柴 華,武 嘯,宋 揚(yáng),李應(yīng)鶴,李 贄
(哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司,哈爾濱 150227)
豬圓環(huán)病毒(PCV)粒子直徑約為17~22 nm,基因組長(zhǎng)度1 750~1 780 nt,是目前為止人們所認(rèn)知的最小的動(dòng)物病毒[1]。1974年在豬腎PK-15細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)豬圓環(huán)病毒1 型(PCV1),使圓環(huán)病毒成為人們持續(xù)關(guān)注的對(duì)象,科學(xué)家也對(duì)其進(jìn)行不斷深入的研究[2]。PCV 屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員,其遺傳物質(zhì)為環(huán)狀單股DNA 病毒,主要分為PCV-1、PCV-2 和PCV-33 種不同的血清型類型[3]。PCV 主要包括3 個(gè)開放閱讀框,ORF1 編碼復(fù)制酶,在其內(nèi)部還包含與ORF1 方向相反的ORF3,ORF2編碼病毒粒子的Cap蛋白是PCV 的蛋白質(zhì)外殼,存在大量的圓環(huán)病毒抗原決定簇,經(jīng)過體液免疫刺激機(jī)體中的漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體[4-5]。
PCV1 在豬群體內(nèi)廣泛的存在且不會(huì)引起明顯的致病性,但2011年Saha等將PCV1接種豬胚胎細(xì)胞后,觀察有部分胎兒出現(xiàn)一定的病變,實(shí)驗(yàn)結(jié)論為PCV1對(duì)胎兒具有一定的致病力[6-7]。1991年在加拿大爆發(fā)的危害全球養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的傳染病——斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS),在現(xiàn)場(chǎng)采集的豬樣本中分離到類似PCV1 的病原體,但其基因組大小和抗原性差異極大,故將其命名為豬圓環(huán)病毒2 型(PCV2)[8]。PCV2 與其他病原體混合感染給養(yǎng)豬業(yè)帶來重大經(jīng)濟(jì)損失,以PCV2 為主要病原體引起的疾病統(tǒng)稱為PCVAD[9]。
中國(guó)科學(xué)家于1998年首次對(duì)PCV2進(jìn)行鑒定分離,并對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)條件的優(yōu)化和探索。獸醫(yī)流行病學(xué)專家通過對(duì)比ORF2 基因排列順序統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,確定中國(guó)的PCV 大致可分為9 種血清型。2008 年歐盟PCVD 聯(lián)盟將PCV2 的3 種基因型分別命名為PCV-2a、PCV-2b 和PCV-2c。將中國(guó)PCV2菌株分為PCV2a、PCV2b、PCV2d、PCV2e[10]。2003年以前爆發(fā)的圓環(huán)病的主要毒株類型為PCV2a,但其后就開始轉(zhuǎn)變?yōu)镻CV2b 型毒株。PCV2 通過種群間的個(gè)體進(jìn)行水平傳播而使豬群大量感染,由于感染的豬在豬圈中不規(guī)律的走動(dòng),圈舍中的設(shè)備、工人的衣物、運(yùn)輸車輛等都可能成為病毒傳播的媒介和載體[11]。病豬通過呼吸道黏膜分泌物、尿液、糞便和精液等方式排毒,懷孕的母豬還能通過垂直傳播感染仔豬[11]。
感染豬圓環(huán)病毒后,會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)狀況不良,生長(zhǎng)速度遲緩,體重減輕;有時(shí)出現(xiàn)呼吸道癥狀,表現(xiàn)為呼吸速率快且急,甚至出現(xiàn)呼吸困難;還有一部分出現(xiàn)腸道癥狀,以腹瀉為主[12]。如母豬出現(xiàn)感染癥狀,在胚胎時(shí)期仔豬的免疫系統(tǒng)就會(huì)被PCV 損壞[13]。即使在仔豬出生后進(jìn)行PCV 疫苗的接種,斷奶后也無法產(chǎn)生相應(yīng)的保護(hù)。所以一定要保證在母豬懷孕期間進(jìn)行疫苗的接種,杜絕因垂直傳播引起的仔豬感染[14]。
感染豬圓環(huán)病毒病的病理變化主要集中在肝、腎、肺、脾臟、腸道和淋巴結(jié)等主要部位[15]。肝臟出現(xiàn)黃疸樣變化且腫大;腎臟出現(xiàn)水腫且變?yōu)榛疑?;肺臟腫大,質(zhì)地堅(jiān)硬或橡膠狀,在肺部出現(xiàn)褐色的病變;脾臟有時(shí)腫脹有時(shí)萎縮;周身淋巴結(jié)明顯腫大,有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)出血[16]。
目前,單純應(yīng)用抗生素治療僅能減少其他細(xì)菌的繼發(fā)感染,無法從根本上治療豬圓環(huán)病毒病。有學(xué)者用中獸藥復(fù)方黃芪健脾散治療成年豬的圓環(huán)病毒病,將散劑混入飼料后進(jìn)行飼喂,按照3次·d-1投藥[17]。還有研究人員進(jìn)行了中西藥聯(lián)合防治,使用鹽酸林可霉素、強(qiáng)力霉素和阿莫西林等,并用中藥制劑補(bǔ)氣類組方,提高豬的免疫力[18]。除此之外,對(duì)于仔豬還可通過增加免疫增強(qiáng)劑和VC、VB1、VB2來提高仔豬抵抗病力。
由于PCV1 幾乎不具有感染性,目前市面上的疫苗都是針對(duì)PCV2 開展研發(fā)和使用。PCV2 基因組中,ORF2 中含有唯一能夠編碼結(jié)構(gòu)蛋白(Cap 蛋白)基因,能刺激動(dòng)物體能特異性免疫[19]。2006 年豬圓環(huán)病毒疫苗逐步商品化,但由于病毒對(duì)環(huán)境的耐受性較強(qiáng)且全年齡的豬均可感染,并且經(jīng)常和其他的病原體混合感染,因此豬場(chǎng)很難做到徹底將該病清除[20]。對(duì)養(yǎng)殖戶、豬場(chǎng)和政府來說目前最有效的手段是疫苗接種。市面上使用最多的疫苗為PCV2滅活疫苗(LG株)。隨著基因工程技術(shù)在獸用生物疫苗上的廣泛應(yīng)用,各國(guó)的專家學(xué)者致力于開發(fā)不同載體疫苗、DNA 核酸疫苗,標(biāo)記疫苗等,新研發(fā)的不同種類的疫苗目前主要停留在實(shí)驗(yàn)室研究階段,皆取得了大量數(shù)據(jù)支持疫苗的有效性和安全性。待疫苗通過臨床試驗(yàn)取得新獸藥證書后,將具有相當(dāng)可觀的銷售前景。