加味生脈散對(duì)飛碟運(yùn)動(dòng)員高溫訓(xùn)練前后外周血中血液生化及HSP72表達(dá)的影響

沈 堅(jiān) 徐 峰 金 斌 章榮權(quán)

1浙江體育職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 311231；

2浙江省射擊射箭自行車運(yùn)動(dòng)管理中心，浙江 湖州 313100

如何增強(qiáng)高溫耐受能力是運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練學(xué)面臨的重要課題之一。如果機(jī)體長(zhǎng)期處于高溫、高濕等環(huán)境下，熱適應(yīng)水平會(huì)減弱或喪失，如果不及時(shí)采取有效的措施進(jìn)行預(yù)防，將導(dǎo)致機(jī)體代謝產(chǎn)熱以及從熱環(huán)境中吸收、傳輸熱量的比例增加，水電解質(zhì)代謝出現(xiàn)紊亂，內(nèi)環(huán)境失衡，從而出現(xiàn)心跳加快，外周阻力增加等一系列以中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)功能障礙的不良反應(yīng)與癥狀，稱之為熱疾病，熱疾病是導(dǎo)致美國(guó)高中生出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)性猝死的第三大原因。[1]熱疾病在飛碟運(yùn)動(dòng)員夏季訓(xùn)練中時(shí)常發(fā)生，常常降低訓(xùn)練質(zhì)量，影響競(jìng)技成績(jī)的提高，甚至威脅身心健康，在夏訓(xùn)中，加強(qiáng)對(duì)運(yùn)動(dòng)員健康的監(jiān)護(hù)，提高運(yùn)動(dòng)員的熱耐受能力，進(jìn)而預(yù)防熱疾病的發(fā)生，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。熱適應(yīng)是指機(jī)體處在熱環(huán)境一段時(shí)間后，機(jī)體所產(chǎn)生的對(duì)熱負(fù)荷的適應(yīng)能力，熱適應(yīng)水平的高低是機(jī)體對(duì)熱環(huán)境的適應(yīng)能力的直接反映。當(dāng)前，高溫環(huán)境下機(jī)體的熱適應(yīng)水平評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)尚不統(tǒng)一，熱休克蛋白對(duì)于機(jī)體在正?；蚋邷丨h(huán)境下的生存是必要的，與細(xì)胞保護(hù)之間的關(guān)系最為密切，熱休克蛋白72（heat shock protein 72，HSP72）與熱應(yīng)激的關(guān)系最為密切，是對(duì)熱及運(yùn)動(dòng)刺激最敏感的熱應(yīng)激蛋白，易被誘導(dǎo)產(chǎn)生，在一定程度上反映機(jī)體的熱應(yīng)激程度。[2]有研究[3]認(rèn)為，熱疾病患者體內(nèi)，HSP72的表達(dá)在降低，而適當(dāng)上調(diào)HSP72的表達(dá)可以提高機(jī)體的熱適應(yīng)水平。[4]

1 對(duì)象與方法

1. 1 研究對(duì)象及主要試劑

選擇浙江省射擊射箭自行車運(yùn)動(dòng)管理中心飛碟運(yùn)動(dòng)員24名，健康狀況良好，無(wú)吸煙、飲酒等嗜好，無(wú)家族遺傳病史，年齡16～24歲，平均20.21±1.55歲；訓(xùn)練年限為3～10年。24人采用隨機(jī)數(shù)字表方法分為對(duì)照組和中藥組，每組12人，兩組隊(duì)員年齡、訓(xùn)練年限等計(jì)數(shù)資料，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)，差異無(wú)顯著性意義（P＞0. 05），具有可比性?？诜a(bǔ)液鹽為飛碟運(yùn)動(dòng)員夏季訓(xùn)練所用常規(guī)飲品，加味生脈散組成為：人參、麥冬、五味子等，由浙江體育職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬體育醫(yī)院提供，淋巴細(xì)胞分離液（上海乾途生物科技有限公司提供）。

1. 2 實(shí)驗(yàn)方法

進(jìn)行高溫訓(xùn)練 2周，兩組訓(xùn)練強(qiáng)度相同，每天同時(shí)在高溫環(huán)境下（30～36℃）訓(xùn)練，每天連續(xù)打五組，一組30發(fā)子彈，每組間歇20min。訓(xùn)練過程中，對(duì)照組按需飲用口服補(bǔ)液鹽沖劑（每袋沖劑含氯化鈉2.6克、氯化鉀1.5克、枸櫞酸鈉2.9克、無(wú)水葡萄糖13.5克），不服用加味生脈散制劑；中藥組飛碟運(yùn)動(dòng)員于訓(xùn)練過程中飲用加味生脈散制劑1袋（200ml）及口服補(bǔ)液鹽沖劑。

1. 3 實(shí)驗(yàn)室檢查

兩組運(yùn)動(dòng)員，于高溫訓(xùn)練開始前、高溫訓(xùn)練2周后，安排血液測(cè)試，抽血后，分置于兩個(gè)含有EDTA鈉的抗凝管中。其中一管送浙江省體育科學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行血液常規(guī)及生化指標(biāo)檢測(cè)，另一管血液在室溫下自然凝固10～20分鐘，再經(jīng)過20分鐘左右（2000～3000轉(zhuǎn)/分）的離心，仔細(xì)收集上清，寄送上海江萊生物科技有限公司實(shí)驗(yàn)室。血液指標(biāo)包括：紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)等常規(guī)，CK（心肌激酶）、Bun（尿素氮）等反映機(jī)體代謝情況的血液生化指標(biāo)以及Na+（鈉離子）、K+（鉀離子）、Ca2+（鈣離子）、Cl-（氯離子）等反映機(jī)體電解質(zhì)代謝情況的指標(biāo)。外周血液HSP72表達(dá)水平測(cè)定：應(yīng)用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，操作步驟：加樣、加酶、溫育、配液、洗滌、顯色、終止、測(cè)定，人熱休克蛋白72（HSP-72）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒由上海江萊生物科技有限公司提供。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)資料均以±s表示，用SPSS 19. 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，兩組訓(xùn)練前后均數(shù)比較采用單因素方差分析LSD法。

2 實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果

2. 1 高溫訓(xùn)練前后兩組血液常規(guī)的比較

高溫訓(xùn)練前后紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)高溫訓(xùn)練前后，組間無(wú)顯著性差異（P＞0. 05），白細(xì)胞計(jì)數(shù)，中藥組與訓(xùn)練前、對(duì)照組之間比較均有顯著差異（P＜ 0.05）。

表1 高溫訓(xùn)練前后兩組血常規(guī)比較（±s，n= 12）

2. 2高溫訓(xùn)練前后兩組血液生化指標(biāo)的比較

表2 高溫訓(xùn)練前后兩組血液生化比較（±s，n= 12）

高溫訓(xùn)練前后，血液CK、Bun、Na+、K+、Ca2+、Cl-生化指標(biāo)檢驗(yàn)的測(cè)量值組間差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。

2.3 高溫訓(xùn)練前后兩組外周血HSP72表達(dá)的比較

表3 兩組訓(xùn)練前后HSP 72表達(dá)的比較（±s，n= 12）

高溫訓(xùn)練之前，兩組的HSP72的表達(dá)經(jīng)比較無(wú)顯著差異（P＞ 0.05）。高溫訓(xùn)練之后，經(jīng)比較，兩組的HSP72表達(dá)均顯著高于訓(xùn)練之前（P＜ 0.05），中藥組的HSP72表達(dá)顯著高于對(duì)照組（P＜ 0.05），具體見表3。

3 討論

隨著全球溫室效應(yīng)和厄爾尼諾現(xiàn)象的加劇，全球氣溫普遍上升，呈現(xiàn)出高溫的特點(diǎn)。當(dāng)前，許多重要的國(guó)際、國(guó)內(nèi)賽事，如夏季奧運(yùn)會(huì)、國(guó)際足聯(lián)世界杯和環(huán)法自行車賽等一般都在北半球的夏季月份舉行，通常也是在高溫環(huán)境中進(jìn)行的，[1]2017年天津全運(yùn)會(huì)飛碟項(xiàng)目也于當(dāng)年8月舉辦。飛碟是一項(xiàng)技術(shù)動(dòng)作復(fù)雜和精確程度很高的室外運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目，要求運(yùn)動(dòng)員需要具備較強(qiáng)的心理素質(zhì)和抗干擾能力，同時(shí)擁有較高水準(zhǔn)的穩(wěn)定性、一致性、靈活協(xié)調(diào)能力以及持續(xù)性。浙江省飛碟隊(duì)隸屬于浙江省射擊射箭自行車運(yùn)動(dòng)管理中心，位于浙江省湖州市長(zhǎng)興縣境內(nèi)，長(zhǎng)興縣位居浙北低山丘陵向太湖西岸平原過渡的地區(qū)，屬于亞熱帶海洋性氣候，全年光照充足、降雨充沛、雨熱同季，夏季時(shí)間長(zhǎng)，溫度高，濕度大，尤其是每年的7、8兩月，最高溫度甚至高達(dá)39℃以上。在這樣的高溫、高濕環(huán)境下訓(xùn)練，需要運(yùn)動(dòng)員擁有較高的熱適應(yīng)水平，而熱痙攣、熱暈厥等熱疾病在飛碟運(yùn)動(dòng)員夏季訓(xùn)練中尤為常見，運(yùn)動(dòng)員發(fā)生輕型熱疾病可以影響正常訓(xùn)練計(jì)劃，重癥熱疾病則可能終止訓(xùn)練，甚至有生命危險(xiǎn)，因此為了避免熱疾病的發(fā)生，充分了解和認(rèn)識(shí)熱疾病的發(fā)病原因及采取積極的預(yù)防措施顯得尤為重要，加強(qiáng)對(duì)運(yùn)動(dòng)員健康的監(jiān)護(hù)、預(yù)防熱疾病具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。生脈散首載于金代張?jiān)亍夺t(yī)學(xué)啟源》中，由人參、麥冬、五味子三味藥組成，具有“益氣生津，斂陰止汗”的功效，多用于治療溫?zé)?、暑熱，耗氣傷陰證及久咳傷肺，氣陰兩虛證。飛碟運(yùn)動(dòng)員在高溫高濕環(huán)境下易發(fā)生注意力不集中，這正是影響飛碟運(yùn)動(dòng)員成績(jī)的一個(gè)重要影響因素，生脈散中人參可以益氣安神益智，服用生脈散可以幫助運(yùn)動(dòng)員提高注意力，從而提高命中率。通過研究發(fā)現(xiàn)，訓(xùn)練前，兩組間的血常規(guī)及生化指標(biāo)無(wú)顯著性差異。訓(xùn)練后，兩組間的CK、Bun、Ca2+、Na+、Cl-、K+無(wú)差異（P＞ 0.05）；中藥組白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高，與自身訓(xùn)練前及對(duì)照組比較差異顯著（P＜ 0.05），這可能與高溫應(yīng)激有關(guān)[5]，也提示服用加味生脈散制劑后，機(jī)體對(duì)高溫的應(yīng)激性有增強(qiáng)的趨勢(shì)。高溫訓(xùn)練后，中藥組飛碟運(yùn)動(dòng)員和對(duì)照組飛碟運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)HSP72的表達(dá)均較訓(xùn)練前上升，其中中藥組上升幅度大（P＜ 0.05），提示服用加味生脈散可顯著提高高溫訓(xùn)練后運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)的HSP72表達(dá)。HSP72是具有自衛(wèi)性[7]的一種應(yīng)激蛋白，它的表達(dá)的適當(dāng)上調(diào)可以增強(qiáng)肌體的熱適應(yīng)水平。盡管加味生脈散影響HSP72表達(dá)的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步探討，但上個(gè)世紀(jì)九十年代就有研究者發(fā)現(xiàn)生脈散能降低老年動(dòng)物在高溫環(huán)境中的死亡率，[7]還有學(xué)者[8]實(shí)驗(yàn)證實(shí)加味生脈散不僅能明顯延長(zhǎng)小鼠在高溫狀態(tài)下的生存時(shí)間而且能增強(qiáng)高溫狀態(tài)下耐疲勞能力，這提示加味生脈散可能有預(yù)防或延緩熱疾病發(fā)生的作用。現(xiàn)代藥理研究[9]也表明生脈散具有抗氧化、改善心肌功能、抗心律失常、提高機(jī)體的高溫耐受能力的作用。本次研究過程中，中藥組飛碟運(yùn)動(dòng)員未發(fā)生運(yùn)動(dòng)性中暑，而對(duì)照組中有5名運(yùn)動(dòng)員出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)性中暑的癥狀，這一結(jié)果也表明加味生脈散對(duì)預(yù)防或延緩運(yùn)動(dòng)性中暑的發(fā)生有一定作用。因此，服用加味生脈散可為增強(qiáng)飛碟運(yùn)動(dòng)員熱適應(yīng)水平、預(yù)防熱疾病、提高高溫下的運(yùn)動(dòng)能力提供參考。