汪忠榮, 楊通蓮, 楊秀江, 陳正林
(1. 黔東南苗族侗族自治州動物疫病預(yù)防控制中心,貴州 凱里 556000; 2. 從江縣動物疫病預(yù)防控制中心,貴州 從江 557400; 3. 從江縣畜牧技術(shù)推廣站,貴州 從江 557400)
安卡拉病(HPS)也稱心包積水綜合征(HHS),是由腺病毒C種血清4型引起的1種急性家禽傳染病,主要危害3~6周齡肉雞,以心包積液和包涵體肝炎為主要臨床特征[1]。該病1987年在巴基斯坦卡拉奇附近的安卡拉地區(qū)肉雞場首次被發(fā)現(xiàn),故稱安卡拉病。2013年我國首次發(fā)現(xiàn)該病,此后在湖北、河南、遼寧、四川等多個省份相繼報道有該病發(fā)生[2~5]。2018年張云丹等[6]從貴州省某養(yǎng)殖場病雞中分離到該病毒。2020年6月10日從江縣生態(tài)家禽專班向縣動物疫控中心報告某專業(yè)合作社林下養(yǎng)殖場肉雞發(fā)生較嚴(yán)重的疫情。經(jīng)調(diào)查:該場存欄62日齡瑤雞5 000羽,4月31日從外地引進(jìn)雞苗,5月6日開始發(fā)病,并大量死亡。在飲水和飼料中添加阿莫西林藥物治療無效,截至6月11日共死亡 2 470羽,死亡率達(dá)49.40%?,F(xiàn)將診治情況報道如下。
病雞精神沉郁,體溫升高,食欲減退,消瘦,口鼻流出膿性分泌物,面部和眼部水腫,流淚,排黃白色稀便,雞冠和爪發(fā)紺。
解剖臨床癥狀比較明顯的病雞和剛死亡病雞,可見:咽喉和氣管有大量黏液,黏膜出血;心肌柔軟,心包積有淡黃色透明膠凍樣物(見圖1);肺瘀血水腫(見圖2);腎腫大;脾臟腫大、質(zhì)脆(見圖3);肝臟腫大、質(zhì)脆,有點(diǎn)狀出血和白色壞死灶(見圖4、圖5)。
3.1 細(xì)菌培養(yǎng)無菌操作采集剖檢病雞的心臟、肝臟、肺臟、脾臟組織接種于鮮血營養(yǎng)培養(yǎng)基,置于37 ℃恒溫箱培養(yǎng)24 h,未發(fā)現(xiàn)菌落生長,表明無病菌感染。
3.2 相關(guān)病毒核酸檢測
3.2.1 高致病性禽流感病毒檢測采集3只病死雞的心臟、肝臟、肺臟、脾臟組織樣品,剪碎研磨,用核酸抽提試劑盒抽提病毒核酸后,用高致病性禽流感病毒H5、H7亞型熒光RT-PCR試劑盒檢測,結(jié)果為陰性,表明無高致病性禽流感病毒感染。
3.2.2 安卡拉病毒檢測采集3只病死雞肝臟組織樣品,研磨離心取上清,采用核酸提取試劑盒(西安天隆生物科技有限公司,批號:E0119090321)提取總 DNA。應(yīng)用安卡拉病毒(FADV-4)特異性引物(目的片段366 bp)和試劑(貴州大學(xué)程振濤教授惠贈)。PCR反應(yīng)體系25 μL:反應(yīng)液23 μL,DNA模板2 μL。反應(yīng)程序:94 ℃ 5 min;94 ℃ 45 s,57 ℃ 45 s,72 ℃ 45 s,35個循環(huán);72 ℃ 10 min。PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物通過1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。結(jié)果:3個檢測樣品均擴(kuò)增出目的條帶(見圖6),說明病雞存在FADV-4感染。
根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、病理變化和實驗室檢測,確診發(fā)病雞為安卡拉病毒感染。
(1)對雞場所有場地進(jìn)行全面消毒,對發(fā)病雞進(jìn)行隔離,淘汰病殘雞。(2)在每15 kg飲水中添加強(qiáng)力霉素1 g,每10 kg飼料中添加氟苯尼考粉1 g,預(yù)防繼發(fā)細(xì)菌感染[7,8]。(3)按照陳秋鵬等[9]方法采用中獸醫(yī)“驅(qū)毒、泄肝、溫腎、通便”治法。處方:三棱120 g,莪術(shù)120 g,龍膽草75 g,梔子75 g,茵陳75 g,澤瀉90 g,杜仲60 g,茱萸肉60 g,蒲公英120 g,甘遂30 g,二丑30 g,丹參90 g,芫花30 g,赤芍90 g,葶藶子90 g。共研成粉,每羽1劑/次,每日3次,全群拌料飼喂,連續(xù)飼喂5天。喂藥后第4天雞死亡數(shù)開始下降,第5天死亡數(shù)降至15只左右。停藥3天后再連續(xù)飼喂3天,第10天停止死亡,至7月16日后未出現(xiàn)死亡,發(fā)病逐漸減少,疫情得到有效控制。
6.1近年來從江縣大力發(fā)展林下經(jīng)濟(jì)尤其是林下養(yǎng)雞,5—6月屬于多雨季節(jié),發(fā)病雞場為林下養(yǎng)殖場,地勢低洼,環(huán)境泥濘,衛(wèi)生條件差,涼棚處稍干燥。有研究報道雞安卡拉病在夏季和雨季發(fā)病率較高,環(huán)境衛(wèi)生差和雞舍潮濕更易引發(fā)本病[10,11]。不同品種、日齡的雞均可感染發(fā)病,但肉雞病死率相對較高[12]。此為首次在黔東南州發(fā)現(xiàn)該病,應(yīng)引起重視。
6.2確診該病后對場內(nèi)發(fā)病雞進(jìn)行隔離,嚴(yán)重病雞淘汰,未發(fā)病雞轉(zhuǎn)移到干燥、通風(fēng)良好的地方,并對原有場地進(jìn)行徹底消毒。經(jīng)采用中西結(jié)合的方式對病雞進(jìn)行綜合治療,效果較好。