堅(jiān)果中吡蟲啉及啶蟲脒含量測定方法探究

劉暢 趙新宇

摘 要：為建立準(zhǔn)確、快速檢測堅(jiān)果中吡蟲啉和啶蟲脒含量測定方法，樣品采用QuEChERS方法進(jìn)行提取、凈化，經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀檢測、外標(biāo)法定量。其線性范圍為：吡蟲啉55～1 000 ng/mL，啶蟲脒1.0～100.0 ng/mL，相關(guān)系數(shù)均大于0.998，檢出限分別為5.50 μg/kg和3.0 μg/kg，定量限分別為11.0 μg/kg和10.0 μg/kg，加標(biāo)回收率為64%～113%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于14%。

關(guān)鍵詞：堅(jiān)果;吡蟲啉;啶蟲脒;QuEChERS方法

Methods of Imidacloprid and Acetamiprid? in Nuts

LIU Chang1， ZHAO Xinyu2

（1.Anshan Inspection， Testing and Certification Center Food and Drug Institute， Anshan 114000， China;

2.Huishan Dairy （Shenyang） Sales Co.， Ltd.， R & D Department， Shenyang 110000， China）

Abstract： To establish an accurate and rapid determination of imidacloprid and acetamiprid in nuts， the samples were extracted and purified by QuEChERS and detected by liquid chromatography / mass spectrometry and quantified by external calibration. Its linear range is imidacloprid 55～1 000 ng/mL， acetamiprid 1.0～100.0 ng/mL， correlation coefficient greater than 0.998， detection limits were 5.50～3.0 g / kg， respectively， and quantification limits were 11.0 g / kg and 10.0 g / kg， respectively. The extra standard recovery rate is 64%～113%， and the relative standard deviation is less than 14%.

Keywords： nut; imidacloprid; acetamiprid; QuEChERS method

隨著我國人們生活水平的不斷提高，人們對食品安全越來越關(guān)注，農(nóng)藥殘留問題是關(guān)注的焦點(diǎn)之一。植物性食品農(nóng)藥殘留除直接來源于農(nóng)藥噴灑外，還來源于土壤和水，農(nóng)藥殘留污染是阻礙我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的重要原因，完善現(xiàn)有的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，建立健全農(nóng)藥使用管理制度是保護(hù)人們身體健康，保護(hù)土壤和水生態(tài)環(huán)境的重要手段。

吡蟲啉屬于煙堿類超高效殺蟲劑，可廣泛應(yīng)用于花生、小麥、水稻、蔬菜等作物。啶蟲脒屬于氯化煙堿類新型殺蟲劑，對有機(jī)磷、氨基甲酸酯以及擬除蟲菊酯類等農(nóng)藥產(chǎn)生抗藥性的害蟲具有較好效果，可防治花生、煙草、棉花等作物的蚜蟲[1-2]?！妒称钒踩珖覙?biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）規(guī)定，植物源性食品堅(jiān)果吡蟲啉最大殘留限量為0.01 mg/kg，堅(jiān)果啶蟲脒最大殘留限量為0.06 mg/kg[3]。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

市售花生米、榛子;甲酸（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）;乙酸銨（優(yōu)級純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）;甲醇（色譜純，F(xiàn)isher，美國制造）;乙酸（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）;乙腈（色譜純，F(xiàn)isher，美國制造）; ESI-L低濃度混合調(diào)諧液（安捷倫））;QuEChERS 萃取鹽包（深圳逗點(diǎn)生物技術(shù)有限公司）;QuEChERS 凈化管（深圳逗點(diǎn)生物技術(shù)有限公司）;吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（100 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）;啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（100 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）1260-6460液相-質(zhì)譜聯(lián)用儀配SB-C18 RRHD （2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色譜柱（美國安捷倫科技有限公司）;T-203電子天平（賽多利斯）;101-1AB 渦旋混合儀（天津市泰斯特儀器有限公司）;R206超聲儀（上海申生科技有限公司）;NS-10氮吹儀（上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司）;ALLEGRA X-30離心機(jī)（BECKMAN，美國制造）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 設(shè)備參數(shù)

柱溫：35 ℃;流動相A：0.1%（V/V）甲酸甲醇（含5 mmol/L乙酸銨），

流動相B：0.1%（V/V）甲酸水（含5 mmol/L乙酸銨），梯度洗脫：0～1 min，95%B;1～6 min，60%B;6～34 min，0%B;34～38 min，0%B;38.1 min，95%B;流速0.2 mL/min;進(jìn)樣量：10 μL。離子源：AJS;掃描方式：正離子掃描;反應(yīng)監(jiān)測模式：MRM;干燥氣溫度：300 ℃;干燥氣流速：11 L/min;鞘氣溫度：350 ℃;鞘氣流速：11 L/min;噴霧氣壓力：25 psi;毛細(xì)管電壓：4 000 V。質(zhì)譜的其他參數(shù)見表1。

1.2.2 樣品處理

（1）市售花生米。稱取粉碎后混合均勻的10 g樣品于50 mL離心管中，加入20 mL 1%乙酸乙腈，超聲提取15 min。加QuEChERS萃取鹽包于離心管中，渦旋 1 min，以8 000 r/min離心5 min。取全部上清液入QuEChERS凈化管中，渦旋1 min，以8 000 r/min離心5 min，轉(zhuǎn)移上清液，40 ℃氮吹至近干，用初始流動相定容至1 mL，渦旋混勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾后備用，同時做基質(zhì)空白[4-6]。

（2）市售榛子。稱取去殼粉碎后混合均勻的5 g樣品于50 mL離心管中，加入5 mL 1%乙酸乙腈溶液，超聲提取15 min。加QuEChERS萃取鹽包于離心管中，渦旋1 min，以8 000 r/min離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中。向裝有試樣的離心管中，再加入5 mL 1%乙酸乙腈溶液，重復(fù)上述操作，合并提取液，用乙腈定容至10 mL，混勻。移取上述提取液4.5 mL至凈化管中，渦旋混勻，以8 000 r/min離心5 min，取上清液600 μL，用初始流動相定容3 mL，渦旋混勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾后備用，同時做基質(zhì)空白。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別移取100 μg/mL吡蟲啉、啶蟲脒儲備液適量體積，用空白基質(zhì)稀釋成濃度為10 μg/mL的中間液，再用初始流動相稀釋成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，臨用現(xiàn)配。

1.2.4 定性測定

根據(jù)待測樣品目標(biāo)物保留時間、所選離子相對豐度比（Ratio）與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是否一致來判斷待測樣品中是否存在目標(biāo)物。保留時間±5%;相對豐度>50%，允許±20%偏差;相對豐度>20%～50%，允許±25%偏差;相對豐度>10%～20%，允許±30%偏差。

1.2.5 定量測定

以基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制曲線，外標(biāo)法定量。

2 結(jié)果與分析

采用梯度洗脫方式有效分離開吡蟲啉和啶蟲脒，見圖1;配制基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液使得在扣除背景后目標(biāo)離子得以出現(xiàn)，見圖2;在55～1 000 ng/mL范圍內(nèi)，吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=103.248 239x-1 277.036 977，相關(guān)系數(shù)R2=0.998 6，見圖3;在1.0～100.0 ng/mL范圍內(nèi)，啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=11 218.377 831x-23 553.253 060，相關(guān)系數(shù)R2=0.997 3，見圖3。

采用陰性堅(jiān)果樣品，進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)，測得吡蟲啉檢出限為5.50 μg/kg、定量限為11.0 μg/kg;啶蟲脒檢出限為3.0 μg/kg，定量限為10.0 μg/kg;在5.50～55 μg/kg，吡蟲啉回收率為64%～101%，精密度為3%～14%;在10.0～60.0 μg/kg，啶蟲脒回收率為93%～113%，精密度為3%～10%，詳見表2。

3 結(jié)論

通過本研究得出液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法能有效分離、定性和定量堅(jiān)果中吡蟲啉和啶蟲脒，前處理采用QuEChERS方法操作簡單、去除堅(jiān)果脂肪效果明顯、回收率高，解決了傳統(tǒng)方法多次旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、多次氮吹的耗時耗力且回收率低的困擾。

參考文獻(xiàn)

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[2]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法：GB/T 23584—2009[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2009.

[3]國家衛(wèi)生健康委員會，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763—2021[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2021.

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