寵物犬的犬種布魯氏菌病的診斷和治療方法探討

黃迪海 郝文娟 徐懷英 盛曉丹 秦卓明

寵物犬的犬種布魯氏菌病的診斷和治療方法探討

黃迪海①②郝文娟①②徐懷英③盛曉丹①②秦卓明①②③*

①山東省健牧生物藥業(yè)有限公司 濟南 250100 ②濟南市動物生物藥品工程技術(shù)研究中心 濟南 ③山東省農(nóng)業(yè)科學院家禽研究所 濟南）

布魯氏菌病(Brucellosis)是由布魯氏菌屬細菌引起的人獸共患的常見傳染病。犬種布魯氏菌(B. canis)是布魯氏菌屬的一個種，其危害程度略低于羊、牛和豬種布魯氏菌，主要感染犬，也可以感染豬、牛、羊等動物，對人的感染鮮有報道，但國內(nèi)1980~1996年曾有人感染的案例[1,2,3]，潛在的公共衛(wèi)生意義較大。

伴隨著人民生活水平的提高，城鎮(zhèn)家庭飼養(yǎng)寵物犬已十分普遍。但是，在養(yǎng)犬過程中，人們對布魯氏菌病的危害認知明顯不足，眾多基層獸醫(yī)診療機構(gòu)也缺乏布魯氏菌病相關(guān)的診斷，導(dǎo)致該病難以確診。為正確應(yīng)對犬種布魯氏菌病，確保飼養(yǎng)人和寵物犬的健康，防患于未然，特提出如下針對性的處置方案。

1 犬種布魯氏菌病的確診

1.1 病犬的臨床特征 （1）公犬常表現(xiàn)為附睪炎、陰囊水腫、前列腺炎和睪丸炎，甚至出現(xiàn)精子異常和不孕。母犬常見妊娠期45~55d流產(chǎn)、持續(xù)排出棕色至黃色陰道分泌物、早期孕體吸收或產(chǎn)出死胎。（2）椎間盤炎、關(guān)節(jié)炎、眼內(nèi)炎、反復(fù)發(fā)熱、乏力等共性特征應(yīng)引起重視。潛伏期或慢性穩(wěn)定期的病癥不明顯。組織學檢查可見脾、淋巴結(jié)、肝、腎、睪丸等器官形成特征性肉芽腫。

1.2 血清學診斷 采集犬血清，應(yīng)用犬種布魯氏菌抗原、標準陽性和陰性血清，或配套試劑盒進行檢測。一般先利用虎紅平板凝集試驗(RBT)、間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(iELISA)或競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(cELISA)進行初篩；然后，再應(yīng)用試管凝集試驗(SAT)或補體結(jié)合試驗等方法進一步確診。如果出現(xiàn)血清學陽性結(jié)果，則懷疑寵物犬發(fā)生感染。

1.3 病原鑒定 病原鑒定是犬種布魯氏菌確診的“金標準”，可采集病犬的血液、陰道分泌物、精液、關(guān)節(jié)液、流產(chǎn)胎水等病料，在滿足GB 19489的BSL-3級生物安全實驗室條件下，進行犬種布魯氏菌的分離培養(yǎng)、染色鏡檢、細菌鑒定和Bruce-Ladder PCR檢測。

2 犬種布魯氏菌病的治療

2.1 急性期 急性期的病犬癥狀明顯，此時布魯氏菌主要暴露于血液和體液中，各臟器損害較輕，抗生素在體內(nèi)可直接與病原菌作用；同時，自身機體免疫反應(yīng)強烈，可協(xié)同提高治愈率。本階段主要依靠敏感抗生素治療+支持療法[4,5]，犬的用藥方法如下(僅供參考)：（1）方案一：三種藥物聯(lián)合，首選。注射用氨芐西林鈉，以氨芐西林計，肌肉或靜脈注射，40mg/kg體重，1次/d，連用6周；注射用硫酸鏈霉素或硫酸雙氫鏈霉素，以鏈霉素計，肌肉注射：25mg/kg體重，1次/d，連用8周；利福平，口服：8~10mg/kg體重，1次/d，連用10周。利福平用藥過程中若出現(xiàn)惡心等消化道副作用，飼喂后分2~3次/d服用。氨芐西林鈉可用乳酸環(huán)丙沙星注射液替代，肌肉或靜脈注射，2~2.5mg/kg·d；利福平可用鹽酸多西環(huán)素可溶性粉替代，口服，10mg/kg·d。其它注意事項參考藥品說明書。（2）方案二：兩種藥物聯(lián)合。鏈霉素/乳酸環(huán)丙沙星連用8~10周、利福平連用12周，用藥方法同方案一。也可用慶大霉素/卡那霉素/丁胺卡那霉素，肌肉注射，每1kg體重6~10mg，1次/d，連用2周；同時，利福平或鹽酸多西環(huán)素口服，連用12周，用藥方法同方案一。（3）還可采用輔助療法，如口服復(fù)合維生素制劑，提高犬的抵抗力；體能不足的病犬，可補充能量合劑；發(fā)熱、關(guān)節(jié)和肌肉疼痛的病犬，可應(yīng)用雙氯芬酸鈉等解熱鎮(zhèn)痛藥；流產(chǎn)母犬可使用0.1%高錳酸鉀溶液沖洗子宮和陰道，1~2次/d，直至無分泌物流出為止。

2.2 慢性期 慢性期分為無病癥的慢性穩(wěn)定期和反復(fù)出現(xiàn)病癥的慢性活動期，治愈難度大。慢性穩(wěn)定期或潛伏期的病犬，因機體免疫系統(tǒng)與布魯氏菌形成平衡狀態(tài)，不適宜治療，僅作觀察。慢性活動期的病犬，其病癥輕于急性期，可使用中藥療法，提高細胞免疫水平、緩解IV型變態(tài)反應(yīng)。（1）中藥療法：可參考人布魯氏菌病的治療方法，楊黎黎曾在《中國中醫(yī)藥報》發(fā)表文章，應(yīng)用經(jīng)方柴胡桂枝湯，7~20余劑，其中包含皮試轉(zhuǎn)陰性的治愈案例；惠云杰[6]應(yīng)用清火梔麥片配合復(fù)方丹參片治療慢性布魯氏菌病患者60例，總有效率達91.67%；趙素元[7]應(yīng)用柴胡、當歸、獨活等十余味中藥的組方，調(diào)節(jié)免疫治療430例慢性布魯氏菌病患者，總有效率88%，皮試轉(zhuǎn)陰率37%，17個月后的復(fù)發(fā)率為21%。上述組方均有解表、活血、調(diào)節(jié)免疫、扶正固本的作用，可嘗試應(yīng)用于犬布魯氏菌病的治療。（2）免疫療法：目前還沒有上市的犬種布魯氏菌疫苗，僅有裂解酶重組菌殼疫苗[8]和滅活苗研制的實驗室相關(guān)報道[9]。（3）轉(zhuǎn)移因子可改善機體的細胞免疫和固有免疫，可配伍使用：肌肉注射或灌服，犬1~ 2ml，1次/d，連用3周，然后，每周用藥2次，繼續(xù)使用4周，總療程7周。

3 討論

3.1 安全防護 一旦發(fā)現(xiàn)疑似感染犬種布魯氏菌病的犬，相關(guān)接觸人員要做好防護，穿戴護目鏡、一次性乳膠手套、長筒膠靴和一次性塑料防護衣。將病犬進行隔離，對環(huán)境、犬排泄物、采樣器具等物品，用“84”等含氯消毒液或醛類消毒液進行噴霧、浸泡等消毒措施。社區(qū)寵物醫(yī)院在進行犬分泌物或犬血的血清學或PCR檢測時，同樣要做好防護和消毒。不具備BSL-3級生物安全實驗室條件，嚴禁從事活菌的分離培養(yǎng)。密切接觸人員到市級以上疾控中心進行布魯氏菌檢測。

3.2 確診問題 目前，有不少寵物醫(yī)院可進行布魯氏菌血清學檢測，但要注意檢測抗原是否為犬種布魯氏菌；血清學診斷陽性結(jié)果僅代表感染，但有假陽性存在的可能，還需要進行病原分離，作最終診斷。有少量寵物醫(yī)院可進行犬分泌物或血液的布魯氏菌DNA提取和PCR檢測，應(yīng)注意方法的準確性和可重復(fù)性。建議到專業(yè)實驗室進行病原的分離和診斷。

3.3 防治問題 （1）寵物犬每年應(yīng)進行2次以上的血清學檢測；接收或配種前也要進行檢測，及時掌握犬的健康狀況。犬與犬接觸時，應(yīng)了解其健康狀況；避免飼喂生肉。一旦確診寵物犬患犬種布魯氏菌病，建議對病犬立即實施安樂死，并進行無害化處理。價值和情感上難以割舍的寵物犬，應(yīng)根據(jù)專業(yè)獸醫(yī)的意見或參考本文的方法進行治療，直至痊愈，并進行長期跟蹤監(jiān)測，防止復(fù)發(fā)。病犬愈后不宜作為種犬。（2）抗生素和抗菌藥目前對布魯氏菌、結(jié)核桿菌等細胞內(nèi)寄生菌治療效果不佳，藥物治療具有局限性，期待科研工作者在細胞穿膜肽(TAT)、細胞內(nèi)靶向載體等方面有所突破，以提高布魯氏菌病的治愈率。

[1] 汪立茂, 付清培, 薛梅等. 四川省犬種布魯氏菌病流行病學調(diào)查[J]. 地方病通報, 1996(04): 36- 37.

[2] 閻守敦, 徐敏, 何倩倪等. 新疆犬種布魯氏菌病流行病學調(diào)查研究[J]. 中國人獸共患病雜志, 1990(03): 40- 43.

[3] 黃志雄, 陳英輝, 陸家華等. 廣西犬種布魯氏菌病流行病學調(diào)查研究[J]. 地方病通報, 1987(1): 1- 5.

[4] 李向陽. 布魯氏菌病診斷與治療[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)科學技術(shù)出版社, 2015. 12.

[5] 劉志國, 王妙, 崔步云等. 犬種布病與公共安全風險[J]. 中國人獸共患病學報, 2019, 35(5): 421- 429.

[6] 惠云杰, 張召. 中藥治療慢性布魯氏菌病60例[J]. 陜西中醫(yī), 2003(9): 785- 786.

[7] 趙素元, 李斌. 中藥調(diào)節(jié)免疫治療430例慢性布魯氏菌病[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學, 2000(5): 410- 411.

[8] 錢晶, 尹秋丹, 卜昭陽等. 犬布魯氏菌菌殼疫苗的制備[J]. 中國畜牧獸醫(yī), 2014, 41(1): 38- 43.

[9] 封偉杰, 連世存, 宋杰等. 犬布魯氏菌免疫程序設(shè)計[J]. 飼料與畜牧, 2019(6): 71- 74.

濟南市金種子企業(yè)關(guān)鍵產(chǎn)品提升計劃項目(201502074)

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