HPLC測定蒼術(shù)中的3種成分研究

張如春

(湖南省常德市桃源縣中醫(yī)醫(yī)院，山西 贛州 415700)

前言

在祖國醫(yī)學(xué)大力發(fā)展的今天，對中藥的認(rèn)識逐漸提升。其中，蒼術(shù)作為上品中藥，其在機體消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)以及其他系統(tǒng)中均發(fā)揮著一定的作用。如在消化系統(tǒng)中，蒼術(shù)起到促進胃、腸運動的作用，并具有抗?jié)兊淖饔?。在心血管系統(tǒng)中，蒼術(shù)則可起到保護心肌缺血再灌注損傷及其引發(fā)的心律失常等功效。在泌尿生殖系統(tǒng)中，蒼術(shù)中的有效成分β-桉葉醇，其可通過抑制Na+等的活性，并抑制其在腎臟的重吸收而產(chǎn)生利尿作用。在神經(jīng)系統(tǒng)中，蒼術(shù)中的蒼術(shù)醇的鎮(zhèn)痛效果與阿司匹林功效相當(dāng)。除此之外，蒼術(shù)還具有保肝、抑菌、抗腫瘤等功效?？梢?，對蒼術(shù)這一中醫(yī)臨床中的常用藥，其具有較大的需求，因而對其中的3種主要成分進行測定時，選取適宜的方法是非常關(guān)鍵且重要的。因此，本文主要從高效液相色譜法(HPLC)測定蒼術(shù)中3種成分的研究進展角度展開了研究，旨在為蒼術(shù)的合理開發(fā)和利用奠定基礎(chǔ)。

1 蒼術(shù)及HPLC法相關(guān)理論概述

1.1 蒼術(shù)

蒼術(shù)，菊科植物，又有南蒼術(shù)、北蒼術(shù)等之稱。其中，分布在湖北、江蘇等地的稱為南蒼術(shù)，而分布在內(nèi)蒙古、吉林及河北等地的則成為北蒼術(shù)?？梢姡n術(shù)具有較廣的分布范圍。然而，受到產(chǎn)地和地理環(huán)境的影響，蒼術(shù)中各個成分的含量也是有明顯的差異的。這也在一定程度上影響了藥材質(zhì)量的控制。在鑒別蒼術(shù)這一中藥材質(zhì)量時，僅通過外觀形態(tài)的觀察是難以鑒別優(yōu)劣的，這也是導(dǎo)致目前市場上蒼術(shù)藥材混雜現(xiàn)象普遍的重要原因之一。

蒼術(shù)以揮發(fā)油為主要化學(xué)成分，其約為5%至9%。而揮發(fā)油的主要成分則包括蒼術(shù)素和蒼術(shù)醇等。β-桉葉醇是蒼術(shù)醇中的混合物之一，其含量占比約為6%。在2015版的《中國藥典》中，其將蒼術(shù)素規(guī)定為蒼術(shù)的指標(biāo)性成分，并對其含量給予了明確的規(guī)定，即不低于0.30%。由此可見，在對蒼術(shù)這一中藥材進行質(zhì)量控制的過程中，應(yīng)對其3種主要成分的含量進行測定。

1.2HPLC法

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)，又有高速液相色譜、高壓液相色譜、近代柱色譜等支撐，其屬于色譜法。HPLC法下的流動相是液體，系統(tǒng)采用的是高壓輸液系統(tǒng)，主要是通過將不同比例的混合溶劑，或不同極的單一溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相色譜柱中，并經(jīng)成分分離后，在檢測器下進行檢測的一種測定方法。HPLC具有以下幾個特點：第一，具有較好的分離效能。第二，具有較高的靈敏度。第三，具有較高的壓力。第四，具有較快的載液流速和分析速度。最后，具有較廣的應(yīng)用范圍。除此之外，HPLC還具有易回收、不會破壞樣本以及色譜柱反復(fù)使用等優(yōu)勢?？傊?，正是由于HPLC具有上述特點和優(yōu)勢，因而目前在醫(yī)學(xué)、化學(xué)、工業(yè)及農(nóng)業(yè)等諸多領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。

2 HPLC法測定蒼術(shù)中3種成分的研究進展

2.1 蒼術(shù)素

蒼術(shù)素的分子式、分子量及相對密度分別為C13H10O、182.2179、1.056g/cm3。蒼術(shù)素是不溶于水、微溶于甲醇，溶于乙酸乙酯和丙酮的無色結(jié)晶藥品。在室溫環(huán)境下，蒼術(shù)素具有較好的穩(wěn)定性。在對蒼術(shù)素進行檢測時，其檢測的方法主要包括HPLC、TLC法等。瞿領(lǐng)航在研究中也采用HPLC法對南北蒼術(shù)的含量進行檢測，并認(rèn)為這一方法可以有效區(qū)別南北蒼術(shù)[1-3]。高麗在研究中采用HPLC法對不同產(chǎn)地的蒼術(shù)中的蒼術(shù)素含量進行了分析，并指出在不同的產(chǎn)地下，蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量是有較大的差異的，其中蒼術(shù)素含量最高的產(chǎn)地是河南的方城縣與嵩縣。另外，也有相關(guān)文獻顯示，經(jīng)人工栽培的蒼術(shù)，采用HPLC對其含量進行測定，顯示蒼術(shù)素的含量為0.84%，其與我國的相關(guān)法定標(biāo)準(zhǔn)相符[4]。另外，也有學(xué)者采用HPLC法對北蒼術(shù)中的成分展開定性與定量分析，并確定了13種成分，即蒼術(shù)素、蒼術(shù)醇等，但對于β-桉葉醇卻并未確認(rèn)。然而，也有學(xué)者運用同樣的鑒定法，對南蒼術(shù)中的主要成分進行了測定，并認(rèn)為在HPLC法下，其確認(rèn)了蒼術(shù)素、β-桉葉醇，但對于蒼術(shù)醇卻并尚未確認(rèn)。也就是說，在對蒼術(shù)中主要成分進行分類區(qū)別的過程中，可采用HPLC法的測定結(jié)果作為依據(jù)和參考。然而，目前關(guān)于HPLC法測定的成分種類研究結(jié)果還尚不一致。由此可見，關(guān)于HPLC測定蒼術(shù)中各個成分的研究還有待深化。

2.2 蒼術(shù)醇

蒼術(shù)醇的分子量分別為222.37。有學(xué)者探究了不同居群蒼術(shù)中蒼術(shù)醇的含量，其采用的方法是HPLC法，并認(rèn)為這一方法是一種簡便且準(zhǔn)確的藥材質(zhì)量評價法，并認(rèn)為大別山區(qū)蒼術(shù)中的蒼術(shù)醇含量是較高的，其含量約為江蘇茅蒼術(shù)的4倍至6倍。相比于傳統(tǒng)分離方法，采用HPLC法，蒼術(shù)醇的含量會有由于溫度過高而受到破壞，是一種理想的測定方法。另外，也有學(xué)者采用HPLC法分析了南北蒼術(shù)、關(guān)蒼術(shù)中蒼術(shù)素和蒼術(shù)醇中的含量展開了測定，其在進行含量測定的過程中，采用的色譜柱為Promosil C18，流動相為乙腈一磷酸水，270nm為檢測波長，25℃為柱溫，指出蒼術(shù)醇的質(zhì)量濃度范圍為0.001-0.218mg/mL，而蒼術(shù)醇發(fā)熱質(zhì)量濃度范圍為0.0004-0.0119mg/mL。與此同時，南北蒼術(shù)和關(guān)蒼術(shù)三個不同的產(chǎn)地，其在特征圖譜方面的差異較大，因而在蒼術(shù)醇和蒼術(shù)素的含量方面也存在較大的差異。而采用HPLC法，其可以快速將三種不同的蒼術(shù)進行鑒別。在進行測定的過程中，將含量測定與特征圖譜進行結(jié)合，其不僅具有操作簡便的優(yōu)勢，而且在測定結(jié)果方面也更為準(zhǔn)確。不僅如此，還具有較好的重復(fù)性。也就是說，在對蒼術(shù)這一中藥材的質(zhì)量進行評價時，HPLC法是一種可靠且全面的分析方法，值得在蒼術(shù)中成分測定中廣泛應(yīng)用。

2.3β-桉葉醇

β-桉葉醇作為一種化學(xué)物質(zhì)，其分子式、分子量分別為C15H260、222.37。β-桉葉醇的外觀是白色結(jié)晶，其在2℃至8℃溫度下避光保存。據(jù)相關(guān)文獻顯示，采用HPLC對南蒼術(shù)和北蒼術(shù)的β-桉葉醇和蒼術(shù)素的含量進行測定時，南蒼術(shù)中的β-桉葉醇和蒼術(shù)素含量范圍分別為17.14-32.15/2.23-3.76，而北蒼術(shù)對應(yīng)的含量范圍則分別為0.30-7.03、0.43-7.06[5-8]。對于不同產(chǎn)地蒼術(shù)中的β-桉葉醇含量，β-桉葉醇與蒼術(shù)素含量最高的產(chǎn)地是湖北，蒼術(shù)素與蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ含量最高的產(chǎn)地在江蘇茅山。在HPLC下，基于色差原理分析不同生長年限北蒼術(shù)藥材粉末，顯示蒼術(shù)素與β-桉葉醇的分離度在1.50以上，對應(yīng)的線性范圍分別為3.30-33.00、4.40-44.00，其精密度和重復(fù)性均在2%以內(nèi)，各成分含量隨著生長年限的增加而升高。也就是說，蒼術(shù)的生長年限越長，其β-桉葉醇和蒼術(shù)素的含量就越高。對于北蒼術(shù)而言，其β-桉葉醇和蒼術(shù)素與黃藍(lán)色度和紅綠色度之間的關(guān)系真是正相關(guān)關(guān)系，而與色差值、顏色亮度之間的關(guān)系是負(fù)相關(guān)關(guān)系。

3 結(jié)語

伴隨祖國醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，當(dāng)下研究的重點逐漸轉(zhuǎn)向中藥的開發(fā)與利用。然而，在中藥開發(fā)與利用中，對其中藥成分進行測定不僅是重中之重，而且是確保藥材質(zhì)量的關(guān)鍵。通過上述分析顯示，采用HPLC測定法對蒼術(shù)中3種成分進行測定時，對蒼術(shù)素、蒼術(shù)醇以及β-桉葉醇3種成分同時測定的研究極少。現(xiàn)階段，既有研究成果主要是對蒼術(shù)中單一成分的測定，如蒼術(shù)素的測定。對于多種蒼術(shù)成分共同測定的研究，其則主要是對β-桉葉醇和蒼術(shù)素的測定，對于蒼術(shù)素與蒼術(shù)醇、β-桉葉醇與蒼術(shù)醇，以及上述3種成分含量的測定研究是比較少的。除此之外，既有相關(guān)文獻在應(yīng)用HPLC進行蒼術(shù)成分測定時，其主要選取的是不同產(chǎn)地蒼術(shù)成分含量的測定，且主要以南蒼術(shù)和北蒼術(shù)作為主要研究領(lǐng)域。因此，未來采用HPLC測定法對蒼術(shù)中3種成分進行測定時，應(yīng)注重同時對上述3種成分進行測定。