鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備及指紋圖譜研究

許懷禮，徐頂巧，唐志書，宋忠興，張君威，蘇彪，許洪波

論著·中藥研究與開發(fā)

鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備及指紋圖譜研究

許懷禮1，徐頂巧2，唐志書1，宋忠興1，張君威1，蘇彪1，許洪波1

1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西中藥資源產(chǎn)業(yè)化省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心，秦藥特色資源研究開發(fā)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（培育），陜西省創(chuàng)新藥物研究中心，陜西 咸陽 712083；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，陜西 咸陽 712083

制備鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。制備15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑，以松脂醇二葡萄糖苷為指標(biāo)成分，計(jì)算出膏率、指標(biāo)成分含量和轉(zhuǎn)移率，并建立超高效液相色譜指紋圖譜分析方法，使用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，采用超高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)共有峰進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑中松脂醇二葡萄糖苷轉(zhuǎn)移率為42.74%～71.43%，平均為57.26%。15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度均大于0.95。指紋圖譜共有峰9個(gè)，確認(rèn)分別為梓醇、杜仲醇苷、京尼平苷酸、車葉草苷酸、綠原酸、olivil-4’---D-glucopyranoside、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷和紫云英苷。本研究建立的鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備工藝穩(wěn)定，指紋圖譜方法精密度、穩(wěn)定性及重復(fù)性良好，可為鹽杜仲配方顆粒的質(zhì)量控制提供參考。

鹽杜仲；標(biāo)準(zhǔn)湯劑；指紋圖譜；松脂醇二葡萄糖苷

杜仲為杜仲科植物杜仲Oliv.的干燥樹皮，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、安胎功效[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，杜仲具有防治骨質(zhì)疏松[2]、降血壓[3]、降血糖[4]、降脂減肥[5]、抗老年癡呆和提升性功能[6]等作用。杜仲主要含木質(zhì)素[7]、環(huán)烯醚萜[8]、黃酮[9]、苯丙素[10]、酚酸類[11]和杜仲膠[12]等化學(xué)成分，其中木脂素類是杜仲的主要成分之一[12-13]。杜仲臨床常用飲片形式有杜仲、炒杜仲和鹽杜仲3種，2015年版《中華人民共和國藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國藥典》）收錄含杜仲方劑36個(gè)，其中以鹽杜仲入藥18個(gè)。中醫(yī)認(rèn)為，鹽制可引藥入腎經(jīng)，更好地發(fā)揮杜仲補(bǔ)益肝腎的功效[14]。

中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑是以中醫(yī)理論為指導(dǎo)、臨床應(yīng)用為基礎(chǔ)，參考現(xiàn)代提取方法，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化工藝制備而成的單味中藥飲片水煎劑，用于標(biāo)化臨床用藥，保障用藥的準(zhǔn)確性和劑量的一致性[15-16]。中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑可以作為一種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用于評(píng)價(jià)中藥配方顆粒從原料到成品之間的質(zhì)量傳遞規(guī)律，從而為配方顆粒的研究和制備提供科學(xué)依據(jù)[17]。2019年，國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求（征求意見稿）》明確指出：為使中藥配方顆粒能夠承載中藥飲片安全性、有效性，需要以標(biāo)準(zhǔn)湯劑為橋接，該標(biāo)準(zhǔn)湯劑為衡量中藥配方顆粒是否與臨床湯劑基本一致的物質(zhì)基準(zhǔn)。目前尚未見關(guān)于杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑相關(guān)研究的報(bào)道，本研究選取臨床常用的鹽杜仲進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究，以松脂醇二葡萄糖苷為指標(biāo)成分，計(jì)算出膏率和轉(zhuǎn)移率，同時(shí)開展指紋圖譜研究，并結(jié)合超高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技術(shù)對(duì)其主要共有峰進(jìn)行確認(rèn)，從指標(biāo)成分和整體角度對(duì)鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，為鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑的制備及其配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考。

1 儀器與試藥

LC-20XR高效液相色譜系統(tǒng)（含CBM-20A控制器、LC-20AD雙泵、SPD-M20A紫外檢測(cè)器、CTO-20AC柱溫箱、LC-solution色譜工作站），日本島津；Waters Xevo G2-XS QTOF質(zhì)譜系統(tǒng)，美國沃特世公司；KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；FTS-10A多功能煎藥鍋，航方中藥鍋煎藥壺；CPA2250型電子天平（精度0.01 mg），賽多利斯公司；EYELAN-1100旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，東京理化器械株式會(huì)社。

松脂醇二葡萄糖苷（純度＞98%，批號(hào)S-047- 181216），成都瑞芬思生物科技有限公司；甲醇和乙腈均為色譜級(jí)，Honeywell；其余試劑均為分析純，水為純凈水。15批鹽杜仲飲片分別購自西安藥材市場(chǎng)和陜西興盛德藥業(yè)有限責(zé)任公司，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)王繼濤高級(jí)實(shí)驗(yàn)師鑒定，均為杜仲科植物杜仲Oliv.的干燥樹皮，具體信息見表1。

表1 15批鹽杜仲飲片來源信息

編號(hào)產(chǎn)地規(guī)格批號(hào) 編號(hào)產(chǎn)地規(guī)格批號(hào) S1陜西鎮(zhèn)坪選20180302 S9貴州正安統(tǒng)20180902 S2陜西鎮(zhèn)坪選20180501 S10貴州正安統(tǒng)20181101 S3陜西鎮(zhèn)坪選20180802 S11四川廣元統(tǒng)20180402 S4陜西鎮(zhèn)坪選20180901 S12四川廣元統(tǒng)20180601 S5陜西鎮(zhèn)坪選20181102 S13四川廣元統(tǒng)20180701 S6貴州正安統(tǒng)20180301 S14四川廣元統(tǒng)20180902 S7貴州正安統(tǒng)20180601 S15四川廣元統(tǒng)20181001 S8貴州正安統(tǒng)20180801

2 方法與結(jié)果

2.1 一般檢查

依據(jù)2015年版《中國藥典》（四部）通則0832第二法測(cè)定水分，依據(jù)通則0512熱浸法測(cè)定醇溶性浸出物，依據(jù)2015年版《中國藥典》（四部）通則2302測(cè)定總灰分。結(jié)果15批鹽杜仲飲片水分為2.72%～8.46%，醇溶性浸出物為13.12%～22.06%，總灰分為5.48%～6.35%，均符合2015年版《中國藥典》（一部）對(duì)鹽杜仲飲片的規(guī)定，見表2。

表2 15批鹽杜仲飲片水分、浸出物、總灰分測(cè)定結(jié)果（%）

編號(hào)水分浸出物總灰分 編號(hào)水分浸出物總灰分 S13.5114.286.20 S95.8013.505.48 S22.7217.846.15 S108.0714.475.61 S34.4722.066.26 S118.2113.755.89 S43.8420.336.35 S127.7013.126.32 S53.4517.916.11 S137.3614.616.03 S67.1216.655.71 S144.2314.555.71 S77.6713.335.51 S156.0015.165.96 S88.4614.975.93

2.2 飲片中松脂醇二葡萄糖苷含量測(cè)定

按2015年版《中國藥典》（一部）杜仲飲片項(xiàng)下含量測(cè)定方法，測(cè)得15批鹽杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量為0.107%～0.149%，表明15批樣品均符合《中國藥典》對(duì)鹽杜仲的含量測(cè)定要求（含松脂醇二葡萄糖苷的量不得少于0.10%）。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備

取鹽杜仲飲片200 g，加10倍量水，浸泡30 min，迅速加熱至沸后轉(zhuǎn)小火煎煮30 min，趁熱用紗布過濾，收集濾液，再加8倍量水，繼續(xù)煎煮25 min，同法過濾，合并2次濾液并濃縮至1000 mL，即得濃度為0.2 g/mL的鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)湯劑中松脂醇二葡萄糖苷含量測(cè)定

2.4.1 色譜條件

采用Agilent 5 TC-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-甲醇-水（11∶11∶88）為流動(dòng)相，等度洗脫，柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)277 nm，進(jìn)樣量5 μL。在此條件下，供試品溶液中的松脂醇二葡萄糖苷分離良好。色譜圖見圖1。

注：A.對(duì)照品；B.供試品；1.松脂醇二葡萄糖苷

2.4.2 供試品溶液制備

精密量取“2.3”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)湯劑10 mL，4000 r/min離心5 min，取上清液，過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.4.3 對(duì)照品溶液制備

精密稱量4.99 mg松脂醇二葡萄糖苷，用50%甲醇定容至10 mL，即得0.499 mg/mL的松脂醇二葡萄糖苷對(duì)照品溶液。

2.4.4 線性關(guān)系考察

取對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣0.2、0.5、1、2、3、5 μL，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，以對(duì)照品質(zhì)量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得松脂醇二葡萄糖苷回歸方程＝439 881－3329.5，＝1，線性范圍為0.099 8～2.495 μg。

2.4.5 精密度試驗(yàn)

取供試品溶液（S1），按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)測(cè)定6次，結(jié)果供試品溶液中松脂醇二葡萄糖苷峰面積RSD＝0.22%，表明儀器精密度良好。

2.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液（S1），分別于0、2、4、8、12、24 h按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果供試品中松脂醇二葡萄糖苷峰面積RSD＝2.45%，表明標(biāo)準(zhǔn)湯劑供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批標(biāo)準(zhǔn)湯劑樣品（S1），按“2.4.2”項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，分別按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果松脂醇二葡萄糖苷峰面積RSD＝2.77%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.4.8 加樣回收率試驗(yàn)

精密量取已知松脂醇二葡萄糖苷含量的標(biāo)準(zhǔn)湯劑（S1）6份，加入等量松脂醇二葡萄糖苷對(duì)照品，按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表3，表明該方法準(zhǔn)確度良好。

表3 松脂醇二葡萄糖苷加樣回收率試驗(yàn)

樣品中含量/mg加入量/mg測(cè)得量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/% 0.1120.1120.235104.8104.21.93 0.1120.1110.223100.2 0.1120.1140.236104.6 0.1120.1090.234105.9 0.1120.1130.235104.3 0.1120.1100.233105.1

2.4.9 樣品測(cè)定

按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件對(duì)15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行測(cè)定。

2.5 出膏率及轉(zhuǎn)移率計(jì)算

按“2.3”項(xiàng)下方法制備標(biāo)準(zhǔn)湯劑，采用干燥稱量法獲得干膏質(zhì)量，計(jì)算出膏率和指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率。出膏率（%）＝干膏質(zhì)量（g）÷飲片質(zhì)量（g）×100%。轉(zhuǎn)移率（%）＝標(biāo)準(zhǔn)湯劑中含量÷飲片中含量×100%。15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率為4.75%～8.11%，平均為6.34%，標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）為1.08%。松脂醇二葡萄糖苷轉(zhuǎn)移率為42.74%～71.43%，平均為57.26%，SD為10.07%。結(jié)果見表4。

表4 15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率及指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率測(cè)定結(jié)果（%）

編號(hào)出膏率松脂醇二葡萄糖苷 飲片中含量標(biāo)準(zhǔn)湯劑中含量轉(zhuǎn)移率 S17.800.1160.05648.28 S27.260.1490.06644.30 S37.140.1160.06757.76 S47.960.1240.06955.65 S58.110.1110.07870.27 S66.280.1070.06560.75 S75.150.1090.07366.97 S85.210.1170.05042.74 S95.720.1080.04844.44 S104.750.1110.05852.25 S116.070.1420.07049.30 S125.770.1190.08571.43 S136.590.1220.08166.39 S144.920.1320.07859.09 S156.360.1170.08169.23

2.6 指紋圖譜建立與分析

2.6.1 色譜條件

色譜柱為Waters XBridgeTMBEH C18（2.1 mm×150 mm，2.5 μm），流動(dòng)相為水（A）-甲醇（B），梯度洗脫（0～10 min，3%～8%B；10～15 min，8%～12%B；15～20 min，12%～15%B；20～35 min，15%B；35～45 min，15%～25%B），檢測(cè)波長(zhǎng)277 nm，柱溫30 ℃，流速0.4 mL/min，進(jìn)樣量5 μL。

2.6.2 供試品溶液制備

按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備，即得。

2.6.3 精密度試驗(yàn)

取供試品溶液（S1），按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣6次，記錄共有峰峰面積，結(jié)果共有峰峰面積RSD＝0.86%，同時(shí)用相似度評(píng)價(jià)軟件計(jì)算指紋圖譜的相似度均大于0.99，表明儀器精密度良好[18]。

2.6.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批標(biāo)準(zhǔn)湯劑（S1），按“2.4.2”項(xiàng)下方法平行制備6份供試品溶液，按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄共有峰面積，同時(shí)用相似度評(píng)價(jià)軟件計(jì)算指紋圖譜相似度。結(jié)果共有峰峰面積RSD＝2.64%，指紋圖譜相似度均大于0.99，表明方法重復(fù)性良好[19]。

2.6.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液（S1），分別于0、2、4、8、12、24 h按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果共有峰峰面積RSD＝1.83%，同時(shí)用相似度評(píng)價(jià)軟件計(jì)算指紋圖譜的相似度均大于0.99，表明標(biāo)準(zhǔn)湯劑供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好[18]。

2.6.6 指紋圖譜采集

表5 15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑指紋圖譜相似度

編號(hào)S1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11S12S13S14S15R S11.0000.9970.9560.9900.9650.9710.9970.9870.9970.9530.9921.0000.9830.9560.9960.994 S20.9971.0000.9760.9810.9820.9870.9970.9930.9980.9700.9990.9980.9760.9680.9960.999 S30.9560.9761.0000.9160.9920.9900.9590.9840.9610.9940.9850.9600.9400.9850.9670.982 S40.9900.9810.9161.0000.9420.9510.9920.9560.9910.9040.9700.9910.9560.9050.9750.972 S50.9650.9820.9920.9421.0001.0000.9760.9750.9760.9740.9880.9710.9270.9610.9650.983 S60.9710.9870.9900.9511.0001.0000.9810.9780.9820.9720.9910.9770.9340.9600.9710.987 S70.9970.9970.9590.9920.9760.9811.0000.9801.0000.9470.9920.9990.9650.9440.9890.992 S80.9870.9930.9840.9560.9750.9780.9801.0000.9820.9880.9960.9870.9860.9900.9960.997 S90.9970.9980.9610.9910.9760.9821.0000.9821.0000.9500.9930.9990.9680.9480.9900.993 S100.9530.9700.9940.9040.9740.9720.9470.9880.9501.0000.9800.9540.9570.9980.9720.980 S110.9920.9990.9850.9700.9880.9910.9920.9960.9930.9801.0000.9940.9740.9770.9941.000 S121.0000.9980.9600.9910.9710.9770.9990.9870.9990.9540.9941.0000.9780.9540.9950.995 S130.9830.9760.9400.9560.9270.9340.9650.9860.9680.9570.9740.9781.0000.9700.9920.979 S140.9560.9680.9850.9050.9610.9600.9440.9900.9480.9980.9770.9540.9701.0000.9760.979 S150.9960.9960.9670.9750.9650.9710.9890.9960.9900.9720.9940.9950.9920.9761.0000.997 R0.9940.9990.9820.9720.9830.9870.9920.9970.9930.9801.0000.9950.9790.9790.9971.000

2.7 質(zhì)譜分析

2.7.1 質(zhì)譜條件

采用Waters Xevo G2-XS QTOF質(zhì)譜儀，ESI離子源，離子化模式為正、負(fù)離子，離子源溫度500 ℃，脫溶劑氣體為氮?dú)?，掃描范圍（m/z）為100～2000。

2.7.2 共有峰指認(rèn)

使用Waters Xevo G2-XS QTOF系統(tǒng)對(duì)277 nm波長(zhǎng)色譜圖中共有峰的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。取供試品溶液1 μL，按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄質(zhì)譜數(shù)據(jù)，采用MassLynx V4.2對(duì)各共有峰的相對(duì)分子質(zhì)量、UV吸收、特征碎片和保留時(shí)間等數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，同時(shí)結(jié)合PeakView軟件中MasterView數(shù)據(jù)庫比對(duì)，以及SciFinder數(shù)據(jù)庫檢索，參考文獻(xiàn)[20-22]數(shù)據(jù)，鑒定了1～9號(hào)共有峰的結(jié)構(gòu)，見表6。

表6 正離子模式下鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑共有指紋峰鑒定

峰號(hào)tR/min成分分子式相對(duì)分子質(zhì)量m/z 1 4.64梓醇C15H22O10362.33363.042 4 2 5.99杜仲醇苷C15H26O9350.41349.075 5 3 6.09京尼平苷酸C16H22O10374.38375.156 4 4 8.24車葉草苷酸C18H24O12432.37433.346 6 511.07綠原酸C16H18O9354.31353.382 6 621.54olivil-4’-O-β-D-glucopyranosideC26H34O12538.54539.372 4 724.41京尼平C11H14O5226.23225.334 3 833.66松脂醇二葡萄糖苷C32H42O16682.67683.145 3 944.56紫云英苷C20H20O11448.38449.145 3

3 討論

《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求（征求意見稿）》強(qiáng)調(diào)標(biāo)準(zhǔn)湯劑是衡量中藥配方顆粒是否與單味中藥湯劑基本一致的物質(zhì)基準(zhǔn)。本研究共收集15批鹽杜仲飲片樣品，分別來自杜仲的3個(gè)主產(chǎn)地（陜西、貴州、四川），試驗(yàn)所用樣品具有一定的代表性。在標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備前對(duì)飲片進(jìn)行了鑒別和檢測(cè)，為后續(xù)研究提供了保障。

迄今已從杜仲中分離鑒定了140余種化學(xué)成分[23]，其中木脂素類是其中研究較多、專屬性較強(qiáng)、結(jié)構(gòu)特征明顯的一類化合物。木脂素多以苷的形式存在于杜仲中，其中松脂醇二葡萄糖苷具有雙向調(diào)節(jié)血壓作用[24-25]，2015年版《中國藥典》將其作為杜仲藥材和飲片的質(zhì)量控制指標(biāo)，并規(guī)定鹽杜仲中松脂醇二葡萄糖苷的含量不得少于0.10%。因此，本研究選擇松脂醇二葡萄糖苷作為鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑的指標(biāo)成分，用于質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立和轉(zhuǎn)移率的表征。

此前針對(duì)鹽杜仲水提取物進(jìn)行指紋圖譜的研究較少，《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求（征求意見稿）》明確要求建立標(biāo)準(zhǔn)湯劑的指紋圖譜，并建議采用液相或氣相色譜法。杜仲所含化學(xué)成分種類較多，成分復(fù)雜，特別是其木脂素類成分普遍存在同分異構(gòu)現(xiàn)象，加之化合物極性偏大，給色譜分離帶來了一定困難。本研究分別考察以乙腈-水、甲醇-水和甲醇-乙腈-水等為流動(dòng)相的指紋圖譜，結(jié)果表明以甲醇-水為流動(dòng)相時(shí)，色譜峰的峰形較好，各共有峰的保留時(shí)間偏移較小，所得指紋圖譜的精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性均符合要求。本研究所得15批鹽杜仲標(biāo)準(zhǔn)湯劑指紋圖譜的相似度均大于0.95，表明所建立的方法具有較好的適用性。

本研究收集15批鹽杜仲飲片樣品，按照規(guī)范步驟制備標(biāo)準(zhǔn)湯劑，采用出膏率、指標(biāo)成分含量和轉(zhuǎn)移率、UPLC指紋圖譜對(duì)所得標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行表征。研究選用的樣品來自多個(gè)產(chǎn)地、具有不同規(guī)格，目的是考察不同原料的出膏率、轉(zhuǎn)移率和指紋圖譜情況，進(jìn)而根據(jù)這些數(shù)據(jù)制定出參數(shù)的允許范圍。本研究結(jié)果具有一定代表性和適用性，可為鹽杜仲配方顆粒的制備及質(zhì)量控制提供參考，同時(shí)為鹽杜仲水提物的質(zhì)量控制及進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

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Study on Preparation and Fingerprints of Standard Decoction of Salt Eucommiae Cortex

XU Huaili1, XU Dingqiao2, TANG Zhishu1, SONG Zhongxing1, ZHANG Junwei1, SU Biao1, XU Hongbo1

To prepare standard decoction of salt Eucommiae Cortex; To establish the standards of quality control.Totally15 batches of standard decoction of salt Eucommiae Cortex were prepared. With pinoresinoldiglucoside as the detection index, the extraction rate, content and transfer rate of index components were calculated and the UPLC characteristic chromatograms was established.was used to analyze and compare the characteristic chromatograms. The chemical structures of common peaks were identified with UPLC-Q-TOF-MS/MS in the standard decoction of salt Eucommiae Cortex.The extraction ratio of pinoresinoldiglucoside was from 42.74% to 71.43%, with an average value of 57.26%. The similarity between the fingerprint of standard decoction of salt Eucommiae Cortex pieces and the reference fingerprint was over 0.95. There were 9 peaks in the fingerprint, and the peaks were identified as catalpol, eucommioside, geniposidic acid, asperulosidic acid, chlorogenic acid, olivil-4’---D-glucopyranoside, genipin, pinoresinoldiglucoside, and astragalin.The preparation method of standard decoction of salt Eucommiae Cortex established in this study is stable. The fingerprint method has good precision, stability and repeatability, which can provide reference for the quality control of salt Eucommiae Cortex formula granules.

salt Eucommiae Cortex; standard decoction; fingerprints; pinoresinoldiglucoside

R284.1

A

1005-5304(2020)12-0053-06

10.19879/j.cnki.1005-5304.202003588

陜西省“三秦學(xué)者”創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持計(jì)劃（2018年）；陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃（2016KTTSSF01-06-01）；陜西省自然科學(xué)基礎(chǔ)研究計(jì)劃（2019JQ-370）

許洪波，E-mail：xhb2005@sntcm.edu.cn

（2020-03-22）

（2020-04-15；編輯：陳靜）