黃藥子肝毒性研究進(jìn)展

潘云淼,侯曉楠

（山東中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院，山東 濟(jì)南）

0 引言

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃藥子具有抗炎、抗病毒、抗癌等作用，藥用開(kāi)發(fā)價(jià)值較高。但其引發(fā)的肝臟毒性在很大程度上限制了臨床應(yīng)用。本文主要對(duì)黃藥子肝毒性的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 黃藥子化學(xué)成分研究

羅國(guó)勇等[1]綜合利用多種色譜方法對(duì)黃藥子的乙醇提取物進(jìn)行分離，共得到23個(gè)化合物。其中14個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到。鄭娟[2]先后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取，進(jìn)行肝臟損傷毒性實(shí)驗(yàn)，研究黃藥子肝臟損傷毒性物質(zhì)基礎(chǔ)，確定主要肝臟毒性部位。然后用各種色譜技術(shù)對(duì)肝臟主要毒性部位進(jìn)行分離純化，用各種光譜技術(shù)對(duì)分離出的單體進(jìn)行鑒定；同時(shí)，對(duì)不同批次的黃藥子進(jìn)行了高效液相指紋圖譜分析。結(jié)果表明，乙酸乙酯提取部位是肝損傷的主要毒性部位，共分離鑒定出44個(gè)化合物。王國(guó)凱等[3]通過(guò)實(shí)驗(yàn)從黃藥子肝毒性部位乙酸乙酯萃取部位分離得到了24個(gè)化合物，在一定程度上豐富了黃原酸的化學(xué)成分，為進(jìn)一步的研究和開(kāi)發(fā)提供了參考。

2 黃藥子應(yīng)用

楊輝等[4]研究了含黃藥子的制劑的臨床應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)黃藥子對(duì)腫瘤、炎癥、蛇咬、甲狀腺疾病、血液系統(tǒng)疾病、皮膚病等均有顯著療效，但會(huì)引起許多不良反應(yīng)。謝敏等[5]研究表明黃藥子及其方對(duì)亞急性甲狀腺炎、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、單純性甲狀腺腫、甲狀腺腫瘤等疾病有良好的治療效果。

3 對(duì)于黃藥子及含黃藥子制劑所致不良反應(yīng)的臨床研究報(bào)道

有研究[6]報(bào)道，無(wú)肝臟病史的患者因甲狀腺腫瘤持續(xù)服用黃藥子，出現(xiàn)肝損害癥狀并逐漸加重，治療期間未使用其他藥物，最終導(dǎo)致死亡。葛汝青等[7]通過(guò)病例分析發(fā)現(xiàn)，藥物性肝炎是由于用藥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)所致。岳樹(shù)香等[8]發(fā)現(xiàn)處方中加入黃藥子，患者出現(xiàn)藥物性肝炎，停藥后改用其他藥物，肝功能癥狀改善。杜立娟等[9]分析了黃藥子所致的臨床不良反應(yīng)病例，并發(fā)現(xiàn)除了偶爾小劑量會(huì)導(dǎo)致不良反應(yīng)外，不良反應(yīng)的劑量在其他病例下多為90g以上和時(shí)間多為服藥后10d以上，及時(shí)停藥并對(duì)癥治療后預(yù)后較好。

4 黃藥子的毒理研究

4.1 毒性作用機(jī)制

熊印華等[10]從脂肪酸代謝的觀點(diǎn)來(lái)看其毒性組分DIOB的肝損傷，并通過(guò)化學(xué)計(jì)量法分析脂肪酸的代謝分布和黃藥子肝毒性之間的相互關(guān)系。齊靜[11]研究了黃藥子水提物對(duì)小鼠肝臟的毒性作用，發(fā)現(xiàn)肝臟損傷的機(jī)制與ATP合成的減少和線粒體氧化損傷的增加有關(guān)。線粒體損傷可能是黃藥子引起肝臟毒性的重要靶點(diǎn)和機(jī)制。王少珍[12]建立肝損傷模型，通過(guò)DGE文庫(kù)信息分析和qRT-PCR法驗(yàn)證，得到黃藥子中毒致肝損傷的作用機(jī)制如下：影響花生四烯酸代謝途徑，破壞肝細(xì)胞和線粒體鈣穩(wěn)態(tài)，破壞線粒體的功能，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡；誘導(dǎo)PPAR信號(hào)通路中的多種CYP4A酶同工酶、CD36、SCD2基因的表達(dá)，產(chǎn)生自由基，導(dǎo)致肝臟損傷；CYP450酶代謝受到影響，使肝臟藥物代謝后產(chǎn)生毒性代謝物；谷胱甘肽依賴(lài)的抗氧化酶活性直接受到影響，導(dǎo)致氧化應(yīng)激損傷。許玉鳳[13]首先建立了同時(shí)定量檢測(cè)黃藥子活性成分黃獨(dú)素B(DIOB)和8-表黃藥子素E乙酸酯(EEA)的LC-MS/MS方法，發(fā)現(xiàn)DIOB和EEA在消除肝微粒體和產(chǎn)生活性產(chǎn)物方面存在明顯的物種差異，在將動(dòng)物數(shù)據(jù)外推到人類(lèi)身上時(shí)，應(yīng)注意代謝消除的物種差異。在臨床應(yīng)用中，應(yīng)注意CYP3A介導(dǎo)的藥物-藥物相互作用風(fēng)險(xiǎn)。葉晶[14]等通過(guò)對(duì)人肝細(xì)胞損傷程度的分析，發(fā)現(xiàn)黃獨(dú)素B對(duì)人肝細(xì)胞具有藥物作用和時(shí)間依賴(lài)性；氧化應(yīng)激可能是黃獨(dú)素B毒性作用的原因，線粒體是損傷的靶細(xì)胞器;自噬參與了黃獨(dú)素B的損傷過(guò)程，可能是細(xì)胞成員損傷后的應(yīng)激保護(hù)機(jī)制，從而迅速清除細(xì)胞內(nèi)受損的細(xì)胞器。王少珍等[15]分析中藥黃藥子水提取物誘導(dǎo)小鼠肝損傷后的基因表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)黃藥子的誘導(dǎo)作用嚴(yán)重影響了小鼠肝臟的結(jié)構(gòu)、功能以及相關(guān)功能基因的表達(dá)；其對(duì)肝損傷的機(jī)制可能與自由基的產(chǎn)生有關(guān)，使質(zhì)膜和細(xì)胞器肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷、機(jī)體抗氧化能力的下降，或通過(guò)直接影響脂質(zhì)在肝臟代謝，提高肝臟脂肪酸氧化反應(yīng)。

4.2 肝毒性生物標(biāo)志物研究

Sheng等[16]的實(shí)驗(yàn)表明，CD30配體(CD30L)和細(xì)胞介素3(IL-3)是黃藥子肝毒性的潛在生物標(biāo)志物。血清microRNA-21、microRNA-122、microRNA-25、microRNA-375是肝細(xì)胞性肝癌和慢性肝炎的新標(biāo)志物。Su等[17]發(fā)現(xiàn)血清microRNA-122可作為黃藥子致肝損傷的診斷標(biāo)志物，具有較高的敏感性和特異性。

5 配伍減毒作用及其機(jī)制

5.1 黃藥子配伍甘草

華碧春等[18]觀察不同劑量組和不同培養(yǎng)時(shí)間的肝細(xì)胞存活率，比較黃藥子和含血清甘草對(duì)體外肝細(xì)胞存活率的影響；采用比色法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中ALT、AST、乳酸脫氫酶，探討甘草降低肝毒性的作用。結(jié)果表明，甘草與黃藥子配伍后，對(duì)肝細(xì)胞的毒性明顯降低，對(duì)肝細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用。卓實(shí)等[19]進(jìn)一步研究了甘草的配伍可以降低黃藥子對(duì)人肝細(xì)胞膜通透性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，含黃藥子的血清可在短時(shí)間內(nèi)影響肝細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性，甘草的配伍可明顯減弱損傷作用。黃藥子致肝損傷的機(jī)制可能是其對(duì)肝細(xì)胞膜的直接損傷作用，甘草配伍的解毒作用與這一途徑有關(guān)。

5.2 黃藥子配伍當(dāng)歸

于棟華[20]發(fā)現(xiàn)黃藥子對(duì)CYP1A2和CYP2E1蛋白表達(dá)有強(qiáng)烈的誘導(dǎo)作用，與當(dāng)歸聯(lián)合使用時(shí)，CYP1A2、CYP2E1的表達(dá)增加得到緩解，說(shuō)明當(dāng)歸抑制了CYP1A2、CYP2E1的蛋白表達(dá)，具有降低毒性和抑制作用。湯青[21]發(fā)現(xiàn)黃藥子可以調(diào)節(jié)大鼠肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78和促細(xì)胞凋亡因子基因表達(dá)，當(dāng)結(jié)合當(dāng)歸后可拮抗黃藥子對(duì)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78和促細(xì)胞凋亡因子基因表達(dá)的上調(diào)作用，這可能是黃藥子產(chǎn)生肝毒性而配伍當(dāng)歸后毒性減輕、保護(hù)肝臟的機(jī)制之一。

5.3 黃藥子配伍五味子

楊輝等[22]在實(shí)驗(yàn)中使用五味子和黃藥子，從生化試驗(yàn)、病理觀察等方面進(jìn)行研究分析，發(fā)現(xiàn)五味子對(duì)黃藥子引起的肝損傷有較好的緩解作用。其機(jī)制可能是五味子能提高肝細(xì)胞血漿中SOD和過(guò)氧化氫酶的活性。

5.4 黃藥子配伍黃柏與黃芩

王秋紅等[23]發(fā)現(xiàn)黃芩和黃柏對(duì)黃藥子引起的肝損傷具有保護(hù)作用，能減少肝細(xì)胞的壞死，防止肝纖維化、脂肪變性，同時(shí)可以改善肝臟中谷胱甘肽和MDA的活動(dòng)，能保護(hù)黃藥子引起的膜脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，提高肝細(xì)胞存活率，提高機(jī)體抗氧化作用。

6 討論

黃藥子的療效顯著，在治療甲狀腺疾病、腫瘤等方面療效顯著，并且藥用的潛在價(jià)值很大。但其引發(fā)的毒性令醫(yī)者喜其效而畏其毒，大大限制了黃藥子的臨床應(yīng)用，對(duì)黃藥子的毒性表現(xiàn)、指紋圖譜的測(cè)定更有利于醫(yī)生用藥和不良反應(yīng)的診斷。對(duì)黃藥子毒性作用機(jī)制的研究進(jìn)一步闡明了黃藥子肝毒性的發(fā)生機(jī)制;生物標(biāo)志物的探索為黃藥子肝毒性檢測(cè)提供了更為靈敏的指標(biāo)；代謝物的動(dòng)態(tài)變化的研究可以作為肝毒性損

害的評(píng)價(jià)指標(biāo)。雖然已有顯著成果，但黃藥子的肝毒性研究還有待進(jìn)一步探索。其中甘草、當(dāng)歸、黃柏、黃芩、五味子、蜈蚣藻、半枝蓮均具有拮抗黃藥子的肝毒性的功效。可將這些功效相似但性味不一致的不同中藥組成一個(gè)復(fù)方，用于治療黃藥子誘導(dǎo)的肝不良反應(yīng)[12]。