蔬菜和食用菌中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)研究

崔 娟

（平頂山市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測中心，河南 平頂山 467000）

1 檢測實(shí)驗(yàn)

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

實(shí)驗(yàn)儀器包括高效液相色譜儀、質(zhì)譜儀及濃干儀等；試劑包括甲醇、乙腈及超純水、50g/L氯化鈉溶液等。標(biāo)準(zhǔn)樣品選擇純度不低于99%的19種氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如滅多威、草達(dá)滅及甲硫威等。實(shí)驗(yàn)樣品選擇黃瓜、牛肝菌等蔬菜和食用菌。

1.2 樣品前處理

提取，稱取20g樣品置于100ml離心管中，添加34ml丙酮、6ml乙腈，再使用10mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值，使其處于9～10之間，在機(jī)械條件下均值提取三分鐘，然后在4000r/min條件下離心五分鐘，取上清液放置在快速濃干管中，將快速濃干儀的工作條件設(shè)定為35℃，進(jìn)行濃縮處理；其次，在濃縮后的溶液內(nèi)添加50ml氯化鈉溶液，分三次加入25ml、20ml和15ml的二氯甲烷，再添加無水硫酸鈉；最后，按照同樣的條件對溶液進(jìn)行濃縮處理，使用固相萃取柱上樣液溶解濃縮產(chǎn)生的殘?jiān)?，分別添加0.02ml甲醇和1.98ml二氯甲烷。

凈化，溶解后的殘?jiān)柽M(jìn)行凈化處理，首先將10ml甲醇、10ml甲醇和二氯甲烷混合液（混合比為1：100）置于PSA柱中，進(jìn)行活化處理；再將殘?jiān)芙庖褐糜赑SA柱中，通過甲醇和二氯甲烷混合液洗脫殘?jiān)芙庖?，洗脫條件如下：速度1ml/min，在收集到7ml洗脫液后，按照同樣條件進(jìn)行濃縮處理，處理后產(chǎn)生的殘?jiān)?ml甲醇和水溶液（混合比為2：8）溶解，溶解液使用0.2μm的薄膜過濾，即可獲得樣品溶液[1]。

1.3 樣品農(nóng)藥殘留檢測

在樣品農(nóng)藥殘留檢測中，分別進(jìn)行定性分析與定量分析。

在定性分析中，本文創(chuàng)新復(fù)合定性分析方法，將UPLCMS和MS配合使用。在實(shí)際分析中，每種農(nóng)藥均選取一個母離子及兩個子離子，設(shè)定同樣的實(shí)驗(yàn)條件測定樣品溶液。如果樣品和標(biāo)準(zhǔn)品在色譜峰保留時間方面差值低于2.5%，則需根據(jù)如下標(biāo)準(zhǔn)分析樣品中是否含有氨基甲酸酯類農(nóng)藥。（1）選擇的一個母離子、兩個子離子及樣品中離子的相對豐度比超過50%，二者誤差低于20%，則含有該農(nóng)藥；（2）選擇的一個母離子、兩個子離子及樣品中離子的相對豐度比處于20%～50%內(nèi)，二者誤差低于25%，則含有該農(nóng)藥；（3）選擇的一個母離子、兩個子離子及樣品中離子的相對豐度比處于10%～20%內(nèi)，二者誤差低于30%，則含有該農(nóng)藥；（4）選擇的一個母離子、兩個子離子及樣品中離子的相對豐度比低于10%，二者誤差低于50%，則含有該農(nóng)藥。分析方法為內(nèi)標(biāo)法，本實(shí)驗(yàn)選擇D6抗牙威作為內(nèi)標(biāo)物。

在定量分析中，為避免檢測結(jié)果受基質(zhì)影響，首先對樣品中農(nóng)藥殘留量進(jìn)行預(yù)估，選擇與其濃度較為接近的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)液，確保二者的響應(yīng)值處于儀器的檢測范圍，分別稱取同樣等級的樣品溶液和基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)液，采用等體積參差進(jìn)樣方式開展測定，最后使用內(nèi)標(biāo)法定量[2]。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

測定結(jié)果顯示，19種農(nóng)藥的線性范圍為0.05～10mg/L，檢出限是0.01×10-3g/kg，符合氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)要求，農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果的精度偏差在2%～12%之間。總的來說，本文設(shè)計的氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測方法精度較高，可在實(shí)際檢測中推廣普及。根據(jù)上述檢測流程，在開展農(nóng)藥殘留檢測實(shí)驗(yàn)時需注意以下幾點(diǎn)：

2.1 合理選擇流動相

本實(shí)驗(yàn)選擇甲醇、水和甲酸混合液為流動相，確保樣品中的農(nóng)藥可有效溶于流動相中，應(yīng)用梯度洗脫方法，提高前處理效率，為農(nóng)藥殘留檢測提供便利。

2.2 合理選擇質(zhì)譜條件

本文選擇ESI+電離方法，通過流動注射方式掃描農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液中的母離子，明確其具備的子離子，再通過流動注射方法掃描子離子，選擇豐富最高的子離子為監(jiān)測對象。

2.3 合理設(shè)定提取條件

在以往的農(nóng)藥提取中，通常選用乙酸乙酯提取液，本實(shí)驗(yàn)選擇丙酮和乙腈的混合液，二者比例為85：15時，農(nóng)藥的提取效果最佳。農(nóng)藥的常用提取方式包括超聲提取、振蕩提取、均值提取等，三種方法的提取效果相差無幾，但后者的用時雖短，所以本實(shí)驗(yàn)選擇均質(zhì)提取方法。

2.4 選用SPE凈化法

本實(shí)驗(yàn)對SPE凈化的參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化處理，將甲醇和二氯甲烷混合液作為活化劑和洗脫機(jī)，將洗脫速度設(shè)定為1ml/min，在保障活化和洗脫效果的基礎(chǔ)上，縮短活化和洗脫時間，提高檢測效率。

3 結(jié)論

綜上所述，傳統(tǒng)氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測方法存在諸多不足，檢測人員需創(chuàng)新檢測方法。通過本文的分析，檢測人員可配合使用液相色譜法和質(zhì)譜法，合理選擇流動相、質(zhì)譜條件、提取條件、SPE凈化法，提高農(nóng)藥殘留檢測的精度與效率，避免農(nóng)藥殘留超標(biāo)的蔬菜或食用菌進(jìn)入市場。