黃石地區(qū)2520 例兒童呼吸道病原體檢測結(jié)果分析

鄒甜甜，費(fèi)安興，柯海燕，陸棟鵬，李勝

(鄂東醫(yī)療集團(tuán)黃石市婦幼保健院，湖北 黃石)

0 引言

感染性病原體的診斷在國內(nèi)外一直以來都是研究的熱點(diǎn)，常見的典型病原體檢測通過微生物培養(yǎng)或快速測序等方法，可以很好的檢測出來，但是，一些非典型呼吸道病原體有很多，已經(jīng)報(bào)道的包括最常見的有嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎支原體、肺炎衣原體、Q 熱立克次體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等，其病原學(xué)較為復(fù)雜且常?；旌洗嬖赱1,2]。呼吸道病原體一般感染人體 1～2 周后，血清中特免疫球蛋白(Ig)M 抗體急劇升高，3～4 周后可達(dá)到高峰。因此，檢測血清中特異IgM 抗體可作為急性感染期的主要指標(biāo)[3,4]。本研究旨在利用呼吸道感染的病原體進(jìn)行快速聯(lián)合多項(xiàng)檢測的方法，對黃石地區(qū)2520 例住院患兒進(jìn)行九種呼吸道非特異性病原抗體IgM 進(jìn)行檢測，以分析呼吸道病原體在黃石地區(qū)兒童群體中的發(fā)病情況和流行特點(diǎn)，明確兒童急性呼吸道感染的致病源，為兒科醫(yī)生臨床治療及合理用藥提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本收集

收集2018 年12 月至2019 年11 月期間，在黃石市婦幼保健院住院的2520 例患兒，年齡為0～6 歲，采集患兒靜脈血送至檢驗(yàn)科臨床免疫實(shí)驗(yàn)室檢測。

1.2 方法

采用間接免疫熒光法(IFA)，利用IgM 抗體檢測試劑盒檢測人血清中呼吸道感染主要病原體的IgM 抗體。

1.3 結(jié)果判讀

參考安圖生物科技公司呼吸道九聯(lián)檢檢測試劑盒說明書。具體方法：

陽性結(jié)果：可以觀察到腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒對陽性血清的1-15%細(xì)胞的細(xì)胞核、胞漿或胞膜出現(xiàn)蘋果綠色熒光(在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同時(shí)觀察到著色的合胞)；軍團(tuán)菌、衣原體或立克次體中所有的細(xì)菌呈現(xiàn)出蘋果綠色熒光；支原體對陽性血清在細(xì)胞外圍呈現(xiàn)蘋果綠色熒光。陰性結(jié)果：可觀察到軍團(tuán)菌、肺炎衣原體和立克次體無熒光，支原體、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的細(xì)胞呈現(xiàn)紅色。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

使用Excel 進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，Pearson 法計(jì)算變量間的相關(guān)分析，顯著性水平為5%。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道感染病原體檢測結(jié)果

如表1 所示，在檢測的2520 例呼吸道感染患兒當(dāng)中，以肺炎支原體感染陽性為主，MP-IgM 占25.70%，其中陽性占19.36%，弱陽性占6.34%；其次為合胞病毒，RSV-IgM 占2.84%，陽性占2.57%，弱陽性占0.27%；流感病毒Influenza B-IgM 占0.74%，陽性占0.35%，弱陽性占0.369%；腺病毒Adenovirus-IgM 占0.47%；副流感病毒HPIVS-IgM 占0.11%；肺炎衣原體Cb-IgM 和Q 熱立克次體Cp-IgM 陽性占比最少，均占0.07%。

表1 黃石地區(qū)2520 例呼吸道九聯(lián)檢檢測結(jié)果分析

2.2 呼吸道感染與季節(jié)性發(fā)生相關(guān)性分析

春夏季為肺炎支原體感染高發(fā)季，明顯高于秋冬季，其次為合胞病毒、腺病毒感染；流感病毒和嗜肺軍團(tuán)菌感染主要在秋冬季，春夏季明顯要少，其他病原體感染未見明顯季節(jié)性差異(表2)。由此可見，患兒感染的呼吸道病原體類型與季節(jié)性密切相關(guān)。

表2 呼吸道病原體感染在季節(jié)性的陽性率結(jié)果

3 討論

盡管呼吸道病原的檢測方法多種多樣，但確診感染病原仍非常困難。細(xì)菌的病原體分離培養(yǎng)及病毒的培養(yǎng)組織細(xì)胞培養(yǎng)法過去常作為“金標(biāo)準(zhǔn)”。隨著快速診斷技術(shù)的迅速發(fā)展，分子檢測技術(shù)愈趨完善，已經(jīng)被作為呼吸道病原體檢測的新標(biāo)準(zhǔn)。近年來由于免疫技術(shù)的發(fā)展，特別是免疫標(biāo)記技術(shù)的廣泛應(yīng)用，如直接、間接免疫熒光法、抗堿性磷酸酶橋聯(lián)酶標(biāo)法等標(biāo)記技術(shù)，檢測方便，快速且成本低廉適，適合于臨床要求，因此在臨床上有重要意義。在婦兒醫(yī)院，常見兒童呼吸道感染患兒就診，通過呼吸道感染病原體的檢測，可以有效監(jiān)測和診斷兒童感染性肺炎以及其他呼吸道感染性疾病[5]，而檢測方法多種多樣，主要的方法有：細(xì)菌的病原體分離培養(yǎng)及病毒的培養(yǎng)組織細(xì)胞培養(yǎng)法，血清學(xué)和直接檢測法(包括電鏡法)；間接、直接免疫熒光抗體法(IFA/DFA)；酶免疫測(EIA)、核酸擴(kuò)增法(PCR)[6]。但像肺炎這樣難以診斷的臨床病例，應(yīng)該使用不同的診斷方法同時(shí)檢測，以獲得最佳的診斷結(jié)果，本研究采用間接免疫熒光法，對2520 例樣本檢測，總陽性率達(dá)到30.34%，這與國內(nèi)其他研究結(jié)果基本一致[7-9]。本研究結(jié)果顯示黃石地區(qū)呼吸道感染患兒當(dāng)中，以肺炎支原體感染陽性為主，MP-IgM 占28.6%，由此可見，肺炎支原體感染是兒童非特異性呼吸道病原體感染的主要類型之一。學(xué)齡兒童患病較多，學(xué)齡前兒童包括嬰幼兒也可發(fā)生肺炎支原體感染，本研究中嬰幼兒多發(fā)生肺炎支原體感染，由此可見嬰幼兒也是肺炎支原體感染的高風(fēng)險(xiǎn)人群，這與其他學(xué)者報(bào)道的結(jié)果一致[10-12]。

呼吸道合胞病毒是RNA 病毒，屬于副粘液病毒屬，雖然在5 歲兒童中有70%存在血清抗呼吸道合胞病毒的抗體，但感染仍可不斷發(fā)生于任何年齡[13]。血清抗體抗感染作用不很明顯的典型例子可見于6 個(gè)月以下的嬰兒，這類小兒的支氣管，肺均未發(fā)育成熟；雖然這些嬰兒具有母親的抗體，但仍能發(fā)生嚴(yán)重的下呼吸道疾病，導(dǎo)致病死數(shù)明顯上升，其感染癥狀差異很大[14]。本研究中顯示，合胞病毒感染占1.8%，相對于流感病毒發(fā)病率較高，但合胞病毒感染主要在春秋季節(jié)，而流感發(fā)病主要在秋冬季節(jié)，所以兩者在季節(jié)性發(fā)病流行趨勢明顯不同。黨秋菊等在對642 例住院患兒呼吸道九聯(lián)檢檢測結(jié)果表明，合胞病毒感染僅次于肺炎支原體和流感病毒[15]，這與我們的結(jié)果存在一定差異，可能與地區(qū)選取研究群體本身差異有關(guān)。

4 小結(jié)

整體而言，黃石地區(qū)兒童呼吸道感染以急性呼吸道感染為主，肺炎支原體陽性為主要類型。但為進(jìn)一步更好改善臨床對近期感染的患兒診療，還應(yīng)采集雙份樣本(急性期和康復(fù)期)同時(shí)檢測來觀察血清轉(zhuǎn)化或抗體水平的明顯升高。對患有自身免疫性疾病病人的血清，用IFA 檢測時(shí)，支原體、腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒，會在細(xì)胞上發(fā)生非特異性反應(yīng)等方法局限性仍有待進(jìn)一步改善。