卵巢漿液性腫瘤組織中ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)水平及其臨床意義

陳粉合 鄧 祎 王恩棟 王 琰

卵巢漿液性腫瘤能夠?qū)е禄颊呱骖A(yù)后的顯著惡化，在臨床上的長期隨訪過程中，可以發(fā)現(xiàn)卵巢漿液性腫瘤的總體發(fā)病率占據(jù)了所有卵巢惡性腫瘤的15%以上[1]。卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生，不僅能夠?qū)е陆诼殉材[瘤患者生活質(zhì)量的下降，同時還能夠增加遠(yuǎn)期患者致殘及多器官功能衰竭的風(fēng)險[2]。可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞腫瘤相關(guān)蛋白，能夠在卵巢上皮細(xì)胞的異常病變過程中發(fā)揮作用。胚胎致死性異常視覺基因1(ELAV1)能夠通過影響到轉(zhuǎn)錄上游啟動子的激活程度，加劇上皮細(xì)胞的早期異常分裂的風(fēng)險，影響到卵巢腫瘤的發(fā)生[3]；人宮頸癌基因(HCCR)能夠通過整合病毒顆粒，降低對于癌基因的錯配修復(fù)能力，最終提高惡性腫瘤細(xì)胞的發(fā)生風(fēng)險[4]；微小染色體維持蛋白(MCM)能夠在染色體特性的維持方面發(fā)揮作用，其對于染色體穩(wěn)定性的修飾作用，能夠提高腫瘤細(xì)胞染色體異常分離的可能[5]。為了揭示ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生關(guān)系，從而為臨床上卵巢腫瘤的發(fā)生提供理論參考，本次研究選取2016年3月至2017年8月在我院治療的卵巢漿液性腫瘤患者為研究對象，探討了ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)情況，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月至2017年8月在我院治療的卵巢漿液性腫瘤患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①成年者；②經(jīng)臨床表現(xiàn)和病理檢查確診為卵巢漿液性腫瘤；③無其他生殖系統(tǒng)疾病；排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完全者；②無其他嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)共納入患者150例，年齡35～65歲，平均(45.35±4.97)歲；其中，良性腫瘤組100例，年齡30～62歲，平均(45.31±5.03)歲；惡性腫瘤組50例，年齡35～65歲，平均(45.37±4.67)歲。兩組的一般資料方面無明顯差別，研究經(jīng)倫理委員會評審?fù)ㄟ^。

1.2 研究方法

石蠟切片采用二甲苯進(jìn)行脫臘至水，5%的雙氧水常溫在孵育10 min，采用磷酸鹽緩沖液孵育5 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，5%的山羊血清抗體封閉10 min，不沖洗，滴加一抗(購自abcum公司 批號：20119304濃度：1∶500)，4 ℃冰箱孵育過夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加生物素標(biāo)記好的二抗(購自北京康泰生物 批號：20104856 濃度：1∶1000)，37 ℃孵育30 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加第二代辣根酶標(biāo)記的工作液體，37 ℃孵育10 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，顯色之后采用酒精脫水、二甲苯透明、樹膠封片，鏡下觀察。

1.3 評價指標(biāo)

觀察兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)情況，比較不同臨床病理類型卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)的差異，分析影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)的因素。

1.4 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)采用Excel錄入后，應(yīng)用SPSS 11.5軟件分析。應(yīng)用卡方檢驗、回歸分析法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4水平的比較

卵巢漿液性惡性腫瘤組患者的ELAV1、HCCR、MCM4陽性表達(dá)率分別為60.00%、70.00%、80.00%，高于對照組的12.00%、8.00%、5.00%(P<0.001)，見表1。

表1 兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4陽性表達(dá)的比較/例

2.2 不同臨床病理特征卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的比較

臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期、組織學(xué)分級為中、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白陽性表達(dá)水平較高，不同年齡的卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4水平無明顯差別，見表2。

2.3 影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

將單因素分析有意義的因素作為自變量，將ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平作為因變量進(jìn)行多因素分析，結(jié)果顯示，組織學(xué)分級是影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素。見表3。

3 討論

多種多樣病理性因素導(dǎo)致的卵巢生發(fā)上皮細(xì)胞的異常病變，能夠影響到癌基因的突變、提高癌細(xì)胞內(nèi)腫瘤蛋白的激活程度。在遺傳因素或者后天卵巢性激素分泌紊亂的過程中，癌細(xì)胞的內(nèi)外環(huán)境的改變，均能夠提高卵巢漿液性腫瘤的總體發(fā)病率[6]。臨床上的觀察發(fā)現(xiàn)，卵巢漿液性腫瘤患者的3年或者5年生存率明顯的下降，患者的總體無瘤生存時間可顯著的縮短[7]。通過對于卵巢漿液性腫瘤患者臨床病理特征的評估，可以為臨床上卵巢腫瘤相關(guān)患者的診療提供參考依據(jù)。不同的腫瘤分子相關(guān)蛋白，均能夠在卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮作用。雖然現(xiàn)階段臨床上有多數(shù)研究者探討了腫瘤蛋白的波動在卵巢漿液性腫瘤發(fā)生過程中的價值，但多數(shù)研究僅僅限于對于CA125、CA199或者CEA等指標(biāo)的探討。相關(guān)研究缺乏新穎性和創(chuàng)新點。同時通過對于CA125、CA199或者CEA等指標(biāo)的研究，難以為臨床上卵巢漿液性腫瘤的臨床病理特征的評估提供可靠的依據(jù)[8]。而本次研究的創(chuàng)新性在于揭露了ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤病理特征的關(guān)系。最初認(rèn)為ELAV1主要存在于視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞中，近年來相關(guān)基礎(chǔ)方面的研究證實，在生發(fā)上皮或者間質(zhì)組織成分中，ELAV1的表達(dá)濃度同樣可以明顯上升。上升的ELAV1能夠通過影響到轉(zhuǎn)錄開放閱讀區(qū)的激活程度，加劇癌細(xì)胞核DNA的異常分裂，最終影響到腫瘤的發(fā)生；HCCR是宮頸癌相關(guān)基因，在婦科惡性腫瘤患者中，HCCR的上升能夠影響到腫瘤細(xì)胞癌基因的擴(kuò)增活性，提高癌基因的單核苷酸擴(kuò)增效率[9]；MCM4是染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白，其對于染色體結(jié)構(gòu)的修飾作用，能夠影響到染色體的復(fù)制速度[10]。

表2 不同臨床病理特征卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4陽性表達(dá)的比較/例

表3 影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

可以發(fā)現(xiàn)的是，免疫組化結(jié)果中ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)陽性率水平明顯的高于卵巢良性組織，統(tǒng)計學(xué)差異顯著，表明ELAV1、HCCR、MCM4的高表達(dá)可能影響到了卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生。ELAV1、HCCR、MCM4在漿液性來源惡性腫瘤患者中的高表達(dá)，主要由于漿液性腫瘤來源細(xì)胞，其癌細(xì)胞內(nèi)不同腫瘤相關(guān)信號通路的激活增加了腫瘤蛋白的合成和釋放有關(guān)[11-12]。而ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)上升，又能夠通過正反饋調(diào)控作用，提高腫瘤細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)復(fù)制組裝的效率，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤過程。有部分研究者揭露了MCM4的表達(dá)與婦科惡性腫瘤的關(guān)系，認(rèn)為在婦科惡性腫瘤患者中MCM4蛋白的表達(dá)陽性率水平可隨著患者病情的加重而顯著上升，同時婦科腫瘤患者的病情進(jìn)展率越高，MCM4蛋白的表達(dá)濃度越高[13]。在研究ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤患者臨床特征的關(guān)系中，發(fā)現(xiàn)在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期、組織學(xué)分級為中、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢漿液性惡性腫瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白陽性表達(dá)水平較高，高于相應(yīng)的臨床病理特征較輕的患者，統(tǒng)計學(xué)差異顯著，提示ELAV1、HCCR、MCM4的高表達(dá)對于卵巢漿液性腫瘤具有顯著的標(biāo)志作用。臨床上通過檢測ELAV1、HCCR、MCM4，可能在協(xié)助卵巢腫瘤臨床病情的判斷方面發(fā)揮一定的作用。ELAV1、HCCR、MCM4上升對于卵巢漿液性腫瘤病理特征的具體影響機(jī)制，主要由于癌基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的異常、癌細(xì)胞內(nèi)第二信使的激活及信號通路蛋白的異常波動等因素有關(guān)[14-15]。危險因素分析也可見，組織學(xué)分級是影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素，進(jìn)一步表明了ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)與卵巢腫瘤患者的病情關(guān)系。

綜上所述，在卵巢漿液性腫瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)濃度可明顯上升，同時ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)可能影響到了卵巢漿液性腫瘤的臨床分期、組織學(xué)分級等病理特征。