不同產(chǎn)地川澤瀉質(zhì)量比較研究

代仕梅 李華仙 高宇明 何琴 吳秀清

【摘?要】?目的： 比較四川省內(nèi)不同產(chǎn)地澤瀉藥材的質(zhì)量。方法：收集來自于澤瀉道地產(chǎn)區(qū)眉山、樂山的34批川澤瀉樣品，采用熱浸法、高效液相色譜法（HPLC）檢測澤瀉藥材中水分、灰分、醇溶性浸出物、23-乙酰澤瀉醇B的含量，比較四川省內(nèi)不同產(chǎn)地川澤瀉藥材質(zhì)量差異。 結(jié)果：眉山市彭州區(qū)澤瀉的灰分最低、23-乙酰澤瀉醇C的含量最高，樂山市夾江縣澤瀉的醇溶性浸出物含量最高，眉山市東坡區(qū)澤瀉水分最低。結(jié)論：四川省澤瀉藥材總體質(zhì)量較優(yōu)，但不同產(chǎn)地藥材在指標性成分含量上存在一定差異。

【關(guān)鍵詞】?澤瀉;質(zhì)量;差異

【中圖分類號】R284.1?【文獻標志碼】 A?【文章編號】1007-8517（2020）19-0033-06

Abstract：Objective To compare the quality of Alismatis Rhizoma from different areas in Sichuan. Methods 34 batches of Alismatis Rhizoma samples were obtained from Meishan and Leshan. The hotdip method and HPLC were applied to determine the content of water， ash， alcohol-soluble extractives and 23-acetylazerexol B in Alismatis Rhizoma， which to compare the different of quality of Alismatis Rhizoma from different areas in Sichuan. Results The content of ash was lowest and the content of 23-acetylazerexol B was highest in Alismatis Rhizoma from Pengzhou District of Meishan. The content of alcohol-soluble extractives in Alismatis Rhizoma from Jiajiang County of Leshan. The content of water in Alismatis Rhizoma from Dongpo District of Meishan. Conclusion Alismatis Rhizoma from different areas has definite difference in quality， but the overall quality is stable.

Key?words：Alismatis Rhizoma;Quality;Difference

澤瀉為澤瀉科植物澤瀉 Alisma orientale（Sam.）Juzep.的干燥塊莖，其藥材呈類球形、橢圓形或卵圓形，具有利水滲濕、泄熱、化濁降脂之功效[1]，臨床上可用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高脂血癥等?；瘜W研究表明，澤瀉的化學成分主要為三萜和倍半萜，其中三萜為主要活性成分[2-3]。藥理學研究表明，澤瀉的水浸物、醇浸物及三萜類成分，如澤瀉醇A、澤瀉醇B、24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B等具有利尿[4]、抗結(jié)石[4]、降血糖[6]、降血脂[7]和抗氧化損傷[8]等多種作用。由于產(chǎn)地澤瀉的栽培技術(shù)及生態(tài)環(huán)境不同，藥材生長性及內(nèi)在品質(zhì)也有差異[9]。澤瀉在溫帶、亞熱帶地區(qū)均可生長，被廣泛種植于江西、廣東、廣西、福建、四川等地，是川、閩的道地藥材[10]。目前關(guān)于全國各地澤瀉藥材對比的報道較多[11]，四川省內(nèi)不同產(chǎn)地澤瀉藥材質(zhì)量對比的較少。為此，本研究收集了34批四川的4個主要澤瀉產(chǎn)地的栽培澤瀉樣品，對其水分、灰分、醇溶性浸出物、23-乙酰澤瀉醇B的含量進行分析，以評價不同產(chǎn)地川澤瀉的質(zhì)量，為保證川澤瀉藥材質(zhì)量穩(wěn)定提供技術(shù)依據(jù)。

1?儀器與試劑試藥

1.1?儀器?MS205DU電子分析天平（梅特勒托利多）;高效液相色譜儀（Agilent Technologies 1260 Infinity）;電熱鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）;紫外-可見分光光度計（上海汗諾儀器有限公司）;電熱恒溫水浴鍋（北京中興偉業(yè)世紀儀器有限公司）。

1.2?試劑試藥?23-乙酰澤瀉醇B對照品（中國食品藥品檢定研究院111846-201705），乙腈、甲醇為色譜純（Fisher公司），水為注射用水，其他為分析純。

1.3?藥材?藥材采集于四川省內(nèi)眉山、樂山2個產(chǎn)地共34批，由資陽市食品藥品檢驗檢測中心吳秀清主任中藥師鑒定為澤瀉Alisma orientale（Sam.）Juzep.，采樣信息見表1。

2?方法

2.1?水分、灰分、浸出物測定方法?參照《中國藥典》（2015年版）四部通則0832項下第二法測定各樣品的水分[12]103;參照《中國藥典》（2015年版）四部通則2302項下的灰分測定法測定各樣品的灰分含量[12]204;參照《中國藥典》（2015年版四部通則2201） 項下的醇溶性浸出物測定法熱浸法以乙醇為溶劑測定醇溶性浸出物含量[12]202。

2.2?含量測定方法?參照《中國藥典》（2015年版）一部中澤瀉含量測定項下測定法測定23-乙酰澤瀉醇B的含量[1]。

2.2.1?對照品儲備液制備?取23-乙酰澤瀉醇B 對照品適量，加乙腈制成每1 mL含100 μg的儲備液。

2.2.2?供試品溶液制備?取澤瀉粉末（過五號篩）約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙腈25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率50 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用乙腈補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.2.3?色譜條件?選用XselectR Hss T3 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱，乙腈-水（73∶27）為流動相，等度洗脫;流速1.0 mL·min-1，檢測波長208 nm，柱溫：30 ℃，進樣量10 μL。23-乙酰澤瀉醇B含量測定圖譜如圖1所示。

2.2.4?線性關(guān)系考察?分別精密吸取取2.2.1項下儲備液1、1、5、8、10 mL，置于100、10、10、10、10 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，配制成濃度為1 μg/mL、10 μg/mL、50μg/mL、80 μg/mL、100 μg/mL的系列標準溶液，按上述色譜條件測定，以峰面積與對照品濃度進行線性回歸，得回歸方程為Y=0.4219x+0.6691，相關(guān)系數(shù)r=0.9997，線性范圍：0.99 ～98.80 μg/mL，表明對照品與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.5?精密度考察?精密吸取23-乙酰澤瀉醇B對照品溶液，按上述色譜條件重復進樣6次，測定峰面積積分值，計算23-乙酰澤瀉醇B峰面積的RSD為0.20%，表明儀器精密度良好。

2.2.6?穩(wěn)定性實驗?取1號澤瀉樣品按2.2.2項下方法制備供試品溶液，按照2.2.3項下的方法，分別在在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h進樣測定，計算23-乙酰澤瀉醇B峰面積的RSD為1.34%，表明樣品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.7?重復性實驗?取1號澤瀉藥材樣品6份，按2.2.2項下方法制備供試品溶液，采用2.2.3項下液相色譜條件，分別進樣測定，計算23-乙酰澤瀉醇B含量，分別為：0.2508%、0.2493%、0.2511%、0.2499%、0.2516%、0.2480%，RSD為0.53%，表明該方法的重復性良好。

2.2.8?加標回收率實驗?精密稱取1號澤瀉藥材樣品6份，每份約0.25 g，分別精密加入23-乙酰澤瀉醇B標準儲備溶液5.80 mL，再精密加入乙腈24.20 mL，按照2.2.2項下方法制備供試品溶液，用2.2.3項下液相色譜條件，分別進樣測定，計算23-乙酰澤瀉醇B含量，結(jié)果23-乙酰澤瀉醇B平均回收率為100.77%，RSD為1.90%，表明該方法準確可靠，可用于澤瀉的含量測定。加標回收率結(jié)果見表2。

3?結(jié)果與分析

3.1?結(jié)果與分析?不同產(chǎn)地澤瀉水分、灰分、醇溶性浸出物、23-乙酰澤瀉醇B含量結(jié)果見表3。

《中國藥典》（2015年版）一部規(guī)定澤瀉藥材水分不得過14.0%，灰分不得過5.0%，醇溶性浸出物不得少于10.0%，23-乙酰澤瀉醇B不得少于0.050%[15]。各產(chǎn)地澤瀉中水分、灰分、醇溶性浸出物、23-乙酰澤瀉醇B含量如表2。結(jié)果表明，四川省內(nèi)各產(chǎn)區(qū)澤瀉的灰分和23-乙酰澤瀉醇B含量無顯著差異，水分和醇溶性浸出物差異較大，水分范圍為7.3%～12.3%，灰分范圍為2.2%～3.3%，醇溶性浸出物含量范圍為13.6%～28.4%，23-乙酰澤瀉醇B含量范圍為0.209%～0.334%，其主要含量均達到藥典標準，且各產(chǎn)區(qū)澤瀉的醇溶性浸出物和23-乙酰澤瀉醇B均遠遠高于藥典標準要求。

將34批澤瀉醇溶性浸出物含量和23-乙酰澤瀉醇B含量結(jié)果導入SPSS17.0軟件，進行簡單分布散點分析，結(jié)果如圖2、圖3所示。從圖2和圖3可以看出，眉山東坡區(qū)白馬鎮(zhèn)樣品醇溶性浸出物和23-乙酰澤瀉醇B含量較低;樂山夾江甘霖鎮(zhèn)樣品浸出物含量較高，但23-乙酰澤瀉醇B含量較低;夾江縣產(chǎn)澤瀉整體23-乙酰澤瀉醇B含量低于眉山彭山區(qū)和樂山五通橋區(qū)。

3.2?川澤瀉浸出物含量和指標成分含量聚類分析?采用SPSS17.0軟件中K-均值聚類法，結(jié)合34批川澤瀉藥材中醇溶性浸出物和23-乙酰澤瀉醇B含量進行聚類分析，結(jié)果見表4。根據(jù)聚類分析結(jié)果，可把藥材分為2組，第1組包括1～9、11～23、25～28、30、32～34號樣品，第2組為10、24、29、31號樣品，主要包括彭山謝家鎮(zhèn)、夾江三洞鎮(zhèn)、夾江黃土鎮(zhèn)、夾江甘霖鎮(zhèn)。

4?討論

本次研究分別對四川眉山東坡區(qū)、眉山彭州區(qū)、樂山夾江縣、樂山五通橋區(qū)所產(chǎn)澤瀉中水分、灰分、醇溶性浸出物和23-乙酰澤瀉醇B含量進行測定。研究結(jié)果顯示，按藥典標準評判，本文所檢測四川省4個產(chǎn)區(qū)川澤瀉整體質(zhì)量水平較高，僅23-乙酰澤瀉醇B含量最低者也為藥典標準的4倍左右。同時也可以發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地樣品質(zhì)量存在較大差異，其中眉山市彭州區(qū)澤瀉的灰分低于其他產(chǎn)區(qū)，眉山市東坡區(qū)澤瀉水分低于其他產(chǎn)區(qū)，眉山東坡區(qū)白馬鎮(zhèn)樣品醇溶性浸出物和23-乙酰澤瀉醇B含量較低;樂山夾江甘霖鎮(zhèn)樣品浸出物含量較高，但23-乙酰澤瀉醇B含量較低;夾江縣產(chǎn)澤瀉整體23-乙酰澤瀉醇B含量低于眉山彭山區(qū)和樂山五通橋區(qū)。聚類分析結(jié)果表明，東坡、彭州、夾江、五通橋產(chǎn)川澤瀉指標成分含量存在一定差異，34批樣品有4批單獨聚為一類，其中3批產(chǎn)自夾江，說明夾江產(chǎn)澤瀉有一定地域特點。以上可能是土壤、水質(zhì)、氣候、種植習慣等因素影響的結(jié)果，具體影響程度還有待進一步研究。

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（收稿日期：2020-05-09?編輯：程鵬飛）