超高效液相色譜

張建平 呂警

關鍵詞水;吡蟲啉;代謝物;農藥殘留

吡蟲啉，別名咪蚜胺，是一種新型高效氯代煙堿類廣譜殺蟲劑，優(yōu)點是高效、低殘留，是棉花、水稻、蔬菜及各種果樹防治害蟲的首選農藥。作用機理為：吡蟲啉對昆蟲神經系統(tǒng)中的煙堿乙酰膽堿受體具有很強的殺蟲活性，干擾化學信號傳導，導致受體興奮、麻痹、死亡。吡蟲啉屬于易土壤降解農藥，半衰期為4～11d，此外，水解也快，在堿性溶液中在比酸性溶液中水解更快，其在植物體內主要代謝為吡蟲啉胍、吡蟲啉脲、烯式吡蟲啉、5-羥基吡蟲啉、6-氯煙酸。吡蟲啉在水域環(huán)境中分布廣泛，且對水生及陸生無脊椎動物（如底棲動物、蜉蝣稚蟲、甲殼蟲和蜜蜂等）具有致死作用。

吡蟲啉殘留的分析檢測方法較多，主要有液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質譜法，但其代謝物的檢測方法較少。研究了通過直接進樣，用超高效液相色譜一串聯(lián)質譜快速測定水樣中吡蟲啉及其5種代謝物。

1實驗部分

1.1儀器與試劑

Waters Acquity H-Class超高效液相色譜儀，xevo TQD三重四級桿串聯(lián)質譜儀，配電噴霧離子源。

甲醇、乙腈、甲酸均為色譜純，所有實驗用水均為超純水;吡蟲啉胍、吡蟲啉脲、吡蟲啉、烯式吡蟲啉、5-羥基吡蟲啉、6-氯煙酸標準品均購自農業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所。

1.2標準溶液

分別移取濃度為100Ng/ml標準溶液1ml，用乙腈在100ml棕色容量瓶中定容至刻度，得1.0Ng/ml標準儲備液。標準儲備液用乙腈水（1：1）稀釋成濃度為1 00 gg/l中間使用溶液混標;分別吸取0.20、1.00、2.00、5.00，10.00 ml上述中間使用溶液于10ml容量瓶中，用乙腈水（1：1）定容至刻度。此系列標準溶液濃度為2.0ml、10.0ml、20.0m1、50.0ml、100.0μg/L，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3樣品采集與處理

試驗用樣品為環(huán)境水樣，用干凈的100ml棕色玻璃瓶采集，4℃冷藏保存，72h內分析。樣品用一次性注射器抽取水樣，用0.22μm PVDF濾膜過濾，然后加入等體積的乙腈，裝入進樣瓶中直接分析。

1.4超高效液相色譜分析條件

色譜柱為AcquityUPLC RPl8（2.1mnlxl50 mm，1.7m）;柱溫為350c，流動相為乙腈（A）和0.1%甲酸水（B），進樣量為5，流動相梯度洗脫程序見表1。

1.5串聯(lián)質譜分析條件

離子源為電噴霧電離源（ESI）;毛細管電壓3.2 kV;離子源溫度120℃：脫溶劑氣溫度3200c;脫溶劑氣流量900 L/h：錐孔氣流量50 L/h：采用多反應離子監(jiān)測模式（HRH），吡蟲啉及其5種代謝物的多反應監(jiān)測（HRH）條件見圖1、表2。

1.6線性關系及檢出限

在上述色譜條件下，對不同濃度標準溶液分別進樣，得到響應值，以響應值為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線，吡蟲啉及其5種代謝物在2～100μg/L范圍內線性關系良好，相關系數(shù)（r）均大于0.999，其線性方程、相關系數(shù)見表3。

按照HJ 168-2020要求，并考慮儀器靈敏度，重復7次空白試驗，將測定結果換算為樣品中的含量，計算7次平行測定的標準偏差S，按公式MDL=3.143×S計算方法檢出限（表3）。

1.7精密度與準確度

用蒸餾水按照以上檢測方法進行加標回收試驗，添加3個不同水平的混合標樣，每個添加濃度重復7次，計算添加回收率以及測定結果的相對標準偏差（表4）。精密度與準確度試驗顯示采用該方法測定平均回收率在70.0%～100%，相對標準偏差為2.6%～8.0%，符合殘留分析的要求。

2結論

建立了超高效液相色譜一串聯(lián)質譜法測定水樣中吡蟲啉及其5種代謝物的多殘留檢測方法，該方法簡便、快速，結果準確、可靠，具有良好的靈敏度和理想的精密度，具有顯著的實用價值。經精密度試驗和方法驗證試驗，證明該方法完全滿足殘留檢測的要求，適合于環(huán)境水樣中吡蟲啉及其代謝物殘留的同時檢測。