小兒肺炎支原體血清學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)習(xí)帶教體會(huì)

藍(lán)紅云，謝 思，陳少艷，何 敏，何偉業(yè)

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510405）

肺炎支原體是大小介于細(xì)菌與病毒之間的一種病原微生物。肺炎支原體的致病機(jī)制通過(guò)它的頂端結(jié)構(gòu)從而粘附在受侵襲細(xì)胞的表面，且伸出肺炎支原體的微管刺入細(xì)胞內(nèi)吸取細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)、損傷細(xì)胞的細(xì)胞膜，最終釋放出核酸酶、蛋白酶、過(guò)氧化氫等代謝產(chǎn)物引起宿主細(xì)胞的溶解、腫脹與壞死。對(duì)肺炎支原體檢測(cè)技術(shù)這部分內(nèi)容學(xué)生在教材有過(guò)介紹但涉及不深，發(fā)現(xiàn)實(shí)習(xí)學(xué)生對(duì)于這部分內(nèi)容實(shí)踐操作起來(lái)比較難，對(duì)于這部分內(nèi)容臨床意義掌握不充分，不能很好向臨床解釋相關(guān)結(jié)果的臨床意義。針對(duì)這一現(xiàn)象，本文就小兒肺炎支原體實(shí)習(xí)帶教中總結(jié)了一些體會(huì)。

（1）從小兒肺炎支原體肺炎臨床癥狀嚴(yán)重性理論學(xué)習(xí)中帶教。引起小兒肺部炎癥的疾病因子中，肺炎支原體是其中最常見(jiàn)的一種疾病。小兒肺炎支原體肺炎病理變化是以間質(zhì)性肺炎為主，占小兒非細(xì)菌性肺炎的1/3，同時(shí)其發(fā)病率逐年升高的趨勢(shì)；小兒肺炎支原體患者，因?yàn)槟挲g比較小，而且自身免疫條件弱，微生物很容易侵襲，因而引發(fā)感染癥狀。而且小兒肺炎支原體的感染特別易引起咳嗽變異性哮喘，兩者疾病發(fā)生關(guān)系之間非常密切[1]，同時(shí)可能引起肺特異性肌痛、皮膚黏膜損傷；小兒肺炎支原體還可引起肺部以外的并發(fā)癥狀，甚至嚴(yán)重的時(shí)候可能引起多系統(tǒng)、多器官功能衰竭的嚴(yán)重后果，如消化、皮膚、關(guān)節(jié)、心肌炎、免疫性溶血性貧血、心包炎、腎炎、神經(jīng)、腦膜腦炎，甚至很可能導(dǎo)致死亡。因此，小兒支原體肺炎的早期診斷意義重大[2]。

（2）從肺炎支原體的檢測(cè)技術(shù)實(shí)際操作中帶教。肺炎支原體主要以二分裂繁殖，基因組單位小，因而限制了它的代謝能力，因此其繁殖較慢，普通的微生物分離培養(yǎng)大約需7 d，因而缺乏早期臨床診斷價(jià)值[3-4]。小兒患者在感染肺炎支氣管肺炎后具有特異性的IgG和IgM會(huì)出現(xiàn)，在發(fā)生感染1個(gè)月時(shí)間，它的抗體濃度達(dá)到最高峰，緊接著逐漸下降。對(duì)抗體指標(biāo)變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)，從而可對(duì)炎癥反應(yīng)及患者病情程度進(jìn)行相關(guān)反饋，為臨床醫(yī)師診斷治療提供依據(jù)。根據(jù)指標(biāo)滴度變化，適當(dāng)可以調(diào)整用藥劑量，從而提高患者的治療效果[5]。

肺炎支原體血清學(xué)實(shí)驗(yàn)是肺炎支原體血清學(xué)被動(dòng)凝集法檢測(cè)IgG和IgM復(fù)合型抗體通過(guò)采用肺炎支原體細(xì)胞膜組成成份致敏人工明膠粒子而成，與被檢測(cè)者血清中的肺炎支原體抗體發(fā)生被動(dòng)凝集反應(yīng)；被動(dòng)凝集反應(yīng)結(jié)果判斷：粒子環(huán)明顯變大、其外周邊緣不均勻且雜亂地凝集在周圍為陽(yáng)性，本實(shí)驗(yàn)中以≥1∶80為陽(yáng)性；顆粒呈紐扣狀、呈現(xiàn)出外周邊緣均勻且平滑的圓形為陰性。

（3）從分析肺炎支原體檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)來(lái)帶教。患者被肺炎支原體感染后，經(jīng)過(guò)免疫反應(yīng)人體內(nèi)首先產(chǎn)生IgM，隨后產(chǎn)生SIgA和IgG?？狗窝字гwIgM是機(jī)體受肺炎支原體感染時(shí)最早出現(xiàn)的特異性抗體。檢測(cè)MP-IgM后研究表明發(fā)現(xiàn)在兒童首次感染肺炎支原體時(shí)其效價(jià)滴度不高，因此臨床上成為無(wú)明顯臨床表現(xiàn)癥狀的隱匿性感染人群。研究者經(jīng)過(guò)大量的動(dòng)物試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)免疫后的動(dòng)物第一次肺炎支原體感染一年之后會(huì)再一次發(fā)生比較嚴(yán)重的肺炎。對(duì)肺炎支原體的培養(yǎng)，因此能直接查到肺炎支原體，但是培養(yǎng)方法受到方法要求嚴(yán)格以及檢出率很低等方面的限制，因而大大限制了培養(yǎng)方法在臨床中應(yīng)用，特別在疾病早期診治中的推廣應(yīng)用。核酸擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)的缺點(diǎn)是因?yàn)槠洳灰揽恐гw是否存活，因而陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能區(qū)別是感染攜帶者、無(wú)癥狀感染和急性感染。核酸擴(kuò)增檢測(cè)方法的雖提升了檢測(cè)的特異性和敏感性，但是實(shí)驗(yàn)假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果較高。肺炎支原體血清學(xué)被動(dòng)凝集法與膠體金法兩種方法在臨床上均具有相當(dāng)大的作用，尤其是肺炎支原體被動(dòng)凝集法。臨床常用被動(dòng)凝集法試驗(yàn)具有敏感度較高、特異性較強(qiáng)、快速、方法學(xué)簡(jiǎn)單以及操作起來(lái)比較簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。急性期及恢復(fù)期的雙份血清中，肺炎支原體特異性抗體滴度呈4倍或者4倍以上增高或減低均可診斷為肺炎支原體感染。而且顆粒凝集試驗(yàn)特異性抗體滴度≥1：160可是診斷肺炎支原體近期感染的依據(jù)。

實(shí)習(xí)階段是檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)從業(yè)者走上工作崗位相當(dāng)重要的環(huán)節(jié)，本文通過(guò)帶教學(xué)生學(xué)習(xí)理論知識(shí)以及實(shí)際操作，同時(shí)跟進(jìn)學(xué)生反饋教學(xué)意見(jiàn)的方式，通過(guò)這種方式對(duì)實(shí)習(xí)教學(xué)進(jìn)行改革和發(fā)展，以便提高了臨床實(shí)習(xí)的質(zhì)量，培養(yǎng)出更加優(yōu)秀檢驗(yàn)人才，為走上臨床檢驗(yàn)工作崗位打下良好的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐基礎(chǔ)。