□ 李永盼 河南華測檢測技術有限公司
喹諾酮類藥物是一種淡黃色或白色晶體,是一種兩性物質,于弱酸弱堿性溶液中溶解度較高,易溶于如乙腈、乙醇、三氯乙酸等有機溶液中,是近些年形成的一種合成抗菌類藥物,喹諾酮類藥物主要是通過抑制細菌DNA旋轉酶,從而抑制細菌DNA的復制、轉錄等,也可抑制拓撲異構酶IV對細菌染色體保護作用,使細菌無法繁殖而呈現(xiàn)出抗菌性,因其抗菌活性較強,抗菌譜廣,可廣泛作用于機體各部位,使用效果較好,因此在食源性動物中的應用較為廣泛[1]。
由于氟喹諾酮類藥物具有較高的抗菌作用,在養(yǎng)殖業(yè)的使用較為廣泛。在疾病治療過程中,用藥量小,不能達到很好的治療效果,用藥量大會在一定程度上加大病菌對其的抵抗能力。
此類藥物半衰期較長,如用藥量大,在動物體內會有部分殘留,隨之會有部分轉移到雞蛋中,其會對雞蛋的營養(yǎng)質量造成影響,使營養(yǎng)成分遭到破壞,且伴隨有其他的不良產(chǎn)物,人們食用此類雞蛋后,藥物會轉移富集到人體內,對人的消化系統(tǒng)造成傷害,出現(xiàn)惡心、嘔吐等等現(xiàn)象;此類藥物會對人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成影響,導致人出現(xiàn)失眠、頭痛驚厥等癥狀,重者還會引發(fā)皮疹、肝腎中毒;喹諾酮類藥物回歸到生態(tài)系統(tǒng)中,會對生態(tài)環(huán)境造成破壞[2]。因此對于動物源性食品中此類藥物殘留的檢測問題越來越受到大家的關注。
酶聯(lián)免疫吸附是一種較為常見的生物檢測技術手段,該方法方便快捷,簡單易操作,對于快速篩選具有很重要意義。但同時此種方法的特異性較強,在酶催化作用下,底物發(fā)生有色反應,以此來判斷待測樣品中藥物的含量。但該方法對抗體的特異性要求較高,且對酶的靈敏度和活性有較高的要求。
高效液相色譜法作為一種新型高效準確的檢測技術,具有高靈敏度、準確度、精確度等特點。該技術是在高壓條件下,向色譜柱中注入流動相液體,經(jīng)由高效分析色譜柱和高敏感檢測器檢測,從而建立起來的一種液相分離分析方法。超高效液相色譜相較于高效液相色譜的優(yōu)點在于:有高性能微粒固定相,增大固定相顆粒的比表面積,更有利于物質等的分離;超高壓輸液泵,因色譜柱粒徑減小,使得色譜輸液系統(tǒng)的壓力變大,故要相應的提高輸液泵的壓力;低擴散、低交叉污染的自動進樣器;更高效靈敏的檢測器;運轉高效,簡潔方便的色譜工作站。
雖然超高效液相色譜較普通高效色譜具有更高的靈敏度和分離度,縮短了分析時間,但因其儀器內部壓力過高,也相應會出現(xiàn)儀器部件老化速度更快,泵使用壽命更短等問題。但是液相色譜法在喹諾酮類藥物檢測過程中,前處理操作繁瑣,檢測耗時較長,對多種藥物同時檢測時,分離效果不好,不太適合一些藥物的痕量檢測,也不適合大批量檢測。
伴隨著科技的不斷進步,高效液相色譜串聯(lián)質譜法逐漸成為藥物殘留檢測的主要分析方法。質譜分析是先將物質離子化,按離子的質荷比分離,然后測量各種離子譜峰的強度從而實現(xiàn)分析目的的一種分析方法。質譜的樣品一般要汽化,再離子化,離子在電場和磁場的綜合作用下,按照其質量數(shù)m和電荷數(shù)Z的比值(m/z,質荷比)按照大小依次排列成譜被記錄下來,以檢測器檢測到的離子信號強度為縱坐標,離子質荷比為橫坐標而得到質譜圖。高效液相色譜串聯(lián)質譜法能更高效的完成檢測任務,滿足日常檢測工作中對痕量殘留的檢測要求。
因效液相色譜串聯(lián)質譜儀具有較高的分辨率和更低的檢出限,對雞蛋中的喹諾酮類藥物有很高的分離度,殘留檢測精確度更高。對于檢測和確證樣品中的喹諾酮類藥物具有很大幫助。但是因為雞蛋的脂肪和蛋白含量高,前處理過程中要將其除去,對前處理的要求較高。從保護儀器的角度出發(fā),因為雞蛋中較高的蛋白和脂肪含量,在質譜離子化過程中會產(chǎn)生一定的基質效應,如果凈化不好,易污染儀器,降低分析背景,干擾分析結果。
動物源性食品中喹諾酮類藥物殘留檢測方法有很多,實際工作中要合理選擇方法,保證工作效率等的同時也要確保檢測準確、簡便、快捷。酶聯(lián)免疫雖然簡單快捷,特異性強,但靈敏度不夠,常常會出現(xiàn)假陽性,可用于大批量樣品的初篩工作。高效液相色譜法雖然前處理操作繁瑣,儀器成本高,但精確度較高,能滿足一般的檢測任務需求。