海南橋頭地瓜影響小鼠免疫功能的初步研究

鄭通 王銳敏 王國旭 王蔓兒 王英

摘 要：研究海南橋頭地瓜對小鼠免疫功能的影響，討論其在免疫功能方面的應(yīng)用價值。通過用海南橋頭地瓜連續(xù)喂養(yǎng)小鼠30天后，觀察小鼠的生長情況，計算臟體指數(shù)，檢測其誘發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（delayed type hypersensitivity，DTH）和對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響。相比對照組，實驗組小鼠DTH反應(yīng)程度增強，巨噬細(xì)胞的吞噬功能增強。產(chǎn)自海南澄邁橋頭鎮(zhèn)的橋頭地瓜初步證實具有影響小鼠免疫功能的作用，其相關(guān)機制值得進(jìn)一步研究探討。

關(guān)鍵詞：地瓜;免疫功能;小鼠

甘薯，俗稱紅薯、番薯、甜薯、地瓜等，是我國重要糧食、飼料和食品工業(yè)原料作物。我國甘薯種植面積約占世界總面積的70%，年產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的80%[1]，資源豐富。近年來隨著人們健康意識增強，甘薯的營養(yǎng)保健功效也日益引起人們關(guān)注。海南橋頭地瓜是甘薯品種之一，產(chǎn)于海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn)，甜度適中，常吃不膩，深受人們的喜愛。本文對海南橋頭地瓜影響小鼠免疫功能效果進(jìn)行了研究，這對于明確甘薯保健效果有重要意義?，F(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

1 材料和方法

1.1 材料

海南橋頭地瓜產(chǎn)自海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn);生理鹽水購自四川科倫藥業(yè)股份有限公司（產(chǎn)品批號L218081805）;綿羊紅細(xì)胞懸液購自北京博爾西科技有限公司;瑞氏-吉姆薩染液購自北京雷根生物技術(shù)有限公司;可溶性淀粉購自西隴化工股份有限公司;雞紅細(xì)胞懸液由課題組新鮮配制。

1.2 實驗動物

健康昆明小鼠30只，雄性，8～10周齡，體重（36.13±652）g，購自長沙市天勤生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 橋頭地瓜粉的制備

橋頭地瓜洗干凈切片、烘干，用粉碎機研磨成粉末，裝入干凈瓶子，室溫干燥保存，備用。

1.3.2 橋頭地瓜對小鼠生長情況的影響

將小鼠隨機分為2組，每組15只。分組后測量初始體重，對照組喂食普通飼料加生理鹽水，實驗組喂食等量普通飼料加溶解橋頭地瓜粉（劑量250g/Kg）的生理鹽水，飼養(yǎng)時間30天。小鼠實驗飼養(yǎng)期間測量體溫、觀察進(jìn)食、活動及精神狀態(tài)等方面的表現(xiàn)。

1.3.3 橋頭地瓜對小鼠臟體指數(shù)的影響

第30天給藥后，每組取4只禁食不禁水12h后分別稱體重，處死后剝離肝臟、脾臟稱重量，并計算肝體指數(shù)（肝臟重量與體重比值）和脾體指數(shù)（脾臟重量與體重）。

1.3.4 誘發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）（采用足跖增厚法）

第30天給藥30min后，每組分別取4只小鼠進(jìn)行腹腔注射2%綿羊紅細(xì)胞懸液0.2mL，4天后測量左后足趾厚度，測量后在測量部位注射20%綿羊紅細(xì)胞懸液20μL，注射24h后測量左后足趾部厚度，同一部位測量三次，取平均值。

1.3.5 橋頭地瓜對小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

兩組小鼠各取4只，分別于腹腔注射6%可溶性淀粉肉湯1mL，3天后，再分別于腹腔注射1%新鮮雞紅細(xì)胞懸液05mL，并輕輕揉腹。30min后處死小鼠，取腹腔液涂片，干燥后進(jìn)行瑞氏-吉姆薩染液染色，置顯微鏡下觀察并按以下公式計算吞噬指數(shù)。實驗重復(fù)3次。

1.3.6 數(shù)據(jù)處理

實驗數(shù)據(jù)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件處理，計量資料用x-±s表示，采用t檢驗，p<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 橋頭地瓜對小鼠生長情況的影響

實驗飼養(yǎng)期間小鼠體溫正常，進(jìn)食、進(jìn)水量正常，毛皮光澤度好，活動自如、反應(yīng)敏捷，精神狀態(tài)良好，實驗組和對照組小鼠喂食30天前后體重的變化無統(tǒng)計學(xué)意義（t實=0.044，p=0.968;t對=0.629，p=0.574），見表1。

2.2 橋頭地瓜對小鼠免疫功能的影響

實驗組小鼠的肝體指數(shù)、脾體指數(shù)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t肝=0.016，p=0.988;t脾=0.784，p=0.490），說明橋頭地瓜對小鼠的脾臟/體重比值、肝臟/體重比值均無影響。實驗組小鼠足跖腫脹度較對照組明顯，兩者間的差異具有顯著性（t=3.903，p=0.030）;鏡下可觀察到實驗組小鼠巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞相比對照組多，計算吞噬指數(shù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析顯示，兩組的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=15.000，p=0.001）。見表2。

3 討論

甘薯是重要的糧食作物，僅次于水稻、小麥、玉米。含有淀粉、膳食纖維、胡蘿卜素、維生素A、維生素C和鉀、鐵、銅、硒、鈣等10余種微量元素，具有防癌、去脂降壓、降血糖、保護(hù)血管、通便潤腸、延緩衰老等作用，營養(yǎng)價值高，被營養(yǎng)學(xué)家稱為營養(yǎng)最均衡的天然保健食品[2-6]。甘薯能“煮食補脾胃，益氣力，御風(fēng)寒，益顏色”。在日本國家癌癥研究中心公布的20種抗癌蔬菜排行中甘薯名列榜首[7-9]。

本次研究結(jié)果顯示，實驗組小鼠喂食橋頭地瓜后體重和喂食橋頭地瓜前體重相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05），說明橋頭地瓜對小鼠體重的影響無統(tǒng)計學(xué)意義。實驗組小鼠的脾體指數(shù)、肝體指數(shù)和對照組的脾體指數(shù)、肝體指數(shù)比較，差異也無統(tǒng)計學(xué)意義（均p>0.05）。DTH誘導(dǎo)試驗結(jié)果顯示實驗組小鼠足跖腫脹度顯著于對照組（p<0.05）;經(jīng)喂食橋頭地瓜后的小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能與對照組相比，顯著增強，具有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。這些結(jié)果顯示橋頭地瓜對小鼠淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞都可產(chǎn)生明顯的增強效應(yīng)，初步提示橋頭地瓜具有增強免疫細(xì)胞功能作用。此次實驗研究選用的橋頭地瓜產(chǎn)自海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn)。橋頭鎮(zhèn)土壤富含硒元素，因此，橋頭地瓜也被喻為富硒地瓜。

硒與動物的生長發(fā)育、繁殖和疾病的發(fā)生有著密切關(guān)系，1973年世界衛(wèi)生組織將其定為人和動物的必需微量元素之一[10]。眾多研究顯示，硒參與機體的抗氧化活性、甲狀腺激素代謝、修復(fù)細(xì)胞、抗癌防癌等生理功能[11-12]。硒還能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、分化和促進(jìn)抗體的生成、細(xì)胞因子的分泌等[13-14]。本次實驗結(jié)果中橋頭地瓜增強淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的作用是否和其富含硒元素有關(guān)值得進(jìn)一步探討。

（感謝在本次實驗中王一彬、王帥兩位同學(xué)給予幫助。）

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