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    一起羊布魯氏桿菌病的診斷與防治

    2020-12-16 10:44:31張海蘭
    中國畜禽種業(yè) 2020年1期
    關(guān)鍵詞:布魯胎衣氏桿菌

    張海蘭

    (伊犁職業(yè)技術(shù)學(xué)院 835000)

    布魯氏桿菌病是由布魯氏菌屬細(xì)菌引起的一種以發(fā)熱、流產(chǎn)為典型臨床特征的人畜共患傳染病。 伊犁河谷是布魯氏桿菌病的老疫區(qū),近些年來,布魯氏桿菌病的發(fā)病趨勢有所上升,嚴(yán)重影響本地區(qū)畜牧業(yè)的健康發(fā)展[1]。 該菌宿主廣泛,能感染牛、羊、豬、鹿、犬等多種動物[2]。 患布魯氏桿菌病家畜及其產(chǎn)品及污染物是人類布氏桿菌病的主要傳染源,其引發(fā)的傳染性疾病不僅造成畜牧業(yè)巨大的經(jīng)濟損失,也嚴(yán)重威脅廣大畜牧工作者和人民群眾的身體健康。

    1 案例

    伊犁地區(qū)某規(guī)?;驁鍪俏以盒F蠛献髌髽I(yè),現(xiàn)有存欄多胎母羊1200 多只,成年公羊80 只,年出欄育肥羊800 只以上,是本地區(qū)規(guī)模較大的羊場之一。 2019 年1~2 月期間,該場陸續(xù)有15 只母羊出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎、畸形胎,并伴有發(fā)熱、關(guān)節(jié)炎等癥狀。 駐場獸醫(yī)初步診斷是羊布魯氏桿菌病,報我院技術(shù)服務(wù)中心進(jìn)行進(jìn)一步診斷。

    2 臨床癥狀

    據(jù)駐場獸醫(yī)主訴,患病母羊多為妊娠3~4 個月,初期癥狀不明顯,表現(xiàn)精神不振,食欲減退,反芻減少。 2~3d 后病情加重,體溫高于正常1~2℃,陰唇出現(xiàn)潮紅和紅腫,從陰門出開始流出黃色黏稠液體,有的有血樣黏性分泌物。 正常分娩母羊出現(xiàn)胎衣不下、子宮炎癥狀。 母羊流產(chǎn)的胎兒多是死胎、弱胎、畸形胎。 流產(chǎn)母羊陰道不斷排除黏稠狀或化膿性分泌物,有惡臭味。 流產(chǎn)羔羊胎衣呈現(xiàn)黃色膠樣狀浸潤,部分胎衣上還覆蓋有纖維蛋白膿液,胎衣顯著增厚,并存在散狀出血點。 流產(chǎn)羔羊皮膚存在大量出血點和出血斑,皮下和肌肉組織存在漿液性浸潤,體表淋巴結(jié)腫大。

    3 實驗室診斷

    實驗室診斷防治指導(dǎo)手冊[2]。

    3.1 細(xì)菌學(xué)診斷

    用滅菌過的培養(yǎng)皿采集發(fā)生流產(chǎn)母羊的新鮮胎衣、流產(chǎn)羔羊的病變淋巴結(jié)組織等,粉碎,研磨,制成組織抹片,用改良石炭酸復(fù)紅液,按照1:10 比例稀釋,染色10min,然后用5%醋酸溶液脫色20s,再用1%美蘭染色劑對圖片進(jìn)行染色,5min后用清水洗凈,自然干燥,鏡鑒,可見大量被染成紅色的短小桿菌或球狀桿菌。

    3.2 血清學(xué)診斷

    3.2.1 血清樣品采集

    無菌采集流產(chǎn)母羊頸部靜脈血液2~4ml,室溫靜置2h。 一般情況下血清會自然析出,若析出效果不好或沒有析出,出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,可將血液置入離心管中,6000r/min,離心15min。

    3.2.2 琥紅平板凝集試驗

    在準(zhǔn)備好的滅菌玻璃板上用記號筆畫上數(shù)排方格,沒格大小約為2cm×2cm; 每個格內(nèi)加入商品化的琥紅平板凝集抗原30ul 和待檢血清30ul,兩者加入前先進(jìn)行充分搖勻; 用滅菌牙簽充分將兩者混勻; 3~5min 后觀察結(jié)果,出現(xiàn)凝集顆粒的判為陽性,反則為陰性。

    3.2.3 試管凝集試驗

    在琥紅平板凝集試驗結(jié)果的基礎(chǔ)上對陽性血清進(jìn)行試管凝集試驗復(fù)檢。

    (1) 血清稀釋: 每份血清準(zhǔn)備滅菌小試管4 支,第一管中加入生理鹽水960ul,其余各管加入生理鹽水500ul。 然后在第一支試管中加入備檢血清40ul,充分混勻后吸出500ul 血清稀釋液加入第二試管內(nèi),以此類推到最后一管,吸出500ul 血清稀釋液棄去。

    (2) 抗原加入: 將試管凝集抗原充分混勻后,使用0.9%生理鹽水做10 倍稀釋,然后每管加入500ul 稀釋抗原。 充分混勻后放入 37℃溫箱內(nèi),24h 后取出,在常溫下放置 1~2h 后,觀察結(jié)果。

    (3) 結(jié)果判定: 與配置好的標(biāo)準(zhǔn)比濁管進(jìn)行比對,血清抗體凝集效價在1:100 以上的判定為陽性結(jié)果,反則為陰性。

    4 結(jié)果

    通過臨床診斷和實驗室診斷結(jié)果表明,該場發(fā)病的15 只流產(chǎn)母羊中有11 只結(jié)果為陽性,確診是由布魯氏桿菌引起的母羊流產(chǎn),其余4 只母羊的流產(chǎn)原因有待進(jìn)一步查明。

    5 預(yù)防措施

    5.1 全群檢疫

    對該場所有羊只采血,采用琥紅平板凝集試驗進(jìn)行初檢,陽性者再采用試管凝集試驗復(fù)檢方法對全場羊只布魯氏桿菌病進(jìn)行篩查,凡是確診為陽性的,按照 《布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范》 規(guī)定及時進(jìn)行撲殺。 同時,按照 《病害動物和病害動物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》 (GB16548-2006) 規(guī)定對病畜尸體及其流產(chǎn)胎兒、胎衣和排泄物、乳、乳制品等進(jìn)行無害化處理。

    5.2 人員防控

    全場工作人員集中到定點醫(yī)療機構(gòu)進(jìn)行布氏桿菌病篩查,確診為陽性的職工立即調(diào)整工作崗位,不得再從事與羊接觸的工作。 同時做好在場職工布氏桿菌病防控宣傳工作,做好個人防護和消毒措施[2]。

    5.3 加強消毒

    對該場所有圈舍、場地和生產(chǎn)用具等全部用用 10% 的石灰水和2% 氫氧化鈉溶液徹底消毒。 做好圈舍通風(fēng)、滅蚊和滅蟲工作。 加強糞便日常清掃力度及糞便的無害化處理[3]。

    5.4 培育健康羔羊群

    羔羊出生后現(xiàn)用消毒液擦洗全身后才放入羔羊培育圈,飼喂健康母羊的乳汁,做好日常圈舍、用具的消毒工作。 按照20日齡、120 日齡,6 月齡進(jìn)行布病篩查,發(fā)現(xiàn)陽性羊立即淘汰做無害化處理。

    6 小結(jié)

    采取以上措施后半年后回訪,該場再沒有布魯氏桿菌病的發(fā)生。

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