仔豬副豬嗜血桿菌病的診斷和防治

長葛市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 李文煥

近幾年，養(yǎng)殖戶受副豬嗜血桿菌病的影響較大，養(yǎng)豬效益因該病的影響急劇下滑。副豬嗜血桿菌病又稱為多發(fā)性纖維素性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎，是一種傳染性較強(qiáng)的疾病，診斷難度較大，如果治療不及時(shí)，會給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。筆者現(xiàn)將一豬場仔豬感染副豬嗜血桿菌病的診斷與防治情況介紹如下，以供參考。

一、流行病學(xué)調(diào)查

長葛市某豬場母豬存欄量120 頭，月平均產(chǎn)仔20窩。自2019 年的3 月中旬開始，仔豬出現(xiàn)畏寒，扎堆而臥，被毛粗亂，逐漸消瘦，7 天左右死亡。2019 年年3—4 月，產(chǎn)房哺乳仔豬死亡率達(dá)30%，經(jīng)觀察仔豬大多在15 日齡開始發(fā)病，初懷疑為副豬嗜血桿菌病或鏈球菌病，采用氟苯尼考、氨芐青霉素試探性治療，效果不佳。

二、臨床表現(xiàn)

精神萎頓，食欲不振，厭食，畏寒，扎堆而臥，被毛粗亂，逐漸消瘦；個(gè)別豬腿關(guān)節(jié)腫脹，有的呼吸急促，呈腹式呼吸，死亡前2～3 d 出現(xiàn)皮膚及黏膜發(fā)紺。

三、病理變化

剖檢3 頭豬，出現(xiàn)嚴(yán)重的心包炎、肺炎、腹膜炎及輕度關(guān)節(jié)炎。腹腔積滿淡紅色渾濁腹水，豆腐渣樣淡黃色的纖維素滲出物附著于腸黏膜和肝脾表面。肺有間質(zhì)水腫，出血，淤血，與胸膜發(fā)生粘連。心包積液，心肌表面有大量纖維素滲出，心包膜增厚。腹腔積液，肝脾腫大，肝臟邊緣出血嚴(yán)重，脾臟有的呈出血邊緣隆起米粒大的血泡，有的脾邊緣梗死。腎乳頭出血嚴(yán)重，有的腎上有出血點(diǎn)。腹股溝淋巴結(jié)呈大理石狀，頜下淋巴結(jié)出血嚴(yán)重。腸系膜淋巴變化不明顯。喉管內(nèi)有大量黏液。后肢關(guān)節(jié)切開有膠凍樣物。初步診斷為副豬嗜血桿菌病，筆者采集了病豬的肝、腎、淋巴結(jié)、肺、心包液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

四、實(shí)驗(yàn)室診斷

（一）涂片鏡檢

無菌取病豬的肝、腎、淋巴結(jié)進(jìn)行涂片，革蘭氏染色，油鏡下觀察，可見到革蘭氏陰性的細(xì)小桿菌、球狀菌，桿狀菌極多，球狀菌較少，間有長而彎細(xì)狀菌體，符合副豬嗜血桿菌的菌落和細(xì)菌形態(tài)。

（二）細(xì)菌分離培養(yǎng)

1.無菌采集病豬的肺臟、心包液，分別接種于含NAD 的血瓊脂平板培養(yǎng)基、巧克力瓊脂平板培養(yǎng)基上37 ℃培養(yǎng)48 h，生長呈光滑、無色透明或灰白色半透明、露珠狀、扁平的小菌落，挑取菌落，涂片鏡檢，菌形與直接涂片一致。

2.將分離鈍化培養(yǎng)的可疑菌落，于綿羊鮮血瓊脂平板上水平畫線，再挑取金黃色葡萄球菌垂直劃線，37 ℃培養(yǎng)48 h，觀察到金黃色葡萄球菌線兩側(cè)有針尖大小、圓形、邊緣整齊的菌落生長，呈現(xiàn)出典型的“衛(wèi)星現(xiàn)象”并且不出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，證明此菌為依賴NAD生長的細(xì)菌。

（三）生化鑒定

細(xì)菌分離鈍化后分別接種于蔗糖發(fā)酵管、甘露醇發(fā)酵管、硫化氫微量發(fā)酵管，置于37 ℃培養(yǎng)24 h 后觀察。發(fā)酵蔗糖但不發(fā)酵甘露醇、硫化氫試驗(yàn)呈無色，即為陰性。生化鑒定符合副豬嗜血桿菌的特性。

硝酸鹽還原試驗(yàn)，把純菌接種到硝酸鹽培養(yǎng)基中，在37 ℃培養(yǎng)24 h，再加試劑甲（對氨基苯磺酸0.8 g+5 mol/L，醋酸100 mL）和試劑乙（α-奈胺0.5 g+5 mol/L，醋酸100 mL）各4 滴，在30 s 內(nèi)出現(xiàn)紅色即為陽性，符合副豬嗜血桿菌的特性。

（四）藥敏試驗(yàn)

1.將培養(yǎng)純化的菌種均勻涂布于含NAD 的巧克力培養(yǎng)基上，然后按常規(guī)紙片法，根據(jù)場主平時(shí)用藥習(xí)慣，選幾種不經(jīng)常用的藥進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。分別用了左旋氧氟沙星、恩諾沙星、頭孢噻呋鈉、克林霉素、硫酸慶大霉素、磺胺間甲氧嘧啶鈉）貼于平板上，37 ℃恒溫培養(yǎng)48 h，觀察抑菌圈大小。

2.判定標(biāo)準(zhǔn)。抑菌圈直徑＞15 mm 為高度敏感，抑菌圈直徑在10～15 mm 為中度敏感，抑菌圈直徑＜10 mm 為耐藥。

3.試驗(yàn)結(jié)果。頭孢噻呋鈉抑菌圈直徑為28 mm，左旋氧氟沙星、恩諾沙星抑菌圈直徑分別為21 mm、20 mm，克林霉素抑菌圈直徑為13 mm，硫酸慶大霉素、磺胺間甲氧嘧啶鈉抑菌圈直徑分別為9 mm、8 mm。從藥敏試驗(yàn)結(jié)果可以看出，分離菌對頭孢噻呋鈉、左旋氧氟沙星、恩諾沙星高度敏感，對克林霉素為中度敏感，對硫酸慶大霉素、磺胺間甲氧嘧啶鈉為耐藥。通過鏡檢及細(xì)菌分離培養(yǎng)對其做的生化鑒定，確診為副豬嗜血桿菌病，并告知場主藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

五、防治措施

（一）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

將病豬隔離在同一豬舍，徹底清理豬舍衛(wèi)生，以殺滅豬舍內(nèi)的病原菌。用2%的氫氧化鈉溶液噴灑地面和墻壁，2 h 后用清水沖洗干凈，用聚維酮碘消毒，每天兩次，連續(xù)消毒5 d。在飼養(yǎng)病豬過程中，要注意保溫，保證舍內(nèi)溫暖、干燥、通風(fēng)良好，并給足飼料和水分，保持豬群相對穩(wěn)定，減少應(yīng)激。

（二）免疫接種保護(hù)

未發(fā)病的豬群用副豬嗜血桿菌細(xì)胞苗進(jìn)行防疫，母豬產(chǎn)前40 d 首免，產(chǎn)前20 d 二免；仔豬全群健康豬群采用緊急免疫，15 天后二免，豬群比較健康。

（三）治療方法

用長效頭孢噻呋鈉油劑肌注，1 mL/頭，每天1 次，連用5 d，很快得到控制。豬場生產(chǎn)平穩(wěn)后，場主又通過疫苗防疫和藥物預(yù)防兩種方法進(jìn)行對比，具體辦法為：

1.疫苗防疫。按照疫苗廠家提供的免疫程序，仔豬15 日齡肌注副豬嗜血桿菌細(xì)胞苗1 次，30～35 日齡再加強(qiáng)免疫1 次，污染較輕的圈舍仔豬成活率可恢復(fù)到95%以上；污染較嚴(yán)重的圈舍效果有點(diǎn)差。對污染較嚴(yán)重的圈舍免疫程序進(jìn)行調(diào)整，仔豬10 日齡肌注副豬嗜血桿菌細(xì)胞苗1 次，25～30 日齡再加強(qiáng)免疫1 次，仔豬成活率恢復(fù)到95%以上。

2.藥物預(yù)防。仔豬3 日齡肌注長效頭孢噻呋鈉油劑0.2 mg/頭，公豬去勢時(shí)再注射1 次（1 mL/頭），仔豬成活率恢復(fù)到95%以上，兩種方法都能取得較好預(yù)防作用。從預(yù)防成本計(jì)算，用疫苗預(yù)防費(fèi)用偏高，最終場主用藥物預(yù)防，到秋冬季，副豬嗜血桿菌病沒有再給生產(chǎn)帶來麻煩。

六、小結(jié)

通過查閱近幾年河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心對長葛市無害化處理場送檢樣品的報(bào)告，從省疫控中心反饋結(jié)果得出副豬嗜血桿菌病致死率為2018 年占30%、2019 年占35%，由此可見副豬嗜血桿菌病在當(dāng)?shù)刎i場的入駐率較高。

長葛市實(shí)驗(yàn)室對這個(gè)問題研判結(jié)果表明，副豬嗜血桿菌病在秋冬季比較盛行，但也不是所有場只有在秋冬季才會發(fā)生，該細(xì)菌寄生在鼻腔等上呼吸道內(nèi)，屬于條件性細(xì)菌，可以受多種因素誘發(fā)?；钾i或帶菌豬主要通過空氣、直接接觸感染其他健康豬，其他傳播途徑如消化道等也可感染。只有較大的實(shí)驗(yàn)室在做實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，故一般養(yǎng)豬場不易及時(shí)得到正確診斷。從該病的發(fā)病情況分析，主要與豬場的豬體抵抗力、環(huán)境衛(wèi)生、飼養(yǎng)密度有極大關(guān)系，如果豬發(fā)生過藍(lán)耳病等，抵抗力下降時(shí)，副嗜血桿菌易乘虛而入。豬群密度大，過分擁擠，舍內(nèi)空氣混濁，氨氣味濃，轉(zhuǎn)群、混群或運(yùn)輸時(shí)多發(fā)。豬有呼吸道疾病，如支原體肺炎、豬流感、偽狂犬病和豬呼吸道冠狀病毒感染時(shí)，副嗜血桿菌的存在可加劇它們的病情，使病情復(fù)雜化，可能導(dǎo)致高發(fā)病率和高死亡率的全身性疾病。各年齡段豬均有發(fā)病死亡的病例，以5～8 周齡為甚。

七、建議

（一）平時(shí)搞好環(huán)境衛(wèi)生，勤打掃衛(wèi)生，勤清糞、勤消毒

尤其是中小型規(guī)模場飼養(yǎng)員少，容易出現(xiàn)竄舍飼養(yǎng)，最好一人一舍飼養(yǎng)，在不能保證一人一舍飼養(yǎng)的情況下，出舍后入舍前要進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

（二）做好飼養(yǎng)管理，合理安排轉(zhuǎn)群時(shí)間

補(bǔ)充飼料的各種營養(yǎng)成分，在轉(zhuǎn)群前后3 d 補(bǔ)充多維，減少應(yīng)激，最好冬天在中午、夏天在早上或傍晚轉(zhuǎn)群。

（三）根據(jù)各場實(shí)際情況，制定合理的免疫程序，嚴(yán)格按照免疫程序進(jìn)行防疫

避免因支原體肺炎、豬流感、偽狂犬病和豬呼吸道冠狀病毒等感染誘發(fā)副豬嗜血桿菌病。

（四）使用疫苗預(yù)防疾病

豬由于副豬嗜血桿菌血清型較多，規(guī)模大的場建議制作自家苗，中小型規(guī)模場用副豬嗜血桿菌多價(jià)滅活苗能取得較好的效果。種豬用副豬嗜血桿菌多價(jià)滅活苗免疫能有效保護(hù)小豬早期發(fā)病，降低復(fù)發(fā)的可能性。免疫的同時(shí)最好結(jié)合科學(xué)的藥物治療，能達(dá)到標(biāo)本兼治的功效。