仔豬PRRSV、PEDV 和豬鏈球菌混合感染的診斷與治療

曾獻(xiàn)良

（湖南省汨羅市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局畜牧水產(chǎn)服務(wù)中心，湖南汨羅414401）

豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）又稱為豬藍(lán)耳病，其由豬繁殖與呼吸綜合病毒（PRRSV）感染所引起，不同發(fā)育階段豬群均可感染該病，但妊娠母豬和仔豬對該病最易感，其中妊娠母豬感染該病后可出現(xiàn)呼吸困難、精神沉郁等，妊娠后期則出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)或死胎等，且部分新生仔豬呼吸困難、運(yùn)動失調(diào)等，并伴隨高死亡率[1]。豬流行性腹瀉病毒（PEDV）是導(dǎo)致仔豬腹瀉的主要病原之一，發(fā)病仔豬臨床癥狀以水樣腹瀉、嘔吐等為特點(diǎn)，近年來PEDV 變異株在我國各地區(qū)廣泛流行，導(dǎo)致發(fā)病哺乳仔豬出現(xiàn)高死亡率（80%～100%），造成經(jīng)濟(jì)損失巨大[2]。豬鏈球菌在豬場中十分常見，其感染豬群后可導(dǎo)致患畜出現(xiàn)不同臨床癥狀，如腦炎、關(guān)節(jié)腫脹和敗血癥等，嚴(yán)重時可導(dǎo)致其死亡。該病原菌具有多種血清型，其中鏈球菌2 型在部分豬場為優(yōu)勢菌株，且可感染人，對人畜健康造成巨大的威脅[3-4]。

2019 年10 月初，湖南汨羅市某規(guī)?；i場2周齡內(nèi)仔豬發(fā)生疫情，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為水樣腹瀉、嘔吐、呼吸困難等，仔豬群中發(fā)病率高達(dá)50%，且伴隨高病死率。10 月中旬，受養(yǎng)殖戶邀請，筆者前往該場進(jìn)行臨床與實(shí)驗(yàn)室診斷。

1 豬場發(fā)病情況

湖南汨羅市某規(guī)?；i場飼養(yǎng)繁殖母豬約500 頭，2019 年10 月初，該場某欄舍新生仔豬發(fā)生疫情，發(fā)病初期僅少量仔豬出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、呼吸困難、咳嗽等癥狀，養(yǎng)殖戶對發(fā)病仔豬肌肉注射氨基比林，但仔豬發(fā)病情況仍然沒有改善，且大量發(fā)病仔豬死亡。據(jù)了解，該場僅對豬群免疫接種過豬瘟、口蹄疫和偽狂犬病疫苗。

2 病理變化

對2 頭發(fā)病嚴(yán)重仔豬進(jìn)行剖檢，發(fā)現(xiàn)其腹股溝和頜下淋巴結(jié)腫大，且切面有絲狀出血；肺臟、心臟被膜表面有纖維性滲出，且肺水腫明顯，肺臟氣管中有泡沫狀液體；脾臟腫大，且邊緣有壞死灶；腎臟表面有大量的出血點(diǎn)；小腸腸壁變薄，且腸系膜淋巴結(jié)腫大。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌分離及鑒定

無菌采集病豬病變組織（淋巴結(jié)、肺臟、腎臟、脾臟和腸道），低溫保存送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。用無菌手術(shù)刀切取少量病變組織進(jìn)行涂片染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，可見短鏈狀或成對的革蘭氏陽性球菌。其后以滅菌接種環(huán)蘸取少量組織液接種于鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面，37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面可出現(xiàn)大小不一、濕潤光滑的半透明菌落，結(jié)合染色鏡檢結(jié)果，可判定該菌株為豬鏈球菌。

3.2 藥物敏感試驗(yàn)

用滅菌槍頭挑取單一菌落打進(jìn)裝有液體培養(yǎng)基的玻璃試管中，在適合條件下進(jìn)行擴(kuò)菌。其后將獲得的少量菌液進(jìn)行稀釋，涂布于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基表面，待液面稍干燥后將含有不同抗生素的紙片貼在培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng)24h，通過觀察抑菌環(huán)大小判定該菌株對不同抗生素的耐藥情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該菌株對頭孢噻呋鈉和氧氟沙星高度敏感；對恩諾沙星、青霉素、林可霉素、鏈霉素、阿莫西林等耐藥。

3.3 病毒檢測

分別將病豬的淋巴結(jié)、肺臟、脾臟、腎臟和腸道組織進(jìn)行混合，將組織切碎后與滅菌PBS 溶液（1∶4）按比例進(jìn)行添加，并勻漿研磨，將制備得到的懸液反復(fù)凍融3 次，其后高速離心獲得上清液，取200 μL 上清液用組織DNA/RNA 提取試劑盒提取病原基因組，并將RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA，采用PCR或RT-PCR 法對樣品中是否存在PRRSV、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬圓環(huán)病毒（PCV2）、PEDV、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和豬德塔冠狀病毒（PDCoV）進(jìn)行檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在組織樣品中檢測出PEDV 和PRRSV 核酸陽性，未檢出其它病原核酸。

3.4 診斷結(jié)果

根據(jù)發(fā)病仔豬臨床癥狀、病理變化，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，我們最終判定該場仔豬發(fā)病原因主要是PRRSV、PEDV 和豬鏈球菌混合感染。

4 防治措施

根據(jù)病原診斷結(jié)果，我們制定了以下防治措施：（1）對欄舍、用具和交通工具進(jìn)行徹底清洗，其后將過氧乙酸進(jìn)行稀釋（1∶500）后帶豬消毒，每日2 次；（2）在過道處鋪撒生石灰，保持豬舍干燥，并提高仔豬豬舍溫度；（3）對糞污和病死豬進(jìn)行集中無害化處理，并嚴(yán)禁不同欄舍工作人員穿梭等；（4）對全場母豬群緊急免疫接種PEDV/TGEV 二聯(lián)滅活疫苗；（5）在母豬飼料中添加適量比例黃芪多糖粉末（400～500 g/t），連續(xù)飼喂2 周；（6）在發(fā)病仔豬飲水中添加適量比例黃芪多糖、多維、葡萄糖和氯化鈉，以補(bǔ)充電解質(zhì)，恢復(fù)體液平衡；（7）在全場豬群飼料中添加頭孢噻呋鈉粉劑（400g/t），連續(xù)用藥1 周；（8）對假定健康豬群緊急免疫接種PRRSV 滅活疫苗，并定期進(jìn)行抗體水平監(jiān)測。

實(shí)施以上防治措施3 周后電話回訪，該場負(fù)責(zé)人表示豬群發(fā)病情況得到有效控制，生產(chǎn)成績有較大的提高。

5 討論

在生豬養(yǎng)殖過程中，仔豬出現(xiàn)腹瀉、呼吸困難和體溫升高等臨床癥狀較為常見，但其致病因較為復(fù)雜，其中PCV2、PRV、PEDV、TGEV 等病原均可導(dǎo)致仔豬腹瀉并死亡；而PRRSV、PCV2、副豬嗜血桿菌和鏈球菌等均可使仔豬出現(xiàn)呼吸困難、體溫升高等，且在臨床上不易區(qū)分。此外，多種病原混合感染使得疫病臨床診斷更加困難。本文通過對2 頭發(fā)病仔豬進(jìn)行剖檢，觀察病理變化，同時采集病變組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，結(jié)果表明，該場仔豬發(fā)病是由PEDV、PRRSV 和豬鏈球菌混合感染所致，根據(jù)診斷結(jié)果進(jìn)行具有針對性的治療與防控，最終使該場疫情得到有效的控制，減少了養(yǎng)殖企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。