一種新型過(guò)氧化氫傳感器的構(gòu)建及其在牛奶中的應(yīng)用

徐軍軍,吳甜甜,席慧婷,葉璀珠,鄧丹雯,黃贛輝(南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西南昌 330047)

過(guò)氧化氫(H2O2)作為防腐劑在食品加工和環(huán)境分析中具有重要的意義[1]。研究表明,過(guò)量的過(guò)氧化氫會(huì)影響牛奶中酪蛋白和血清蛋白的質(zhì)量,從而降低原料奶的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;除此之外過(guò)氧化氫具有致癌、加速細(xì)胞衰老等毒副作用,損害消費(fèi)者的經(jīng)濟(jì)利益和健康[2]。因此,很多國(guó)家明確規(guī)定禁止在乳制品中添加過(guò)氧化氫?，F(xiàn)有的過(guò)氧化氫檢測(cè)技術(shù)主要包括分光光度法[3]、化學(xué)發(fā)光法[4]、電化學(xué)發(fā)光法[5]、色譜法[6]等,但這些方法存在靈敏度低、操作復(fù)雜、儀器昂貴等缺點(diǎn)。電化學(xué)傳感器技術(shù)由于其具有選擇性好、靈敏度高、制備工藝簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于臨床和食品檢測(cè)中[7]。研究已報(bào)道Hb/PdNPs/GR-CS/GCE[8]、Hb/sol-gel/CPE[9]、Hb-collagen-CNTs[10]被構(gòu)建成電化學(xué)生物傳感器用于檢測(cè)過(guò)氧化氫,表現(xiàn)出良好的檢測(cè)限和靈敏性。但這些傳感器是將功能性材料滴涂在電極表面,修飾材料易脫落而降低傳感器的穩(wěn)定性。因此研制出一種新型具有高靈敏性、穩(wěn)定性的過(guò)氧化氫傳感器具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

血紅蛋白(Hb)對(duì)過(guò)氧化氫具有良好的催化活性,可作為辣根過(guò)氧化物酶在H2O2生物傳感器中的理想替代品[11-12]。然而,血紅蛋白的氧化還原活性中心位于蛋白質(zhì)的深層結(jié)構(gòu),這意味著血紅蛋白與電極表面間的電子傳遞效率低[11]。因此,選擇一種具有良好生物相容性的功能材料固載血紅蛋白以保持其生物活性,促進(jìn)其活性中心與電極之間的電子轉(zhuǎn)移是非常必要的。金屬納米粒子及其氧化物因其比表面積大、生物相容性好、吸附能力強(qiáng)而受到廣泛關(guān)注[13-15]。納米鎳[16]、納米銀[17]及其氧化物、ZnO[18]等貴金屬常被用于構(gòu)筑電化學(xué)傳感器的材料用于食品和臨床檢測(cè);其中,金納米顆粒具有良好的導(dǎo)電性和生物相容性,可以促進(jìn)Hb電活性中心與電極間的直接電子轉(zhuǎn)移[19]。同時(shí),聚吡咯(Ppy)是一種獨(dú)特的導(dǎo)電聚合物,具有良好的導(dǎo)電性、穩(wěn)定性和生物相容性,是固定化酶或蛋白質(zhì)的優(yōu)良材料底物,廣泛用于修飾材料以提高電化學(xué)生物傳感器的導(dǎo)電性[20]。

本文在以聚吡咯膜為基底的玻碳電極上沉積納米金顆粒并吸附血紅蛋白制備Hb/AuNPs/GCE傳感器,開發(fā)一種新型過(guò)氧化氫電化學(xué)傳感器,研究該傳感器的靈敏性、選擇性和穩(wěn)定性,并將其用于檢測(cè)牛奶中過(guò)氧化氫的檢測(cè),為傳感器的實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供更多的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

鐵氰化鉀、亞鐵氰化鉀 天津大茂試劑有限公司;硫酸 天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;氯化鉀、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、過(guò)氧化氫(w/v=30%)汕頭西隆化工有限公司;氯金酸、吡咯、抗壞血酸、多巴胺、尿酸和L-半胱氨酸 阿拉丁試劑有限公司;牛血紅蛋白(99%) Salebo有限公司;牛奶 陽(yáng)光乳業(yè)有限公司提供;電極 上海仙人儀器有限公司。

S-3400N場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡 日本電子股份有限公司；Agilent5500原子力顯微鏡 美國(guó)Agilent technologies；ESCALAB250 X射線光電子能譜 美國(guó)Thermo Fisher Scientific;石英晶體微天平(CHI440) 上海辰華儀器有限公司

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 修飾電極的制備 參考Chen 等[21]的方法對(duì)裸玻電極進(jìn)行預(yù)處理。以經(jīng)預(yù)處理的玻碳電極為工作電極,鉑(Pt)電極為輔助電極、飽和甘汞電極(HgCl2)為參比電極構(gòu)成三電極體系。配制0.1 mol/L KCl溶液,在10 mL KCl溶液中添加1 mL 新蒸吡咯,首先,將三電極體系垂直放置在含0.2 mol/L的吡咯單體的0.1 mol/L KCl溶液為支持電解液中,充氮驅(qū)氧10 min。運(yùn)用恒電位法聚合吡咯,恒電位法采用多電位階躍中的單一電位,設(shè)定聚合電位為0.8 V,初始電位根據(jù)開路電位方法設(shè)置為0.25 V,間隔時(shí)間為0.002 s,控制聚合電量手動(dòng)終止。將得到的電極記為Ppy/GCE電極置于含1 mL HAuCl4的0.1 mol/L KNO3,設(shè)置循環(huán)伏安電位窗口為-0.2～1.0 V,掃描速度為10 mV/s,掃描圈數(shù)為5,使納米金顆粒沉積在修飾電極上,得到的修飾電極記為AuNPs/Ppy/GCE。用超純水洗凈后垂直放置于含10 mg/mL牛血紅蛋白的磷酸緩沖溶液中浸泡2 h,利用靜電吸附作用力和Au-SH共價(jià)鍵作用使血紅蛋白固載在納米金顆粒上,得到的電極記為Hb-AuNPs/Ppy/GCE。

1.2.2 Hb/NPs/Ppy/GCE制備條件優(yōu)化 本文研究吡咯聚合電量、磷酸緩沖液pH、支持電解質(zhì)pH、差分脈沖伏安法脈沖周期對(duì)Hb/AuNPs/Ppy/GCE響應(yīng)電流的影響。

1.2.2.1 脈沖周期優(yōu)化 選定吡咯聚合電量1.0×10-3、磷酸緩沖溶液pH7.0、支持電解質(zhì)pH7.0時(shí),脈沖周期分別為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5,以差分脈沖伏安法響應(yīng)電流為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究脈沖周期對(duì)傳感器檢測(cè)效果的影響。

1.2.2.2 吡咯聚合電量?jī)?yōu)化 選定磷酸緩沖液pH7.0、支持電解質(zhì)pH7.0、脈沖周期0.3,吡咯聚合電量分別為1.0×10-3、1.5×10-3、2.0×10-3、2.5×10-3、3.0×10-3、3.5×10-3C,以差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究吡咯聚合電量對(duì)傳感器檢測(cè)效果的影響。

1.2.2.3 磷酸緩沖溶液pH優(yōu)化 選定吡咯聚合電量1.0×10-3、支持電解質(zhì)pH7.0、脈沖周期0.3時(shí),磷酸緩沖溶液pH分別為6.0、6.5、7.0、7.5、8.0,以差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究磷酸緩沖溶液pH對(duì)傳感器檢測(cè)效果的影響。

1.2.2.4 支持電解質(zhì)pH優(yōu)化 選定吡咯聚合電量1.0×10-3、磷酸緩沖液pH7.0、脈沖周期0.3,支持電解質(zhì)pH分別為3.0、4.0、5.0、6.0、7.0,以差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流為評(píng)價(jià)指標(biāo),研究支持電解質(zhì)溶液pH對(duì)傳感器檢測(cè)效果的影響。

1.2.3 Hb/AuNPs/Ppy/GCE修飾電極的物理表征

1.2.3.1 SEM表征 在上述最優(yōu)條件下制備修飾電極,將樣品在37 ℃烘箱中干燥1 h,將干燥的電極頭固定在樣品臺(tái)上,利用環(huán)境掃描電鏡在低中空模式下進(jìn)行掃描,選擇執(zhí)行電壓15.0 kV,放大倍數(shù)為50.0 K觀察修飾電極的微觀結(jié)構(gòu)。

1.2.3.2 AFM表征 在上述最優(yōu)條件下制備修飾電極,將樣品在37 ℃烘箱中干燥1 h。將干燥的電極頭固定在樣品臺(tái)上,采用原子力顯微鏡在真空下對(duì)樣品進(jìn)行觀測(cè),探針共振為330 kHz,固定力大小為48 N/m,速率為0.6 Hz,測(cè)試溫度為25 ℃。

1.2.3.3 XPS表征 在上述最優(yōu)條件下制備修飾電極,將樣品在37 ℃烘箱中干燥1 h。將干燥的電極頭固定在樣品臺(tái)上,利用ESCALAB 250型X射線能譜儀在真空條件下對(duì)修飾電極的組成元素進(jìn)行分析,可以準(zhǔn)確的判斷各材料是否成功的修飾到電極表面。

1.2.4 Hb/AuNPs/Ppy/GCE修飾電極的電化學(xué)表征

1.2.5 過(guò)氧化氫檢測(cè)方法 以玻碳電極為基底的修飾電極為工作電極、鉑電極為輔助電極,飽和甘汞電極作為參比電極構(gòu)成三電極體系。差分脈沖伏安法(DPV)的檢測(cè)電位窗口為-0.8～0 V,支持電解質(zhì)為0.1 mol/L KCl溶液。評(píng)價(jià)指標(biāo)為DPV方法的響應(yīng)電流。

1.2.6 樣品處理及檢測(cè) 參考Karimi等[22]的牛奶預(yù)處理方法,將20 mL 1 mol/L H2SO4與80 mL牛奶混合,離心(20 min,8000 rad/s),收集上清液,用1 mol/L NaOH調(diào)整溶液pH為7.0,得到牛奶標(biāo)準(zhǔn)溶液。在牛奶標(biāo)準(zhǔn)樣液中分別添加10、20、50、100 μmol/L H2O2,根據(jù)差分脈沖伏安法所得到的響應(yīng)電流計(jì)算該傳感器在牛奶樣品中檢測(cè)過(guò)氧化氫的加標(biāo)回收率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

以上實(shí)驗(yàn)均平行三次,從CHI440C石英晶體微天平中將原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出到Excel,經(jīng)分列等處理后,導(dǎo)入到Origin 8.0專業(yè)作圖軟件繪制圖形。

2 結(jié)果與分析

2.1 修飾電極的物理表征

2.1.1 SEM表征 如圖1A1所示,Ppy/GCE表面呈現(xiàn)凸起的海島狀結(jié)構(gòu),這表明聚吡咯膜修飾成功,該結(jié)構(gòu)能夠增膜的比表面積,從而固載更多的納米金顆粒。較Ppy/GCE而言,AuNPs/Ppy/GCE修飾電極的表面形貌發(fā)生了明顯的變化,一層球狀顆粒均勻的分布在聚吡咯膜上(圖1A2)。X射線能譜對(duì)AuNPs/Ppy/GCE修飾電極的組成元素進(jìn)行表征,如圖1A3所示,其主要組成元素為C和Au,其中C元素可能來(lái)源于聚吡咯膜或者GCE,而Au元素只可能來(lái)自金,表明金顆粒成功地修飾到電極表面。

2.1.2 AFM表征 圖1B展示了各修飾電極的AFM形貌,圖1B1也展示了Ppy/GCE修飾電極海島狀結(jié)構(gòu),與SEM表征結(jié)果一致,聚吡咯膜的厚度約為11 nm,海島狀的結(jié)構(gòu)極大的增加其比表面積,這為固載納米金顆粒提供更多的結(jié)合位點(diǎn)。圖1B2表面均勻地分布著30 nm左右的球狀顆粒,可能是納米金顆粒。Hb/AuNPs/Ppy/GCE表面密集的分布著直徑約為15 nm左右顆粒,極有可能為血紅蛋白(圖1B3)。

2.1.3 XPS表征 XPS用來(lái)表征各電極修飾材料的組成元素,結(jié)果如圖1C所示,Ppy的組成元素為C、N、O(圖1C1),其中C既可能來(lái)自于聚吡咯膜,也可能來(lái)自于玻碳電極中的C。AuNPs/Ppy的組成元素為Au、C、O,而且Au所占的比例很大(圖1C2)表明納米金顆粒成功到沉積到電極表面,同時(shí)也驗(yàn)證了SEM和AFM表征圖中均勻分布的粒徑約為30 nm的球狀顆粒為納米金粒子。Hb/AuNPs/Ppy的XPS譜圖中Au所占的比例大幅度減少,相反,O和N的比例均增加,同時(shí)Fe元素出現(xiàn)在能譜圖中,這些事實(shí)表明血紅蛋白成功的吸附在納米金顆粒上。

圖1 各修飾電極的物理表征Fig.1 Physical characterization of modified electrode注:A為修飾電極的SEM圖(A1:Ppy/GCE,A2:AuNPs/Ppy/GCE,A3:能譜圖);B為AFM圖(B1:Ppy/GCE,B2:AuNPs/Ppy/GCE,B3:AuNPs/Ppy/GCE);C為XPS圖(C1:Ppy/GCE,C2:AuNPs/Ppy/GCE,C3:AuNPs/Ppy/GCE)。

2.2 修飾電極的電化學(xué)表征

2.2.3 傳感器催化能力測(cè)試 圖2C展示了各修飾電極在含有1 mmol/L H2O2的KCl溶液中的循環(huán)伏安曲線,GCE在-0.8V左右出現(xiàn)一個(gè)小而寬的還原峰,表明玻碳電極在通電條件下能夠使過(guò)氧化氫分解(曲線4),AuNPs/Ppy/GCE的還原峰響應(yīng)電流增加,表明聚吡咯和納米金顆粒對(duì)過(guò)氧化氫具有一定的催化能力。曲線1展示了Hb/AuNPs/Ppy/GCE的循環(huán)伏安曲線,還原峰響應(yīng)電流顯著增加,約為裸玻碳電極的6.2倍,表明血紅蛋白對(duì)過(guò)氧化氫具有良好的催化效果。與此同時(shí),循環(huán)伏安法被用來(lái)研究Hb/AuNPs/Ppy/GCE修飾電極在添加H2O2前后的KCl溶液的電化學(xué)行為。如圖2D所示,在不含過(guò)氧化氫條件下,較小的氧化峰和還原峰出現(xiàn)在分別約為-0.42和-0.48 V(曲線a),這是典型的血紅蛋白氧化還原峰[23]。當(dāng)在支持電解質(zhì)中添加1 mmol/L H2O2后,陽(yáng)極峰消失,陰極峰電流顯著增加(曲線b),這是因?yàn)檠t蛋白催化過(guò)氧化氫還原促使H2O2的還原峰顯著增加,其機(jī)理可以概括為血紅蛋白中的Hb-Fe2+被過(guò)氧化氫氧化轉(zhuǎn)化為Hb-Fe3+,又迅速在電極表面被還原成Hb-Fe2+[24-25]。

圖2 各修飾電極的電化學(xué)表征Fig.2 electrochemical characterization of each modified electrode注:A為各修飾電極在含0.1 mol/L KCl的5 mmol/L 溶液中的循環(huán)伏安曲線,B為各修飾電極的EIS圖,C為各修飾滴電極在含有1 mmol/L H2O2的KCl溶液中的循環(huán)伏安曲線。D為Hb/AuNPs/Ppy/GCE在含有或不含H2O2的KCl溶液中的循環(huán)伏安曲線。(a為不含H2O2,b為含H2O2)。

2.3 傳感器參數(shù)優(yōu)化

2.3.1 脈沖周期的選擇 不同脈沖周期對(duì)Hb/AuNPs/Ppy/GCE傳感器的電流響應(yīng)圖如圖3A所示,傳感器的響應(yīng)電流值隨脈沖周期的增加先變大后減小,在差分脈沖伏安法的脈沖周期為0.2 s時(shí),傳感器的響應(yīng)電流值最大,因此,本實(shí)驗(yàn)的差分脈沖伏安的脈沖周期選定為0.2 s。

2.3.2 吡咯聚合電量的選擇 吡咯聚合電量與形成的聚吡咯膜具有一定的關(guān)系,當(dāng)聚合電量低時(shí)表面粗糙度低,當(dāng)聚合電量高時(shí)Ppy呈現(xiàn)三維增長(zhǎng),導(dǎo)致薄膜表面粗糙度增加[26]。由圖3B可知,聚合電量在1.0×10-3～3.5×10-3C范圍內(nèi),差分脈沖伏安法響應(yīng)電流逐漸增大,表明修飾電極的導(dǎo)電性隨著沉積電荷的增加而增加,因?yàn)楫?dāng)聚合電量變大時(shí),聚吡咯逐漸生長(zhǎng),厚度增加,增加其導(dǎo)電性。當(dāng)聚合電量達(dá)3.0×10-3C,修飾電極的相應(yīng)電流減小,這是因?yàn)榫圻量┍∧ぴ谳^高電流密度下非常粗糙和脆弱,導(dǎo)致電流響應(yīng)下降。因此選擇吡咯聚合電量為3.0×10-3C。

2.3.3 PBS溶液pH選擇 如圖3C所示,當(dāng)磷酸緩沖溶液的pH為6.5時(shí),差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流最強(qiáng),可能因?yàn)檠t蛋白的等電點(diǎn)為7.1,此時(shí)帶正電荷的血紅蛋白與帶負(fù)電荷的納米金顆粒通過(guò)相互靜電作用最強(qiáng),納米金顆粒上吸附的血紅蛋白更多,導(dǎo)致響應(yīng)電流更大,當(dāng)pH超過(guò)6.5時(shí),血紅蛋白與納米金之間的吸附作用下降,導(dǎo)致催化能力下降[27]。因此選擇磷酸緩沖液的pH為6.5。

2.3.4 KCl溶液pH 如圖3D所示,Hb/AuNPs/Ppy/GCE在pH為7.0的支持電解質(zhì)中催化H2O2還原的差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流最大。因此選擇支持電解質(zhì)的pH為7.0。在上述最優(yōu)條件下制備修飾電極。

圖3 傳感器的參數(shù)優(yōu)化Fig.3 The effects of the different factor注：A:脈沖周期;B:吡咯聚合電量;C:PBS緩沖液的pH;D:KCl溶液的pH。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

H2O2濃度對(duì)Hb/AuNPs/Ppy/GCE生物傳感器電流響應(yīng)的影響如圖4A所示,當(dāng)支持電解質(zhì)中的H2O2濃度成梯度增加時(shí),還原峰的響應(yīng)電流值呈線性增加。響應(yīng)電流值與H2O2濃度的線性關(guān)系如圖4B所示,兩者間的線性方程為I(μA)=9.25924+0.00995C(μmol/L),其中線性相關(guān)系數(shù)R2為0.99567。根據(jù)國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦方法[21]計(jì)算得出Hb/AuNPs/Ppy/GCE生物傳感器對(duì)過(guò)氧化氫的檢出限為0.2 μmol/L,并且該傳感器的檢測(cè)時(shí)間低至12 s,可以滿足實(shí)際樣品的在線檢測(cè)。

圖4 不同H2O2含量與響應(yīng)電流的差分伏安曲線圖(A)及H2O2含量與響應(yīng)電流的線性關(guān)系圖(B)Fig.4 Different H2O2 content and response current differential volt-ampere curve diogram(A)and H2O2concent and response current linear relationship diagram(B)

2.5 抗干擾實(shí)驗(yàn)

Hb/AuNPs/Ppy/GCE生物傳感器對(duì)過(guò)氧化氫、抗壞血酸、多巴胺、等物質(zhì)的抗干擾性研究如圖4B所示,I-t圖直觀的描繪了該傳感器在添加入一定量抗干擾物質(zhì)的電流變化曲線圖。50 s時(shí),在支持電解質(zhì)中加入20 μmol/L H2O2,電流驟然增加,這是因?yàn)檫^(guò)氧化氫將血紅蛋白中的Fe2+氧化為Fe3+,氧化還原過(guò)程中產(chǎn)生的電子在電極表面?zhèn)鬟f,導(dǎo)致電流增加。分別在100、150、200、250 s時(shí)加入200 μmol/L抗壞血酸、多巴胺等物質(zhì),響應(yīng)電流沒(méi)有明顯變化,當(dāng)在300 s時(shí)再次加入過(guò)氧化氫時(shí),響應(yīng)電流再次驟然增加,表明該傳感器對(duì)抗壞血酸、多巴胺、等物質(zhì)具有良好的抗干擾性,為用于實(shí)際樣品中的過(guò)氧化氫檢測(cè)奠定理論基礎(chǔ)。

圖5 Hb-AuNPs/Ppy/GCE在添加20 μmol/L H2O2和200 μmol/L AC、DA、UC、L-Cys時(shí)的計(jì)時(shí)電流響應(yīng)Fig.5 Amperometric i-t response of Hb-AuNPs/Ppy/GCE for adding 20 μmol/L H2O2and 200 μmol/L ascorbic acid(AC),dopamine(DA),uric acid(UC),L-cysteine(L-Cys)into the slightly stirred 0.1 mol/L KCl solution respectively

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

生物傳感器在含有20 μmol/L H2O2的KCl中差分脈沖伏安法重復(fù)測(cè)定5次。結(jié)果如圖6所示,差分脈沖伏安法的響應(yīng)電流在9.5×10-6A附近,5次平行實(shí)驗(yàn)的響應(yīng)電流的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2%,間接表明過(guò)氧化氫與血紅蛋白間的氧化還原反應(yīng)是可逆的。

圖6 Hb/AuNPs/Ppy/GCE修飾電極在含20 μmol/L H2O20.1 mol/L KCl溶液中測(cè)定5次的差分脈沖伏安響應(yīng)電流Fig.6 DPV response current of Hb/AuNPs/Ppy/GCE measured 5 times in 0.1 mol/L KCl with 20 μmol/L H2O2

2.7 實(shí)際樣品檢測(cè)

將Hb/AuNPs/Ppy/GCE生物傳感器用于牛奶中過(guò)氧化氫檢測(cè),結(jié)果如圖表1所示,該傳感器的回收率在92.7%～116.0%之間,平均標(biāo)準(zhǔn)差為3.8%,表明我們所構(gòu)建的傳感器可以用于實(shí)際樣品中過(guò)氧化氫的檢測(cè)。

表1 傳感器在牛奶樣品中的過(guò)氧化氫回收率Table 1 The recovery rates of hydrogen peroxide in milk

3 結(jié)論與討論

本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建一種新型的H2O2生物傳感器,以聚吡咯膜為基底沉積納米金顆粒,并利用靜電作用將血紅蛋白分子吸附在金粒子上構(gòu)建Hb/AuNPs/Ppy/GCE修飾電極。我們提出的生物傳感器具有良好的敏感性、選擇性和穩(wěn)定性,AuNPs和Hb對(duì)H2O2具有良好的協(xié)同催化作用。將構(gòu)建的傳感器用于牛奶樣品中的過(guò)氧化氫檢測(cè),其回收率為92.7%～116.0%之間,并且檢測(cè)時(shí)間低至12 s,可以用于實(shí)際樣品中過(guò)氧化氫殘留量的在線檢測(cè)。

本研究利用電化學(xué)修飾材料的特異性檢測(cè),初步構(gòu)建了可用于過(guò)氧化氫檢測(cè)的Hb/AuNPs/Ppy/GCE傳感器,并對(duì)該傳感器的檢測(cè)方法進(jìn)行優(yōu)化,但是要將這種方法投入到實(shí)踐中還需進(jìn)行深入的研究:如該傳感器的儲(chǔ)存時(shí)間及更廣范圍內(nèi)的應(yīng)用,本課題組將針對(duì)這兩個(gè)問(wèn)題做進(jìn)一步研究。