4 例ABO 正反定型不一致原因分析

盛梅芳，朱輝，王長(zhǎng)奇，胡樂(lè)君，熊慧瑩，鄧逸群

(樂(lè)平第二醫(yī)院，江西 樂(lè)平 333300）

ABO 血型系統(tǒng)在臨床輸血中具有非常重要的意義，正確的血型鑒定是保證臨床輸血安全的首要條件[1，2]。 許多原因可致血型鑒定正反定型不一致，影響血型判定。 ABO 血型鑒定傳統(tǒng)的血清學(xué)方法包括正反定型試驗(yàn)、吸收放散試驗(yàn)和唾液血型物質(zhì)中和抑制試驗(yàn)等[3]。在實(shí)際工作中，需要分析出現(xiàn)正反定型不一致原因，通過(guò)相應(yīng)的處理措施得到正確的血型結(jié)果。 現(xiàn)將本院正反定型不一致的4 例標(biāo)本進(jìn)行分析，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 例 1，例 2，男，46，52 歲，江西樂(lè)平人，均患多發(fā)性骨髓瘤（MM）已有 3～4 年，現(xiàn)全身皮膚水腫，骨髓涂片顯示有16% 和25%骨髓瘤細(xì)胞，符合MM 改變，在免疫固定電泳中檢出γ 區(qū) M成分，IgG 型。尿本周氏蛋白陰性。例 3，例 4，女，72，80歲，江西樂(lè)平人，例3 患左股骨粗粉碎性骨折，例4右股骨頸骨折而入院，過(guò)去患慢性支氣管炎，阻塞性肺氣腫，經(jīng)手術(shù)治療輸血。

1.2 材料 RhD 單克隆抗體試劑（批號(hào)20160323）、抗篩細(xì)胞和抗人球蛋白試劑（產(chǎn)品批號(hào)20160807）和ABO 血型反定型細(xì)胞（批號(hào)20160901）由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。 抗A、抗B 標(biāo)準(zhǔn)血清(批號(hào)2016043001)由北京金豪制藥股份公司提供。ABO、RhD 血型定型檢測(cè)卡（單克隆抗體）批號(hào)為20160401、抗人球蛋白檢測(cè)卡(不規(guī)則抗體)批號(hào)為20160205 和抗人球蛋白檢測(cè)卡（交叉配血）批號(hào)為20160411， 由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。

1.3 方法 每例抽取EDTA-K2 抗凝全血標(biāo)本4ml，不抗凝標(biāo)本3ml，要求無(wú)溶血的新鮮標(biāo)本。 ABO 血型正、反定型采用試管法及微柱凝膠法，試管法加做正反定型加強(qiáng)性實(shí)驗(yàn)[4，5]。 不規(guī)則抗體篩查、直接抗球蛋白試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)采用微柱凝膠法，當(dāng)進(jìn)行血型鑒定及交叉配血時(shí)， 出現(xiàn)血型正反定型不符及交叉配血不合樣本時(shí)結(jié)合加強(qiáng)性試驗(yàn)分析樣本正確血型。

2 結(jié)果

2.1 微柱凝膠法血型結(jié)果 例1～4 均為正定型為A 型，反定型為AB 型，正反定型不一致。 見(jiàn)表1。

表1 4 例正反定型血型結(jié)果

2.2 試管法血型結(jié)果 例1、2 均為試管法正定型為A 型，反定型顯微鏡鏡下可見(jiàn)A1、O 紅細(xì)胞呈緡錢(qián)狀凝集，加生理鹽水后凝集散開(kāi)[6]。 例 3、4 試管法正定型為A 型，反定型顯微鏡鏡下可見(jiàn)A1、O 紅細(xì)胞呈聚集趨勢(shì)，加生理鹽水后凝集散開(kāi)血型鑒定均為A 型。

2.3 試管法正反定型加強(qiáng)性實(shí)驗(yàn) 結(jié)果四例均為抗-A 血清和患者紅細(xì)胞懸液成4+強(qiáng)陽(yáng)性，例1 例2 患者血漿和B 紅細(xì)胞懸液成2+陽(yáng)性， 例3 例4，患者血漿和B 紅細(xì)胞懸液成3+陽(yáng)性， 患者血漿和A 紅細(xì)胞都為陰性。

表2 正反定型加強(qiáng)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4 4 例不規(guī)則抗體篩查 直接抗球蛋白試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)、直抗及抗篩采用微柱凝膠卡，直抗均為陰性，抗篩篩查結(jié)果均陰性。 交叉配血試驗(yàn)采用微柱凝膠法及試管抗人球蛋白法， 采用ABO 同型配血，微柱凝膠法交叉配血主側(cè)、次側(cè)均陰性，試管抗人球蛋白法交叉配血主次側(cè)均相合。 四例微柱凝膠法配血結(jié)果，見(jiàn)圖1。

圖1 4 例微柱凝膠法配血結(jié)果

2.5 采取增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)的技術(shù) 采取增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)，加大血清量、置4℃增強(qiáng)反應(yīng)，用O 型紅細(xì)胞或自身細(xì)胞作為陰性對(duì)照[7]，均能做出正確判斷，見(jiàn)圖2、圖3。

圖2 未加大血清量圖

圖3 加大血清量，置4℃增強(qiáng)反應(yīng)圖

2.6 輸血情況 例1～4 患者均當(dāng)天輸注A 型去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞2U， 輸血后紅細(xì)胞總數(shù)和血紅蛋白均有上升，證明輸血有效。 見(jiàn)表3。

3 討論

輸血目前已成為現(xiàn)代醫(yī)療中救治的重要手段之一，特別是對(duì)于一些先天原因、外傷等造成的血液成分缺乏，輸血是有效的治療措施。 正確鑒定紅細(xì)胞血型是確保輸血安全的先決條件。

表3 輸血前后實(shí)驗(yàn)室結(jié)果變化

本文中， 例 1 例 2 是 MM ，MM 是一種惡性漿細(xì)胞病，分泌異常單克隆免疫球蛋白（M 蛋白)，使血清蛋白濃度異常，可使紅細(xì)胞呈緡錢(qián)狀而產(chǎn)生假凝集，干擾血型鑒定及交叉配血[8，9]。 一些 MM 患者缺乏相對(duì)應(yīng)的血型抗體，可能是因正常免疫球蛋白和特異性抗體水平明顯下降所致?？?A 或抗-B 特異性?xún)H僅與M 蛋白的某一部分有關(guān)， 并不是每例出現(xiàn)M 蛋白單克隆株峰的MM 患者都缺乏抗-A或抗-B。 本文患者即是這種情況，出現(xiàn)血型抗體減少或缺乏。 微柱凝膠卡血型鑒定及交叉配血的局限性在于其無(wú)法對(duì)血清蛋白紊亂引起的血型正反定型不符及交叉配血進(jìn)行鑒定。MM 患者由于血液中各種免疫球蛋白成分的影響導(dǎo)致ABO 血型鑒定困難，主要原因是患者抗體減弱。 故在輸血科工作中，除了要求操作者要有責(zé)任心外，還應(yīng)掌握常見(jiàn)的血型血清學(xué)技術(shù)，包括手工試管抗人球蛋白法，以排除各種干擾因素，對(duì)臨床可疑標(biāo)本進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血。

本文例3 例4 抗體減弱或缺失主要見(jiàn)于老年患者。 老年人隨年齡增加其抗體水平會(huì)逐漸減弱[10]，作者采取增強(qiáng)抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)，如加大血清量、置4℃增強(qiáng)反應(yīng)等，把O 型紅細(xì)胞或自身細(xì)胞作為陰性對(duì)照，也能做出正確判斷。 反定型出現(xiàn)假陰性，與反定型細(xì)胞B 抗原太弱和患者抗-A 效價(jià)太低有關(guān)。

綜上所述， 正確鑒定ABO 血型在提高臨床輸血安全方面有著重要意義。 當(dāng)血型鑒定出現(xiàn)正反定型不一致時(shí)，首先應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行復(fù)查試驗(yàn)，在排除人為因素和技術(shù)因素后，根據(jù)出現(xiàn)的問(wèn)題分析原因并采取相應(yīng)處理措施，正確鑒定血型及得出準(zhǔn)確的配血結(jié)果，以保證臨床輸血安全。