肺結(jié)核患者肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌檢測的方法學(xué)評價(jià)

胡茜茜

【摘要】目的：研究肺結(jié)核患者肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌采用不同檢測方法的臨床價(jià)值。方法：病例樣本為2019年1月-2020年1月時(shí)間段我院收治的84例肺結(jié)核患者，收集其肺泡灌洗液，采用Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法、離心涂片法、960培養(yǎng)法，評估不同檢測方法的檢測結(jié)果。結(jié)果：評估不同檢測方法陽性率，Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法高于其他方法（P<0.05）。結(jié)論：肺結(jié)核患者肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌采用Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法診斷臨床價(jià)值突出，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】肺結(jié)核;肺泡灌洗液;結(jié)核桿菌

【中圖分類號】R521?【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B?【文章編號】1002-8714（2020）11-0086-01

肺結(jié)核屬臨床常見慢性傳染性疾病，致病原因?yàn)榻Y(jié)核桿菌感染。細(xì)菌培養(yǎng)是臨床診斷結(jié)核桿菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，其主要缺陷為診斷耗時(shí)較長，對診斷環(huán)境及生物安全性要求較高，敏感性偏低[1]?？顾崛旧āpert MTB/RIF法屬臨床診斷結(jié)核桿菌感染的全新技術(shù)，本次研究通過對我院1年時(shí)間內(nèi)收治共計(jì)84例該疾病患者資料的研究分析，重點(diǎn)探討肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌采用不同檢測方法的臨床價(jià)值。

1?資料與方法

1.1一般資料

2019年1月為本次研究起始時(shí)間，2020年1月為本次研究終止時(shí)間，研究樣本數(shù)量共計(jì)84例，全部患者經(jīng)影像學(xué)診斷、病理診斷、細(xì)菌學(xué)診斷，均符合肺結(jié)核臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男46例，女38例，年齡范圍為35-57歲，年齡均值為（40.21±5.04）歲。

1.2方法

全部84例患者均行Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法、離心涂片法、960培養(yǎng)法檢測結(jié)核桿菌感染情況，檢測前醫(yī)師依據(jù)患者病變部位選擇需灌洗的肺段，于患者肺段支氣管開口部位插入電子支氣管鏡，注入2ml利多卡因?qū)嵤┚植柯樽?，注?-10ml生理鹽水反復(fù)灌洗，收集肺泡灌洗液15ml。

Xpert MTB/RIF法：將消化液加入BALF中，比例設(shè)定為1：1（v/v），將試管蓋子擰緊，利用旋渦振蕩器持續(xù)振蕩約30s。于室溫環(huán)境中放置約15min，如混合液中無明顯可見顆粒物，可在檢測試劑盒被加入2ml混合液。利用Gene Xpert儀器對試劑盒實(shí)施自動檢測2h進(jìn)而顯示檢測結(jié)果。

改良抗酸染色法：將BALF混合均勻，取0.3mlNaOH溶液（4%）與0.9mlBALF于旋渦振蕩器中混合均勻，將消化完成的BALF0.5ml加入4型Cy-tospin玻片離心沉淀儀器中，離心處理5min后將玻片取下，并于恒溫干燥設(shè)備中進(jìn)行干燥處理及抗酸染色處理，利用油鏡檢查，并分析記錄檢查結(jié)果。

離心涂片法：10ml一次性無菌試管中加入5mlBALF，離心處理10min（3000g），將上層清液吸出并棄去。利用底部沉淀實(shí)施涂片處理，面積設(shè)置為10mm×20mm。利用恒溫干燥設(shè)備處理后加入石炭酸復(fù)紅染液處理10min，脫色處理1min（鹽酸酒精3%），利用美藍(lán)復(fù)染30s，水洗并干燥處理后利用油鏡進(jìn)行檢驗(yàn)。

960培養(yǎng)法：50ml一次性離心管中加入5ml混合均勻的BALF，加入2倍體積消化液處理，旋渦振蕩使其達(dá)到完全消化。靜置15min，加入PBS，取混合液45ml進(jìn)行低溫離心處理，離心時(shí)間為15min（3000g）。棄去上層清液，并將沉淀中加入適量PBS，重懸后取懸浮液0.5ml，加入MGIT內(nèi)部實(shí)施培養(yǎng)，操作中需利用抗酸染色確認(rèn)培養(yǎng)陽性管。

1.3評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

評估不同檢測方法陽性率指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

為確保數(shù)據(jù)分析計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確，采用SPSS23.0軟件計(jì)算各類數(shù)據(jù)，本次研究中計(jì)數(shù)資料為（%），檢驗(yàn)方法為χ2，如P<0.05，則組間有差異。

2?結(jié)果

評估不同檢測方法陽性率，Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法高于其他方法（P<0.05）。

3?討論

肺結(jié)核屬臨床常見慢性呼吸系統(tǒng)傳染性疾病，結(jié)核桿菌感染是其主要發(fā)病原因，早期診斷并采取針對性治療干預(yù)措施是臨床防治肺結(jié)核的關(guān)鍵，為此醫(yī)師需結(jié)合患者病情合理選擇診斷方案[2]。

本次研究數(shù)據(jù)顯示，Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法診斷陽性率高于離心涂片法、960培養(yǎng)法，提示其診斷結(jié)核桿菌感染臨床價(jià)值突出。離心涂片法、960培養(yǎng)法屬肺結(jié)核診斷的常規(guī)方法，離心涂片發(fā)主要缺陷為陽性率偏低，培養(yǎng)法需要較長的培養(yǎng)周期，無法在短時(shí)間內(nèi)完成疾病的診斷[3]。改良抗酸染色法利用玻片離心沉淀設(shè)備完成結(jié)核桿菌采集，經(jīng)多聚賴氨酸處理的玻片能夠減少結(jié)核桿菌在檢測過程的損失。BALF經(jīng)消化液處理能夠?qū)⒕奂慕Y(jié)核桿菌分散，可為醫(yī)師觀察涂片營造良好條件。改良抗酸染色法離心操作中濾紙將液體成分吸收，有效解決了結(jié)核桿菌在液體中存在浮力對檢測結(jié)果的影響，且涂片面積較小，可促進(jìn)結(jié)核桿菌濃縮。Xpert MTB/RIF法是近年來應(yīng)用廣泛的新技術(shù)，該技術(shù)操作中利用巢式PCR技術(shù)，敏感性顯著提高，可降低非特異性擴(kuò)增總量，有效區(qū)分非結(jié)核與結(jié)核桿菌，操作過程自動化，并能夠在封閉環(huán)境中完成，可最大程度上確保生物安全，提高診斷準(zhǔn)確率。

由此可知，肺結(jié)核患者肺泡灌洗液中結(jié)核桿菌采用Xpert MTB/RIF法、改良抗酸染色法診斷臨床價(jià)值突出，值得推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]?柯創(chuàng)宏，韓煥欽，楊天驕，等.高通量測序技術(shù)檢測支氣管肺泡灌洗液在嬰幼兒肺炎病原學(xué)診斷中的價(jià)值[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志，2020，34（04）：398-400.

[2]?陳石，陳靜，魏瑜，等.特發(fā)性肺纖維化患者肺泡灌洗液和血清中Napsin A、KL-6、SP-A、SP-D表達(dá)的意義及與肺功能相關(guān)性[J].臨床肺科雜志，2020，25（04）：565-569.

[3]?蔣慧，邵樂健，楊樹坤，等.塵肺病患者肺泡灌洗液TNF-α、IL-10、Th1/Th2水平的臨床意義[J].職業(yè)與健康，2020，36（06）：724-728.