酰胺（0.1g，99%，Dr.Ehrenstorfer）。

1.2 GC-MS 條件

1.2.1 氣相色譜條件 進(jìn)樣口溫度為290℃，載氣為 He，流速為 1.0mL·min-1，進(jìn)樣體積為 1μL，進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比為10∶1；氣相色譜柱為DB-17MS（30m×0.25mm×250μm）；程序升溫條件：40℃保持1min，以30℃·min-1升到140℃保持1min，再以5℃·min-1升到 250℃保持 5min，最后以 10℃·min-1升到280℃保持5min。

1.2.2 質(zhì)譜條件 離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，接口溫度280℃，電離方式：EI 源，掃描方式：全掃描（SCAN）和選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

1.3.1 農(nóng)藥單標(biāo)的配制 準(zhǔn)確稱取10mg（精確至0.1mg）各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品于10mL 容量瓶中，用甲苯配制成1.0mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。

1.3.2 農(nóng)藥混標(biāo)的配制 準(zhǔn)確移取不同體積的各農(nóng)藥儲(chǔ)備液于10mL 容量瓶中，用甲醇稀釋成濃度為10mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4 樣品前處理

稱取0.1g 樣品于10mL 容量瓶中，加入5mL 甲醇溶解，并用甲醇定容至刻度線，混勻，8000r·min-1離心，0.2μm PTFE 濾膜過濾待測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理的選擇

農(nóng)藥產(chǎn)品主要成分大多選用甲醇或者甲醇水作為溶劑對(duì)其進(jìn)行提取檢測(cè)，可濕性粉劑在加工過程中一般會(huì)加入載體和助劑，載體如硅藻土、高嶺土等不溶于甲醇，可通過離心除去，甲醇可溶解助劑，但由于稱樣量不多，對(duì)農(nóng)藥成分檢測(cè)影響不大[6,7]。因此，選用甲醇對(duì)可濕性粉劑產(chǎn)品直接進(jìn)行溶解提取。

2.2 質(zhì)譜條件的選擇

采用SCAN 掃描模式對(duì)1.3.2 混標(biāo)溶液進(jìn)行分析，通過與NIST 檢索譜庫(kù)進(jìn)行對(duì)比，確定各殺蟲劑的保留時(shí)間，定量和定性離子（見表1）。選擇SIM 掃描模式對(duì)各殺蟲劑進(jìn)行定性和定量分析。根據(jù)各殺蟲劑的保留時(shí)間，將掃描時(shí)間分為14 個(gè)時(shí)間段，使每個(gè)時(shí)間段內(nèi)的掃描離子數(shù)量適中，調(diào)整每個(gè)離子的駐留時(shí)間，使其循環(huán)次數(shù)基本相同，并且滿足響應(yīng)值需求。通過對(duì)SCAN 掃描模式的分析，發(fā)現(xiàn)第一個(gè)峰（敵敵畏）出峰時(shí)間為7.438min，為防止大量溶劑進(jìn)入檢測(cè)器，設(shè)置溶劑延遲時(shí)間為5min。

2.3 方法確認(rèn)

用甲醇配制 0.1、0.5、1.0、2.0、4.0mg·L-1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按已建立的氣相色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行分析，其保留時(shí)間見表1，各殺蟲劑可以得到有效分離（見圖1）。

該方法可以同時(shí)測(cè)定34 種非法添加殺蟲劑，所需時(shí)間短。以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸分析，34 種殺蟲劑的線性相關(guān)系數(shù)R2均大于0.99，結(jié)果表明，在所測(cè)定濃度范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。以定量離子的3 倍和10 倍信噪比分別計(jì)算各農(nóng)藥方法的檢出限（LOD）和定量限（LOQ），對(duì)可濕性粉劑空白樣品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，選擇 10.0 和 20.0mg·kg-1兩種加標(biāo)水平，每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定6 次，除噻嗪酮和丙溴磷外，其他殺蟲劑加標(biāo)回收率為71.2%～126.8%，精密度為0.4%～12.1%（見表2）。

圖1 34 種殺蟲劑的總離子流圖Fig.1 TIC of 34 pesticides

表2 34 種農(nóng)藥的檢出限、定量限、回收率和精密度Tab.2 LOD,LOQ,added recovery and RSD of 34 pesticides

2.4 噻嗪酮、丙溴磷回收率分析

噻嗪酮兩個(gè)加標(biāo)水平的回收率均超過130%，這可能是由于基質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生的?；|(zhì)效應(yīng)是指基質(zhì)中的其他成分對(duì)目標(biāo)化合物的影響，GC-MS 法的基質(zhì)效應(yīng)一般以增強(qiáng)為主[8]。在分析過程中，基質(zhì)對(duì)噻嗪酮產(chǎn)生了強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)，因此，使得其回收率升高。通常可以用基質(zhì)空白溶液配置標(biāo)準(zhǔn)曲線來降低基質(zhì)對(duì)目標(biāo)化合物的影響[9]。

丙溴磷的回收率很低，可能是由于丙溴磷不適合加工成可濕性粉劑。丙溴磷是一種易溶于水的淡黃色液體原藥，熔點(diǎn)＜25℃。原油或者低熔點(diǎn)的原藥在制劑加工過程中一般不加工成可濕性粉劑，因此，丙溴磷不適合加工成可濕性粉劑。根據(jù)農(nóng)藥登記信息網(wǎng)登記情況，丙溴磷也沒有可濕性粉劑的登記信息。

2.5 應(yīng)用

對(duì)已知含非法添加農(nóng)藥樣品按照1.4 處理，按照1.2 氣相色譜質(zhì)譜條件進(jìn)行SCAN 掃描，根據(jù)NIST 數(shù)據(jù)庫(kù)索引，發(fā)現(xiàn)25%吡蟲啉可濕性粉劑中含有克百威，其總離子流圖見圖2。對(duì)其進(jìn)行選擇離子監(jiān)測(cè)模式掃描，通過定量計(jì)算，得出25%吡蟲啉可濕性粉劑中含有4%克百威。

圖2 可濕性粉劑典型性樣品圖Fig.2 Typical sample of wettable powder

3 結(jié)論

建立了34 種常見非法添加殺蟲劑的氣相色譜-質(zhì)譜篩查方法，操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短，準(zhǔn)確度高，精密度好。并應(yīng)用于已知農(nóng)藥制劑中非法添加成分驗(yàn)證，結(jié)果表明，該方法可以滿足可濕性粉劑中非法添加殺蟲劑的快速篩查和定量的要求，其它農(nóng)藥制劑或農(nóng)藥類型中非法添加成分也可參照本方法檢測(cè)。