血hs-CRP、PCT、NEUT 在伴高危因素新生兒血流感染中的應(yīng)用評(píng)估

周明曉，梁會(huì)，劉璐

（鄭州市第二人民醫(yī)院，河南 鄭州 450006）

新生兒血流感染 （neonatal bloodstream infection，NBSI）是發(fā)生于新生兒期的一種全身性感染性疾病，主要由細(xì)菌或真菌感染引起[1]。血培養(yǎng)是目前診斷血流感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但存在新生兒取血量難以達(dá)到檢測(cè)要求、培養(yǎng)周期長(zhǎng)等缺點(diǎn)，不利于NBSI的早期診治[2]。 臨床研究顯示[3]，早產(chǎn)、極低出生體重、胎膜早破、侵入性操作等均為新生兒血流感染的高危因素。 分析伴高危因素患兒的臨床特征，尋找敏感指標(biāo)，提高NBSI 的早期診斷率，具有重要意義。外周血中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(neutrophil count，NEUT)和超敏C 反應(yīng)蛋白 （hypersensitive c-reactive protein，hs-CRP）是反映機(jī)體炎癥反應(yīng)程度的指標(biāo)，均可以應(yīng)用于感染性疾病的早期診斷[4]。 降鈣素原（Procalcitonin，PCT） 是一種可以反映機(jī)體炎癥反應(yīng)程度的蛋白質(zhì)，在嚴(yán)重細(xì)菌感染、真菌感染中，其水平顯著升高[5]。 臨床研究顯示[6，7]，NEUT、PC T、hs-CRP 均在BSI 的診斷中具有一定的診斷價(jià)值，但其在伴高危因素NBSI 患兒中的水平變化及其與病情嚴(yán)重程度之間的關(guān)系尚不清楚，且對(duì)NBSI 早期診斷尚存在一定的局限性。 因此，本研究分析了NEUT、PCT、hs-CRP 對(duì)伴高危因素 NBSI 的診斷價(jià)值， 及其水平變化與病情嚴(yán)重程度之間的關(guān)系，旨在結(jié)合新生兒的臨床特征，提高其早期診斷率，指導(dǎo)臨床治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017 年1 月-2020 年1 月在本院收治的124 例伴NBSI 高危因素的新生兒。 納入標(biāo)準(zhǔn)： 均行中心靜脈置管術(shù)（Peripherally Inserted Central Catheter，PICC），存在 BSI 發(fā)生的高危因素：早產(chǎn)兒（胎齡＜32 周）或者極低出生體質(zhì)量（≤1500g），或其母出現(xiàn)宮內(nèi)感染、或胎膜早破、或早產(chǎn)，且臨床表現(xiàn)為體溫不升或升高、精神差、嗜睡、拒乳等；經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過。 排除標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)法耐受檢查者，合并其它系統(tǒng)感染者；臨床資料不完整者。 根據(jù)血培養(yǎng)結(jié)果，將納入患兒分為NBSI 組 37 例和非 NBSI 組 87 例。

1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)模塊式血液體液分析儀(XS-800i)購(gòu)自希森美康血細(xì)胞分析儀醫(yī)用電子有限公司，試劑原廠提供；全自動(dòng)微生物分析儀（FM-100）及其配套革蘭陰性菌和陽(yáng)性菌鑒定卡、真菌鑒定卡，均購(gòu)于美國(guó)BD 公司。hs-CRP 分析儀產(chǎn)自芬蘭 OrionDiagnostica Oy，試劑原廠提供；PCT 水平檢測(cè)試劑盒由北京熱景生物技術(shù)股份有限公司提供。

1.3 檢測(cè)指標(biāo) 回顧性分析所有入組患兒的臨床和血清學(xué)數(shù)據(jù)。 記錄患兒胎齡、性別、出生體質(zhì)量、分娩方式、宮內(nèi)感染、胎膜早破和PICC 置管天數(shù)。于血培養(yǎng)前清晨，采用EDTA 抗凝真空管采集患兒的空腹靜脈血1.5ml 左右，采用血液分析儀進(jìn)行白細(xì)胞（white blood cell，WBC）和 NEUT 計(jì)數(shù)；采用不抗凝真空管采集空腹靜脈血 2 ～3ml 左右，3500rpm 離心10min，取血清，采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)hs-CRP 水平，采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)法檢測(cè)PCT 水平，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明操作。 采用序貫器官衰竭評(píng)分 (sequential organ failure assessment，SOFA)評(píng)分和小兒危重癥評(píng)分（Pediatric critical care score，PCIS） 評(píng)估患兒的病情嚴(yán)重程度。SOFA 評(píng)分包括 6 個(gè)項(xiàng)目， 總分 0～24 分， 分值越高，病情越嚴(yán)重；PCIS 評(píng)分滿分100 分，評(píng)分越低，病情越嚴(yán)重。

1.4 血培養(yǎng)及鑒定 在使用抗菌藥物前，從不同部位（肘靜脈、股靜脈等）對(duì)所有納入患兒采血2 次，每次抽取1～3ml，加兒童專用血培養(yǎng)瓶，采用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及配套培養(yǎng)瓶進(jìn)行血培養(yǎng)，將出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警的血培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)到哥倫比亞血瓊脂平板進(jìn)行分離培養(yǎng)，分離單個(gè)菌落后，采用全自動(dòng)微生物分析儀及配套鑒定卡進(jìn)行病原菌鑒定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0 軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，滿足正態(tài)性的計(jì)量資料均以(±s)表示，采用t 檢驗(yàn)分析進(jìn)行組間比較;計(jì)數(shù)資料均以率(%)表示，組間比較采用 χ2檢驗(yàn);ROC 分析 WBC、PCT、hs-CRP、NEUT 對(duì) BSI 的診斷價(jià)值， 曲線下面積（Area under the curve，AUC）表示預(yù)測(cè)價(jià)值，聯(lián)合診斷先采用logistics 回歸分析建模，再采用ROC 分析 ；Pearson 分 析 NBSI 患 兒 WBC、PCT、hs-CRP、NEUT 與 SOFA 和 PCIS 評(píng)分之間的關(guān)系;P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 伴NBSI 高危因素患兒血流感染的病原菌分布 124 例伴NBSI 高危因素患兒共發(fā)生血流感染37 例，感染率為29.84%，分離病原菌以革蘭陰性菌（56.76%）為主，主要包括肺炎克雷伯菌（27.03%）和凝固酶陰性葡萄菌(21.62%)，革蘭氏陽(yáng)性菌(63.04%)以金黃色葡萄球菌（18.92%）為主，見表1。

表1 伴NBSI 高危因素患兒的血流感染的病原菌分布

2.2 伴NBSI 高危因素患兒的臨床特征 NBSI 組患兒出生體質(zhì)量≤1.5kg、宮內(nèi)感染、胎膜早破和置管天數(shù)＞30d 所占比例明顯高于非 NBSI 組 （P＜0.05），見表2。

表2 伴NBSI 高危因素患兒的臨床特征

2.3 NBSI 患兒的血 WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT水平 NBSI 組患兒的血 hs-CRP、PCT 和 NEUT 水平明顯高于非 NBSI 組（P＜0.05），見表3。

表3 NBSI 患兒的血清 WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT 水平(±s)

表3 NBSI 患兒的血清 WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT 水平(±s)

組別 WBC（109 個(gè)/L）NBSI 組（n=37）非 NBSI（n=87）NEUT（%）hs-CRP（mg/L）t P 10.43±2.45 9.87±2.26 1.231 0.221 57.37±14.46 48.93±10.24 3.693＜0.001 28.57±6.23 22.56±5.12 5.597＜0.001 PCT（ng/ml）2.44±0.67 1.57±0.45 8.450＜0.001

2.4 hs-CRP、PCT 和 NEUT 對(duì) NBSI 的 預(yù)測(cè) 價(jià) 值hs-CRP、PCT、NEUT 以及三者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè) NBSI的 AUC 依次為 0.723、0.644、0.779 和 0.889。 見圖1、表4。

圖1 hs-CRP、PCT 和 NEUT 對(duì) NBSI 的預(yù)測(cè)價(jià)值

表4 hs-CRP、PCT 和 NEUT 對(duì) NBSI 的預(yù)測(cè) ROC 特征

2.5 NBSI 患兒的 SOFA 和 PCIS 評(píng)分 NBSI 組患兒的 SOFA 評(píng)分明顯高于非 NBSI 組 （P＜0.05），PCIS 評(píng)分明顯低于非 NBSI 組（P＜0.05），見表5。

表5 NBSI 患兒的 SOFA 和 PCIS 評(píng)分(分，±s)

表5 NBSI 患兒的 SOFA 和 PCIS 評(píng)分(分，±s)

組別 SOFA NBSI 組（n=37）非 NBSI 組（n=87）t P 5.83±1.37 4.13±1.02 7.634＜0.001 PCIS 78.57±14.82 89.76±15.64 3.702＜0.001

2.6 NBSI 患 兒 WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT 與SOFA、PCIS 評(píng)分之間的相關(guān)性 NBSI 組患兒的WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT 與 SOFA 評(píng)分呈顯著的正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）；與 PCIS 評(píng)分呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），見表6。

表6 WBC、hs-CRP、PCT 和 NEUT 與SOFA、PCIS 評(píng)分之間的相關(guān)性(r/P)

3 討論

NBSI 病情發(fā)展迅速， 早期診斷和干預(yù)是治療NBSI 的主要手段。 目前，NBSI 診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為血培養(yǎng)，但其培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，易延誤病情，尋找新的敏感指標(biāo)提高早期檢出率具有重要意義。 WBC、hs-CRP、PCT、NEUT 是臨床常用的評(píng)估炎癥反應(yīng)程度的非特異性指標(biāo)，在感染性疾病中水平明顯升高，對(duì) NBSI 亦有一定的診斷價(jià)值[8，9]。 但 WBC、hs-CRP、PCT、NEUT 對(duì)伴高危因素 NBSI 的早期診斷價(jià)值尚不明確，且其與患者病情程度之間的關(guān)系尚不清楚。 因此，本研究以伴NBSI 高危因素（早產(chǎn)兒（胎齡＜32 周）或者極低出生體質(zhì)量（≤1500g），或其母出現(xiàn)宮內(nèi)感染、或胎膜早破、或早產(chǎn)等）的新生兒為研究對(duì)象，旨在結(jié)合新生兒的臨床特征，提高 WBC、hs-CRP、PCT、NEUT 對(duì) NBSI 的早期診斷價(jià)值，降低臨床的誤診率。本研究中，124 例伴NBSI高危因素患兒共發(fā)生血流感染37 例， 感染率為29.84%，分離病原菌以革蘭陰性菌（56.76%）為主，提示臨床可根據(jù)NBSI 患兒的病原菌分布情況調(diào)整抗生素的使用。本研究中，伴高危因素患兒NBSI組出生體質(zhì)量≤1.5 kg、宮內(nèi)感染、胎膜早破和置管天數(shù)＞30 d 所占比例明顯高于非NBSI 組， 提示伴高危因素患兒NBSI 的發(fā)生與合并多種高危因素有關(guān)，臨床需重點(diǎn)關(guān)注合并多種NBSI 高危因素的患兒，通過做好護(hù)理干預(yù)、營(yíng)養(yǎng)支持等，預(yù)防NBSI 的發(fā)生。

本研究中，NBSI 組患兒的血 hs-CRP、PCT 和NEUT 水平明顯高于非NBSI 組。hs-CRP 是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在細(xì)菌感染時(shí)，其水平顯著升高，常用于臨床監(jiān)測(cè)新生兒以及早產(chǎn)兒的感染，但其在一些非細(xì)菌性的感染中也會(huì)出現(xiàn)水平升高，對(duì)于早期NBSI 診斷的敏感性較高，但特異性較低[10]。 PCT為降鈣素的前肽物質(zhì)，研究顯示[11，12]，在正常生理狀況下，PCT 在血清中的濃度較低， 當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染時(shí)，PCT 會(huì)釋放進(jìn)入血液，導(dǎo)致血PCT 水平迅速升高，常用于細(xì)菌感染性疾病的診斷。 NEUT 是中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞比例，可以直接反應(yīng)機(jī)體的炎癥反應(yīng)程度， 對(duì)細(xì)菌感染性疾病具有一定的診斷價(jià)值[13]。 夏瑩等[14]的研究顯示，WBC、hs-CRP 和 PCT 均對(duì)BSI 具有一定的診斷價(jià)值，提示臨床可結(jié)合患者的臨床特征和 WBC、NEUT、hs-CRP、PCT 等指標(biāo)共同提高NBSI 的早期診斷率。 本研究中，NEUT、hs-CRP 和PCT 均對(duì)伴高危因素NBSI 具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，且聯(lián)合檢測(cè)可明顯提高其預(yù)測(cè)價(jià)值，提示臨床可聯(lián)合檢測(cè)PCT、NEUT、hs-CRP 共同診斷NBSI，提高其早期診斷率。 本研究中，NBSI 組患兒的SOFA 評(píng)分明顯高于非NBSI 組，PCIS 評(píng)分明顯低于非 NBSI 組，NBSI 患兒的血清 hs-CRP、PCT、NEUT 水平與SOFA 和PCIS 評(píng)分具有顯著的相關(guān)性。 SOFA 評(píng)分和PCIS 評(píng)分是臨床常用的評(píng)估患者疾病嚴(yán)重程度的指標(biāo)，可用于預(yù)測(cè)感染患者的預(yù)后[15]，提示臨床可聯(lián)合檢測(cè) PCT、NEUT、hs-CRP 評(píng)估NBSI 患兒的病情嚴(yán)重程度，指導(dǎo)臨床治療。

綜上所述，NEUT、hs-CRP 和 PCT 均對(duì)伴高危因素NBSI 具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，且其水平變化與NBSI 患兒的病情嚴(yán)重程度有關(guān)， 臨床可聯(lián)合檢測(cè)PCT、NEUT、hs-CRP 水平， 指導(dǎo)臨床 NBSI 防治工作的進(jìn)行。