藥品微生物檢查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制影響因素探索

鄭州市食品藥品檢驗(yàn)所（450000）孫曉朋 閆文斌 曹瑩 王萌

藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制為藥品質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，結(jié)合微生物檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)判。由于微生物檢驗(yàn)易受到多種影響因素影響導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)誤差，如檢驗(yàn)環(huán)境、培養(yǎng)基質(zhì)量、菌種活力、操作人員技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)等[1]。藥品衛(wèi)生安全問(wèn)題備受重視，藥品若受到微生物污染，對(duì)藥品作用及人類(lèi)健康造成極大危害。由于藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室控制的重要性，需明確常見(jiàn)影響實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制因素，分析藥品微生物異常結(jié)果的來(lái)源，避免假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果[2]。我國(guó)建立完善的藥品監(jiān)管體系，重視藥品微生物檢查單過(guò)程控制及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的風(fēng)險(xiǎn)管理，保證優(yōu)化藥品微生物檢查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制效果[3]。為此，本次研究針對(duì)藥品微生物檢查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制影響因素，為制定改進(jìn)措施提供依據(jù)，詳細(xì)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本所2018年1月～2019年12月期間檢驗(yàn)的藥品848批作為資料，包含丸劑375批，片劑221批，口服液140批，外用制劑90批，顆粒制劑22批。

1.2 方法 計(jì)數(shù)菌和控制菌，其中計(jì)數(shù)菌包括：需氧菌、霉菌和酵母菌；控制菌包括：耐膽鹽革蘭陰性菌、大腸埃希菌、沙門(mén)菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、梭菌、白色念珠菌，并記錄誤差發(fā)生情況，追究誤差根源，分析影響因素，設(shè)置一級(jí)指標(biāo)：人員、物品、環(huán)境、標(biāo)準(zhǔn)，再細(xì)分二級(jí)指標(biāo)，包含：①人員：操作人員檢驗(yàn)操作技能水平，操作人員對(duì)質(zhì)量控制的重視程度；②物品：樣品受到地理環(huán)境影響導(dǎo)致污染，活體易變性，微生物檢驗(yàn)難度，檢品中抑菌成分、原料藥滅菌、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備性能；③環(huán)境：菌液、菌懸液、培養(yǎng)基保存及質(zhì)量控制，菌懸液培養(yǎng)時(shí)間控制，稀釋精確性，驗(yàn)證用菌傳代次數(shù)，實(shí)驗(yàn)室空氣質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)室來(lái)源菌；④標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)室環(huán)境質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，藥典標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)微生物檢驗(yàn)誤差發(fā)生率，分析人員、物品、環(huán)境、標(biāo)準(zhǔn)等一級(jí)影響因素占比，并統(tǒng)計(jì)二級(jí)影響因素占比。

2 結(jié)果

分析附表可知，微生物檢驗(yàn)誤差發(fā)生95批，發(fā)生率11.20%，影響因素主要為實(shí)驗(yàn)室人員技能水平、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備性能、試驗(yàn)品保存及質(zhì)量控制、環(huán)境質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。人員、物品、環(huán)境、標(biāo)準(zhǔn)等為一級(jí)影響因素分別占比54.74%、22.11%、12.63%，10.53%。

3 討論

本次研究結(jié)果顯示微生物檢驗(yàn)誤差發(fā)生率11.20%，影響因素主要為實(shí)驗(yàn)室人員技能水平33.68%，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備性能7.37%，檢品保存及質(zhì)量控制2.11%，環(huán)境質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)2.11%。人員、物品、環(huán)境、標(biāo)準(zhǔn)等一級(jí)影響因素分別占比54.74%、22.11%、12.63%、10.53%，提示藥品微生物檢查中難以避免出現(xiàn)檢驗(yàn)誤差，受到多種影響因素導(dǎo)致，如實(shí)驗(yàn)室人員技能水平、設(shè)備性能、檢品保存及質(zhì)量控制及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)等。尤其實(shí)驗(yàn)室人員的能力、重視程度及操作標(biāo)準(zhǔn)影響較大，需強(qiáng)化上述管理?xiàng)l件。

為提高藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室高質(zhì)量控制，需結(jié)合上述影響因素制定可靠的防范措施。檢驗(yàn)過(guò)程由檢驗(yàn)人員完成各項(xiàng)操作，若人員技能不足或重視程度不足，對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量造成極大影響，因此需重視對(duì)檢驗(yàn)人員的培訓(xùn)及考核，確保其充分障礙藥品微生物檢驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)、操作技能，明確各項(xiàng)操作的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)強(qiáng)化定期考核，將考核結(jié)果與檢驗(yàn)人員工資獎(jiǎng)金、升職等掛鉤，并重視責(zé)任心教育，促使其認(rèn)識(shí)到檢驗(yàn)過(guò)程易受到操作時(shí)間、步驟及儀器規(guī)范使用等人為因素導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果誤差，提高警惕心理[4]。如今微生物檢驗(yàn)儀器設(shè)備越來(lái)越先進(jìn)，需定期檢查和維護(hù)儀器設(shè)備，確保性能良好，且需規(guī)范儀器設(shè)備的操作方法及標(biāo)準(zhǔn)，減少操作失誤，如壓力滅菌器升溫緩慢會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基過(guò)熱造成過(guò)度滅菌。加強(qiáng)培養(yǎng)基、菌種及生物安全管理，采購(gòu)前應(yīng)嚴(yán)格供應(yīng)商資質(zhì)審核，檢驗(yàn)前需重視各物品的檢驗(yàn)，如培養(yǎng)基適用性檢查[5]。重視物品的環(huán)境管理，如標(biāo)準(zhǔn)菌株需在適宜的條件下保存。第一進(jìn)行純度分析，嚴(yán)格控制工作菌株的傳代次數(shù)，不可超過(guò)5代，預(yù)防菌種變異。此外對(duì)環(huán)境中常見(jiàn)的污染菌株應(yīng)采取適當(dāng)措施處理后再按普通廢棄物處理，保障生物安全。藥典規(guī)范微生物檢驗(yàn)環(huán)境需滿足無(wú)菌檢查/微生物限度檢查的要求，檢驗(yàn)中心需將無(wú)菌檢驗(yàn)環(huán)境控制在B級(jí)背景的A級(jí)層流環(huán)境下，避免環(huán)境對(duì)樣本的污染，預(yù)防菌種之間的交叉污染。注意藥品微生物檢查區(qū)域的定期清潔及消毒，定期進(jìn)行表面微生物監(jiān)測(cè)，且需分析生物因子變化的趨勢(shì)性，結(jié)合警戒限度和糾偏限度強(qiáng)化控制。由于人流活動(dòng)及相關(guān)因素，無(wú)法完全控制潔凈環(huán)境，仍可能出現(xiàn)微生物污染，因此必要時(shí)需進(jìn)行復(fù)試[6]。在藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中需明確標(biāo)準(zhǔn)及方法，確保檢驗(yàn)有據(jù)可依，如《藥品標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》，且需關(guān)注藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)、地方藥材標(biāo)準(zhǔn)。如今我國(guó)依然依據(jù)實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn)進(jìn)行微生物鑒別，認(rèn)為藥品的生產(chǎn)、檢驗(yàn)及質(zhì)量控制需制定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，確定通用技術(shù)要求。如今我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及方法不斷改進(jìn)，關(guān)于微生物限度及無(wú)菌檢驗(yàn)的文獻(xiàn)資料不斷充實(shí)，但藥檢所實(shí)際執(zhí)行中仍可能出現(xiàn)問(wèn)題，如一些藥品的微生物限度檢查，生產(chǎn)企業(yè)無(wú)法提供用品、檢驗(yàn)檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)。部分中藥制劑中不包含“制法”，無(wú)法依據(jù)工藝處方明確是否進(jìn)行耐膽鹽革蘭陰性菌和沙門(mén)菌檢查[7]。此時(shí)需依據(jù)藥典提供的藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則完成。藥品中微生物易出現(xiàn)損傷或抑制，活力較差，需采用培養(yǎng)基培養(yǎng)，如需氧菌總數(shù)需培養(yǎng)3～5d，霉菌和酵母菌培養(yǎng)5～7d，培養(yǎng)過(guò)程中需避免孢子分散后重新長(zhǎng)出菌落。微生物限度檢查多采用不同稀釋級(jí)分別計(jì)數(shù)及分析，但可能因?yàn)楦呦♂尲?jí)的菌落計(jì)數(shù)過(guò)高造成結(jié)果誤差，因此可采取指數(shù)形式。若發(fā)現(xiàn)藥品微生物檢驗(yàn)結(jié)果誤差或超標(biāo)結(jié)果，需展開(kāi)回顧性調(diào)查，若發(fā)現(xiàn)人員、試劑、環(huán)境、方法等不符合規(guī)定時(shí)，需重試。

附表 微生物檢驗(yàn)誤差及影響因素（%）

綜上所述，藥品微生物檢查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制影響因素較多，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及方法、檢驗(yàn)物品、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及檢驗(yàn)人員等均為主要因素，需結(jié)合國(guó)家及地方相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，強(qiáng)化各影響因素的管理標(biāo)準(zhǔn)，提高藥品微生物檢查實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量。