白藜蘆醇對(duì)頭頸部腫瘤防治的研究進(jìn)展

陳 鑫，畢 姍，綜述 李國(guó)萍 審校

（1） 鳳慶縣人民醫(yī)院外科，云南鳳慶 675900；2） 昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院頭頸外科，云南昆明 650118）

白藜蘆醇（3，5，4′-三羥基二苯乙烯） 是一種天然多酚化合物，是由植物在遭受損害等應(yīng)激狀態(tài)下產(chǎn)生，存在于葡萄、漿果、花生以及由它們衍生的食品中[1-2]。1997 年有研究首次發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇具有在不同階段抑制腫瘤的作用[3]，近年來(lái)，有不少研究證實(shí)了白藜蘆醇能直接抑制癌細(xì)胞的增殖和活性，并且通過(guò)線粒體途徑、Caspase 依賴或非依賴途徑等介導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[4-6]，白藜蘆醇還可通過(guò)調(diào)控表觀遺傳學(xué)、抑制NF-κB 信號(hào)通路、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial mesenchymal transition，EMT） 等途徑抑制癌細(xì)胞的遷移[7-9]，許多報(bào)道表明白藜蘆醇在不同類型的癌癥中發(fā)揮抗癌作用。此外，體內(nèi)高劑量的白藜蘆醇在血液學(xué)、生化學(xué)和器官組織病理學(xué)中的并未顯示任何改變[10]。因此，白藜蘆醇有望成為臨床上預(yù)防和治療癌癥的有效藥物。

頭頸部腫瘤是常見(jiàn)的惡性腫瘤，約占所有腫瘤發(fā)生率的5%。常見(jiàn)的頭頸部惡性腫瘤包括鼻咽癌、甲狀腺癌、口腔癌、下咽癌、喉癌等，目前主要的治療方法有手術(shù)、放療和化療。盡管有這些治療選擇，但晚期患者兩年內(nèi)的局部復(fù)發(fā)率達(dá)15%～50%[11]。近年來(lái)，學(xué)者們廣泛研究了白藜蘆醇對(duì)頭頸部腫瘤的防治作用及其可能機(jī)制，本文將對(duì)此作一綜述。

1 白藜蘆醇與鼻咽癌

鼻咽癌是頭頸部最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，具有極高的死亡率，70%以上的患者初次診斷時(shí)已發(fā)展為中晚期，5 a 生存率非常低[12]。目前白藜蘆醇對(duì)鼻咽癌的抗增殖和促凋亡作用在國(guó)內(nèi)外已有一定的研究。

研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇作用于人類鼻咽癌細(xì)胞，可使細(xì)胞周期阻滯在S 期或G2/M期，抑制癌細(xì)胞增殖；同時(shí)還能下調(diào)Bcl-2 和HIF-1a 蛋白，并上調(diào)Caspase-3 蛋白的表達(dá)，通過(guò)干擾Akt/p70S6K 信號(hào)通路誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡。已有研究證明白藜蘆醇可以誘導(dǎo)癌細(xì)胞的自噬和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的凋亡[13-14]，Chow等[15]研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的鼻咽癌細(xì)胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、自噬、caspase4 和caspase12 的激活有關(guān)。在c66-1細(xì)胞系中，白藜蘆醇可以通過(guò)激活A(yù)MPK 發(fā)揮其對(duì)鼻咽癌的抗增殖和促凋亡作用，且呈劑量依賴性[16]。此外，學(xué)者們證實(shí)了白藜蘆醇可能通過(guò)抑制mTOR 相關(guān)信號(hào)通路以誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，促進(jìn)CNE-2 細(xì)胞的凋亡[17]。腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cell，CSC） 是惡性細(xì)胞的一部分，具有很強(qiáng)的致瘤能力，可能與鼻咽癌細(xì)胞的復(fù)發(fā)和耐藥性有關(guān)，體內(nèi)外研究均證明白藜蘆醇通過(guò)抑制線粒體COX-2/p-Drp1Ser616 途徑降低鼻咽癌細(xì)胞干性，從此增強(qiáng)了鼻咽癌細(xì)胞對(duì)化療藥物5-氟尿嘧啶的敏感性，線粒體COX-2 或能成為白藜蘆醇治療鼻咽癌的一個(gè)新靶點(diǎn)[18]。E2F1 是一種能在細(xì)胞G0/G1期發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的蛋白質(zhì)[19]，TAN 等[20]探討白藜蘆醇增強(qiáng)鼻咽癌細(xì)胞的放射敏感性時(shí)發(fā)現(xiàn)，在體內(nèi)，經(jīng)50 mg/(kg·d)白藜蘆醇和4Gy 照射處理后的腫瘤體積和重量明顯降低，抑制了腫瘤的生長(zhǎng)；同時(shí)，經(jīng)白藜蘆醇處理的CNE-1 細(xì)胞檢測(cè)出E2F1 蛋白及其下游的p-AKT 的表達(dá)下調(diào)，提示白藜蘆醇通過(guò)下調(diào)E2F1，抑制p-AKT 來(lái)增加鼻咽癌細(xì)胞的放射敏感性。

2 白藜蘆醇與甲狀腺癌

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)和頭頸部腫瘤中最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率在許多國(guó)家呈穩(wěn)步上升的趨勢(shì)[21]。目前臨床上治療甲狀腺癌的方法包括手術(shù)、放療和化療，但是對(duì)于甲狀腺未分化癌仍然缺乏有效的治療方法，白藜蘆醇作為一種可能治療甲狀腺癌的新型藥物受到了學(xué)者們的廣泛關(guān)注。

Jalal 等[22]用人甲狀腺癌細(xì)胞和人非惡性成纖維細(xì)胞（HFFF2） 進(jìn)行131I 和白藜蘆醇聯(lián)合治療，結(jié)果提示白藜蘆醇促進(jìn)了131I 誘導(dǎo)的甲狀腺癌細(xì)胞死亡，而對(duì)正常細(xì)胞表現(xiàn)出抗131I 毒性的保護(hù)作用，表明白藜蘆醇不僅能加強(qiáng)癌細(xì)胞對(duì)131I 的敏感性，還能在碘療法中改善細(xì)胞毒性。已有研究證明了維A 酸（RA） 作為一種分化誘導(dǎo)劑，能增強(qiáng)甲狀腺癌的放射性碘攝取和放射敏感性[23]，近期的研究顯示用白藜蘆醇和RA 聯(lián)合處理THJ-11T細(xì)胞，可以通過(guò)抑制過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-β/δ（PPAR-β/δ），上調(diào)細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2（Crabp 2） 和維甲酸受體β（RAR-β） 的表達(dá)，提高RA 的敏感性[24]，因此，白藜蘆醇在RA 治療ATC 過(guò)程中具有逆轉(zhuǎn)RA 抗性的潛在功效。甲狀腺癌的侵襲性和耐藥性受到了腫瘤干細(xì)胞的影響，有研究發(fā)現(xiàn)甲狀腺未分化癌（anaplastic thyroid carcinoma，ATC） 比甲狀腺分化癌具有更多的腫瘤干細(xì)胞，這就解釋了ATC 更具侵襲性和耐藥性的行為，該實(shí)驗(yàn)將白藜蘆醇和丙戊酸聯(lián)合作用于來(lái)自甲狀腺未分化癌的克隆球狀CSC 系，可誘導(dǎo)CSC 分化，增強(qiáng)甲狀腺分化標(biāo)志物的表達(dá)，降低細(xì)胞增殖和侵襲能力，促進(jìn)甲狀腺干細(xì)胞的凋亡[25]，這為ATC 的治療提供了新的方向。由于活性氧（reactive oxygen species，ROS） 增加引起的氧化損傷是抗癌藥物發(fā)揮作用的機(jī)制之一[26]，Xu 等[27]證實(shí)了白藜蘆醇可能通過(guò)激活ROS-線粒體信號(hào)通路來(lái)增加THJ-16T 細(xì)胞中ROS 的產(chǎn)生和氧化相關(guān)的細(xì)胞損傷，促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡。此外，在致癌物誘導(dǎo)的大鼠甲狀腺癌模型中，胃內(nèi)和腹膜內(nèi)注射白藜蘆醇通過(guò)抑制DMD 和NF-κB/p65 介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，顯著降低了甲狀腺癌相關(guān)病變的頻率和嚴(yán)重程度，例如增生和腺瘤[28]。

3 白藜蘆醇與口腔癌

口腔癌是世界上第六常見(jiàn)的腫瘤[29]。目前對(duì)口腔癌的治療除了手術(shù)和放化療外，還發(fā)展了一系列如分子靶向治療、生物治療等新型治療方法，然而，口腔癌患者的五年生存率仍然只有50%[30]。因此，迫切需要一種新的藥物來(lái)改善口腔癌的治療現(xiàn)狀。

Shrotriya 等[31]研究發(fā)現(xiàn)葡萄籽提取物和白藜蘆醇可以通過(guò)調(diào)節(jié)AMPK 活化，抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和自噬，從而有效的預(yù)防4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO） 誘導(dǎo)口腔腫瘤的發(fā)生。有研究探討了白藜蘆醇抑制SCC-VII，SCC-25，YD-38 細(xì)胞增殖的機(jī)制為誘導(dǎo)其細(xì)胞周期停滯在G2/M 期，同時(shí)增強(qiáng)口腔癌細(xì)胞中磷酸化cdc2（Tyr15），細(xì)胞周期蛋白A2 和細(xì)胞周期蛋白B1 的表達(dá)[32]。Kim Seong-Eon 等[9]的研究顯示白藜蘆醇作用于口腔癌細(xì)胞，下調(diào)MMP，激活Bax 和Bak，抑制Bcl-2 和Bcl-XL，并從線粒體中釋放細(xì)胞色素c，同時(shí)還能激活Caspase ICAD 和PARP，由此推斷白藜蘆醇通過(guò)線粒體途徑和Caspase 途徑誘導(dǎo)口腔癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。此外，Hayashi 等[33]首次發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇通過(guò)促進(jìn)triml 2 的表達(dá)，使p21cip 1的表達(dá)上調(diào)，從而將OSCC 細(xì)胞周期阻滯在G1/S期，抑制癌細(xì)胞的增殖。

Lin 等[34]證實(shí)了白藜蘆醇通過(guò)降低MMP9 的活性、分泌、轉(zhuǎn)錄和翻譯水平來(lái)抑制佛波醇-12-十四烷酰-13-乙酸酯（TPA） 誘導(dǎo)的口腔癌SCC-9細(xì)胞的遷移。Kim 等[9]的研究也顯示了白藜蘆醇通過(guò)抑制EMT 誘導(dǎo)的Snail 轉(zhuǎn)錄因子來(lái)抑制CAL27細(xì)胞的侵襲和遷移。此外，有研究提示白藜蘆醇的甲基化衍生物水合物PSH 通過(guò)下調(diào)p38/ERK 1/2通路抑制MMP-2 酶活性，抑制口腔癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力[35]。由此可見(jiàn)，白藜蘆醇是一種很有前景的預(yù)防口腔癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的藥物。

4 白藜蘆醇與下咽癌

下咽癌占頭頸癌總發(fā)生率的3%～7%，盡管目前治療下咽癌的方法包括手術(shù)和化療都取得了進(jìn)步，但它的預(yù)后仍然較差[36]。目前關(guān)于白藜蘆醇在下咽癌中的研究并不多，其作用機(jī)制也并不是非常明確。

權(quán)芳等[37]著眼于通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證白藜蘆醇對(duì)人下咽鱗狀細(xì)胞癌（hypopharyngeal squamous cell carcinoma，HSCC） 細(xì)胞株FADU 的放射增敏作用，將FADU 移植瘤裸鼠進(jìn)行放射和白藜蘆醇治療，發(fā)現(xiàn)該實(shí)驗(yàn)組瘤塊的平均體積重量低于對(duì)照組、單純放射組和單純白藜蘆醇組，提示白藜蘆醇在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對(duì)FADU 有放療增敏作用，再將移植瘤進(jìn)行免疫組化染色，結(jié)果提示白藜蘆醇可以降低移植瘤微血管密度，抑制放療后腫瘤組織的微血管形成。權(quán)芳等[38]進(jìn)一步研究了白藜蘆醇對(duì)FADU 的體外放療增敏作用，克隆形成實(shí)驗(yàn)提示白藜聲醇聯(lián)合照射組FADU 細(xì)胞的凋亡率最高，同時(shí)，流式細(xì)胞術(shù)表明白藜蘆醇能誘導(dǎo)FADU 細(xì)胞的G2/M期阻滯促進(jìn)凋亡。綜上所述，白藜蘆醇可能通過(guò)作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞、改變細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞凋亡，提高FADU 細(xì)胞對(duì)放射線的敏感性。

5 小結(jié)

總之，已經(jīng)有大量研究證實(shí)了白藜蘆醇對(duì)頭頸部癌細(xì)胞具有抗增殖和促凋亡作用，并能增強(qiáng)其他放化療藥物的抗癌作用，此外，現(xiàn)亦有許多研究表明白藜蘆醇能通過(guò)不同機(jī)制抑制癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。YANG 等[39]發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇通過(guò)抑制MALAT 1介導(dǎo)的EMT 抑制人胃癌細(xì)胞的侵襲和遷移。Xiao等[40]應(yīng)用白藜蘆醇和一種特異性失去細(xì)胞遷移抑制作用的白藜蘆醇類似物作用于小鼠黑色素瘤細(xì)胞，提示白藜蘆醇通過(guò)表觀基因下調(diào)FAK 的表達(dá)來(lái)抑制癌細(xì)胞遷移。He 等[41]研究證實(shí)白藜蘆醇通過(guò)抑制A 549 細(xì)胞誘導(dǎo)的血小板分泌和血管生成反應(yīng)，抑制肺癌的轉(zhuǎn)移。Constanze 等[42]發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇通過(guò)上調(diào)Sirt 1、抑制NF-κb 介導(dǎo)的炎癥通路和抑制FAK 活性而抑制結(jié)直腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。另外，大量體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)揭示了白藜蘆醇通過(guò)TGF-β、TGF-β/Smads、Wnt、VEGF 和Hedgehog 等信號(hào)通路抑制多種腫瘤的轉(zhuǎn)移[43]。然而，白藜蘆醇能否降低頭頸部腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移能力，目前國(guó)內(nèi)外研究較少，因此，需要借助更多的方法進(jìn)行探討白藜蘆醇對(duì)頭頸部腫瘤轉(zhuǎn)移能力的影響及其具體機(jī)制，為頭頸部腫瘤的治療提供新方向。