孕婦血清IgG抗A抗B水平檢測(cè)用于早期診斷JZ〗ABO-HDN的臨床價(jià)值分析

陳 蕾 羅 明 柳月霞

河南省南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院產(chǎn)一科 473000

流行病學(xué)研究表明，ABO新生兒溶血病(Neonatal hemolytic disease，ABO-HDN)的發(fā)病率可超過(guò)938/萬(wàn)新生兒[1]。在多胎妊娠、母體血型為O型血的孕產(chǎn)婦中，ABO-HDN的發(fā)病率可進(jìn)一步上升[2]。臨床上ABO-HDN的發(fā)生，能夠?qū)е滦律鷥翰±硇渣S疸的發(fā)生，并能夠增加患兒核黃疸的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于ABO-HDN的早期診斷具有重要的意義，雖然新生兒血清膽紅素水平能夠在ABO-HDN的早期診斷過(guò)程中發(fā)揮一定的篩查作用。但單純依靠膽紅素水平鑒別或者早期篩查ABO-HDN的局限性較為明顯，其干擾因素較多，診斷的一致性率較差。血清IgG抗A(B)水平是體內(nèi)紅細(xì)胞膜上抗原簇誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的抗體，其能夠通過(guò)胎盤(pán)血管進(jìn)入母體，形成免疫性復(fù)合物，進(jìn)而誘導(dǎo)紅細(xì)胞膜的破壞和溶解，加劇黃疸病情的進(jìn)展[3-4]。為了揭示IgG抗A(B)水平的表達(dá)與ABO-HDN的病情關(guān)系，從而為臨床上ABO-HDN患者的早期篩查或者診斷提供參考，本次研究選取2017年6月—2018年6月在我院就診的孕婦1 120例，探討了IgG抗A(B)水平診斷ABO-HDN的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年6月—2018年6月在我院就診的孕婦1 120例，年齡20～36歲，平均年齡(28.20±4.56)歲；孕周28～39周，中位孕周30.50周。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)孕婦血型為O型，其丈夫?yàn)锳型、B型或AB型；(2)夫妻血型均為RhD陽(yáng)性；(3)孕周≥28周；(4)血清不規(guī)則抗體陰性；(5)孕婦及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并有珠蛋白生存障礙、肝炎、腎功能不全、血液系統(tǒng)疾病等；(2)有嚴(yán)重妊娠并發(fā)癥。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 采集孕產(chǎn)婦的孕16～24周空腹靜脈血，首先進(jìn)行ABO血型及RH血型的鑒定，1 500r/min離心10min后，采集上清液5μl進(jìn)行抗體的檢測(cè)。37℃水浴10min，采用生理鹽水進(jìn)行稀釋?zhuān)沟闷湎♂尩臐舛确植紴?∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512，在人抗球蛋白卡中加入對(duì)象或者伴侶的外周血紅細(xì)胞懸浮液體1ml，37℃孵育2h，1 000r/min離心10min，取上清液，1 500r/min離心10min，以出現(xiàn)凝集的最高稀釋濃度作為抗體的效價(jià)，對(duì)于其中抗體效價(jià)>1∶128需要進(jìn)行抗體稀釋、游離抗體及抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)，其中2項(xiàng)或者2項(xiàng)以上陽(yáng)性可診斷為ABO-HDN。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件，計(jì)數(shù)資料比較使用χ2趨勢(shì)檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)，預(yù)測(cè)價(jià)值采用受試者工作特征(ROC)曲線(xiàn)進(jìn)行分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)情況 1 120例孕婦中，IgG抗A(B)抗體效價(jià)≤1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、≥1∶512分別有224例、287例、230例、201例和178例，分別占20.00%、25.63%、20.54%、17.95%和15.89%。

2.2 不同母嬰血型與血清IgG抗A(B)抗體分布 母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)≤1∶32比例明顯低于O-B組和O-AB組(P<0.05)；母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)1∶256比例高于O-B組(P<0.05)；母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)≥1∶512比例高于O-B組和O-AB組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同母嬰血型與血清IgG抗A(B)抗體分布[n(%)]

2.3 不同血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)孕婦ABO-HDN發(fā)生情況 隨血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)升高，ABO-HDN發(fā)生率明顯升高(P<0.05)，IgG抗A(B)抗體效價(jià)達(dá)到≥1∶512時(shí)，ABO-HDN發(fā)生率達(dá)到44.94%，見(jiàn)表2。

表2 不同血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)孕婦ABO-HDN發(fā)生情況[n(%)]

2.4 血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)預(yù)測(cè)ABO-HDN發(fā)生價(jià)值 血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)預(yù)測(cè)ABO-HDN發(fā)生的ROC曲線(xiàn)下面積為0.801，95%CI為0.773～0.830，P<0.05，當(dāng)效價(jià)≥1∶128時(shí)，其預(yù)測(cè)靈敏度和特異度分別為92.70%和54.20%，見(jiàn)圖1。

圖1 ROC曲線(xiàn)

3 討論

妊娠過(guò)程中母體紅細(xì)胞膜成分誘導(dǎo)的自身細(xì)胞免疫抗體的形成，能夠在再次妊娠過(guò)程中通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，誘導(dǎo)母體免疫性復(fù)合物的形成，造成胎兒組織器官的損害[5]。在紅細(xì)胞膜表面抗原簇表位較多的孕產(chǎn)婦中，ABO-HDN的發(fā)生率可進(jìn)一步上升[6]。長(zhǎng)期的臨床觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，ABO-HDN患者發(fā)生腦癱或者癡呆的風(fēng)險(xiǎn)可超過(guò)3%以上，同時(shí)在未經(jīng)早期干預(yù)或者退黃治療的患兒中，遠(yuǎn)期中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害更為明顯[7]。雖然通過(guò)對(duì)出生后的新生兒靜脈血進(jìn)行游離皮散實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)，能夠?yàn)锳BO-HDN的診斷提供依據(jù)，但并無(wú)早期的篩查價(jià)值。如部分臨床分析認(rèn)為，出生后及時(shí)進(jìn)行早期的溶血實(shí)驗(yàn)的確診及臨床干預(yù)，遠(yuǎn)期ABO-HDN新生兒的臨床結(jié)局惡化的風(fēng)險(xiǎn)仍然較高[8]。本次研究通過(guò)對(duì)于孕期或者出生前母體血清中相關(guān)抗體指標(biāo)的分析，具有下列幾個(gè)方面的現(xiàn)實(shí)意義：(1)通過(guò)對(duì)于IgG抗A(B)水平的分析，能夠揭示ABO-HDN的發(fā)病機(jī)理；(2)通過(guò)對(duì)于IgG抗A(B)水平的分析，能夠?yàn)樵衅诰哂邢嚓P(guān)高危因素的孕產(chǎn)婦提供可靠的篩查性指標(biāo)，從而在孕期較早進(jìn)行臨床干預(yù)。

IgG抗A(B)水平是A型紅細(xì)胞或者B型紅細(xì)胞膜表面抗原決定簇誘導(dǎo)形成的抗體，其通過(guò)糖蛋白配體進(jìn)而可以誘導(dǎo)母體紅細(xì)胞膜的聚集，通過(guò)糖蛋白成分能夠提高紅細(xì)胞膜的沉降率。相關(guān)基礎(chǔ)方面的研究也表明，IgG抗A(B)抗體對(duì)于母體紅細(xì)胞膜的破壞，能夠?qū)е履阁w紅細(xì)胞膜通透性的改變，促進(jìn)血紅蛋白的降解和膽紅素的形成[9-10]。相關(guān)研究已經(jīng)探討了IgG抗A(B)水平的表達(dá)與新生兒溶血的關(guān)系，認(rèn)為在發(fā)生新生兒溶血的相關(guān)母體外周血中，IgG抗A(B)水平明顯的上升[11]，但對(duì)于依靠IgG抗A(B)效價(jià)水平診斷ABO-HDN的滴度臨界值仍然缺乏一致的認(rèn)識(shí)。

在所有的入組孕婦中，分析發(fā)現(xiàn)IgG抗A(B)抗體效價(jià)的分布較為一致，其多數(shù)的抗體效價(jià)分布在15%～20%。對(duì)于不同類(lèi)型的母嬰血型中相關(guān)抗體指標(biāo)進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體低濃度效價(jià)比例明顯低于其他各組，而血清IgG抗A(B)抗體高濃度效價(jià)比例明顯高于其他各組，差異較為明顯，提示了母嬰血型O-A的孕產(chǎn)婦，其A型抗原決定簇誘導(dǎo)的高效價(jià)的抗體形成更為顯著，這主要由于A型紅細(xì)胞膜上相關(guān)抗原決定簇的抗原表位較多、決定簇的分布較為密集有關(guān)。毛中華等[12]研究者也發(fā)現(xiàn)了與本次研究相一致的結(jié)論，其發(fā)現(xiàn)在母嬰血型O-A組的孕產(chǎn)婦中，其IgG抗A(B)抗體效價(jià)或者濃度可平均上升40%，同時(shí)隨著分娩或者妊娠次數(shù)的增加，IgG抗A(B)抗體的濃度可進(jìn)一步上升。在血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)上升的過(guò)程中，可以發(fā)現(xiàn)ABO-HDN的發(fā)病率也明顯的上升，提示血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)水平與新生兒溶血的發(fā)生密切相關(guān)，通過(guò)分析其原因，考慮與IgG抗A(B)抗體效價(jià)的下列幾個(gè)方面的病理意義有關(guān)[13-15]：(1)血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)越高，孕產(chǎn)婦妊娠晚期或者出生后新生兒體內(nèi)的母體來(lái)源的異?？贵w濃度越高，進(jìn)而加劇了血紅蛋白的分解和膽紅素的形成；(2)血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)越高，出生后新生兒體內(nèi)的紅細(xì)胞膜的穩(wěn)定性越差，溶血的發(fā)生率也越高。診斷學(xué)分析可見(jiàn)，血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)>1∶128時(shí)，其診斷ABO-HDN的靈敏度較高，但仍然存在一定的漏診和誤診的可能，臨床上對(duì)于孕期血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)>1∶128的孕產(chǎn)婦可以早期使用藥物干預(yù)，進(jìn)而改善出生后新生兒的臨床結(jié)局。

綜上所述，孕婦血清IgG抗A(B)水平與ABO-HDN的發(fā)生密切相關(guān)，母嬰血型O-A組血清IgG抗A(B)抗體水平較高，同時(shí)IgG抗A(B)水平在早期診斷ABO-HDN中有較好的應(yīng)用價(jià)值，值得臨床使用。