牛結(jié)節(jié)性皮膚病綜述

史紅，唐萬勇

（武漢回盛生物科技股份有限公司，湖北武漢430042）

結(jié)節(jié)性皮膚?。↙umpy skin disease，LSD）又稱牛結(jié)節(jié)疹、牛結(jié)節(jié)性皮炎或牛疙瘩皮膚病， 是由痘病毒科的結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（Lumpy Skin Disease Virus，LSDV）引起的一種牛的急性或亞急性傳染病， 是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）法定報告動物疫病。2019 年8 月，我國在新疆維吾爾自治區(qū)伊犁州首次確診LSD，2020年在我國多地發(fā)生疫情， 引起各界的高度重視， 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部暫時將其作為二類動物疫病進行管理， 而在《中華人民共和國進境動物檢疫疫病名錄》中，規(guī)定為一類傳染病，即在進口檢疫中， 列為最高等級管控的動物疫病。

1 病原學

1.1 病原特性

LSDV 是有囊膜的雙股DNA 病毒，屬于痘病毒科，脊椎動物痘病毒亞科，山羊痘病毒屬。 山羊痘病毒屬（Capripoxvirus） 成員包括綿羊痘病毒、 山羊痘病毒和結(jié)節(jié)性皮膚病病毒3 種， 成員間有血清學交叉反應(yīng)和交叉保護， 因此綿羊痘和山羊痘減毒活疫苗可用于LSD 的預(yù)防。 目前，LSDV 只有1 個血清型， 代表毒株為南非分離株Neethling 株。

1.2 對環(huán)境和理化因素的抵抗力

LSDV 非常穩(wěn)定。病毒在皮膚結(jié)節(jié)中-80℃可存活10 年， 在受感染的組織液中4℃可存活6 個月。在環(huán)境溫度下，尤其是在干性結(jié)痂中，長期存活， 可以在皮膚結(jié)節(jié)壞疽中存活長達33 天或更長時間，在干性結(jié)痂中存活長達35 天，在風干的皮革中至少存活18 天。 在自然環(huán)境中LSDV 能長期保持繁殖能力。該病毒對陽光和含有脂質(zhì)溶劑的清潔劑敏感，但在黑暗的環(huán)境條件下，例如受污染的動物棚舍中， 可存活數(shù)月。LSDV 對 溫 度 敏 感，55℃2 小 時 或65℃30 分鐘可滅活病毒； 對強酸強堿敏感，pH 6.6～8.6 時，37℃溫度條件下5 天內(nèi)病毒滴度不會顯著降低；對乙醚（20%）、三氯甲烷、福爾馬林（1%）和一些洗滌劑如十二烷基硫酸鈉敏感，常用消毒劑如氫氧化鈉、福爾馬林、氯仿、季銨鹽類均可將其殺滅， 但消毒劑往往難以殺死脫落的痂皮中的病毒。

2 流行病學

2.1 流行概況

LSD 起源于非洲，1929 年首次在贊比亞被發(fā)現(xiàn)，隨后的數(shù)十年間，該病在非洲各國流行。在2013～2018年，該病先后傳到西亞、中亞、東歐和俄羅斯。2018 年，該病沿著俄羅斯和哈薩克斯坦邊界， 進一步向東移動，接近我國新疆地區(qū)，從而對我國構(gòu)成嚴重威脅。 2019 年8 月10 日，新疆維吾爾自治區(qū)伊犁哈薩克自治州送檢的牛結(jié)節(jié)病料經(jīng)國家外來動物疫病研究中心檢測LSDV 核酸陽性，這是我國首次確診發(fā)生LSD。

2.2 傳染源

患LSD 的病牛為主要傳染源。

病牛皮膚結(jié)節(jié)、結(jié)痂、硬皮組織病毒含量相對較高。 病毒可在這些組織中存活35 天甚至更久。 病牛血液、唾液、眼鼻分泌物、精液中都能分離到病毒。 發(fā)生感染后7～21 天，可間歇性地在血液中檢測到病毒（病毒血癥）， 含量比皮膚結(jié)節(jié)中略低。 病牛可通過精液排毒，有研究發(fā)現(xiàn)試驗感染的公牛在接種病毒42天后從精液中分離到了活病毒，159天后仍檢測到了病毒DNA。

2.3 易感動物

LSDV 具有高度的宿主特異性，主要感染牛和水牛。 在實驗條件下病毒潛伏期為4～14 天，《OIE 陸生動物衛(wèi)生法典》 規(guī)定潛伏期為28天。 發(fā)病率是10%～20%，死亡率一般是1%～5%。 康復(fù)?？色@得終生免疫。

本病不感染人。

2.4 傳播途徑

2.4.1 非媒介傳播

早期試驗研究和臨床研究證據(jù)表明，LSDV 并不通過牛-牛的直接接觸而產(chǎn)生有效的傳播， 有人將發(fā)病牛和健康?；祓B(yǎng)， 結(jié)果并未造成傳播，但是有趣的是，山羊痘病毒屬的另外兩個成員山羊痘病毒和綿羊痘病毒的主要傳播方式卻是直接接觸。 但近期的觀點認為，LSDV 的直接接觸傳播可能只是引起一些比較輕微的亞臨床癥狀， 還需要有足夠數(shù)量的試驗動物和現(xiàn)代更加敏感的檢測方法進一步驗證。

LSDV 可通過多種間接接觸途徑產(chǎn)生傳播， 包括攝入污染的飼料和飲水、共用污染的針頭等。

本病可通過胎盤垂直傳播，也有報道稱病毒可能可以通過母牛的乳汁、 或小牛接觸母牛損傷的乳房和乳頭而傳播。 感染公牛的精液帶毒， 可通過自然交配或人工授精傳播。

2.4.2 節(jié)肢動物媒介傳播

主要通過節(jié)肢動物蚊、蠅、蠓、虻、 蜱等叮咬傳播。 Sohier C,Haegeman A 等（2019）證實了廄螯蠅和馬蠅傳播作用， 家蠅也可能在病毒傳播中起到非常重要的作用，但還需要試驗進行證明。匯總2006～2019 年共13 年間歐亞地區(qū)發(fā)生的LSD 疫情發(fā)現(xiàn)（見圖1），該病具有明顯的季節(jié)性特征， 常見于吸血節(jié)肢動物活躍的月份。

3 臨床癥狀

臨床表現(xiàn)差異很大， 跟動物的健康狀況和感染的病毒量有關(guān)。 典型的臨床表現(xiàn)見圖2、圖3 所示。

體溫升高，可達41℃以上。精神抑郁、厭食和消瘦，有鼻炎、結(jié)膜炎癥狀，大量分泌唾液，體表淋巴結(jié)腫大，奶牛產(chǎn)奶量顯著下降。 體溫開始升高后的48 小時內(nèi)，在頭部、頸部、四肢、乳房、生殖器和會陰部會出現(xiàn)直徑2～5 厘米的皮膚結(jié)節(jié)。 這些結(jié)節(jié)是局限性的堅硬圓形凸起的，深入到皮膚、皮下組織、有時甚至是肌肉組織中。 結(jié)節(jié)觸診時有時有疼痛表現(xiàn)， 結(jié)節(jié)的數(shù)量和大小可能表現(xiàn)出很大差異。 小的結(jié)節(jié)可能會自動消失，不會造成任何危害。 大的結(jié)節(jié)可能會破潰，吸引蠅蛆，反復(fù)結(jié)痂，遷延數(shù)月不愈， 大結(jié)痂脫落后會在皮毛上留下深洞等永久性瘢痕。 在口腔和消化道的黏膜組織以及氣管和肺中可能會出現(xiàn)囊泡、 糜爛和潰瘍。 四肢和身體的其他腹側(cè)部分（如贅肉、胸部、陰囊和外陰）可能會出現(xiàn)水腫，導致牛不愿移動。 公牛可能會永久或暫時不育， 母?？赡軙鳟a(chǎn)或數(shù)月不發(fā)情。 嚴重感染牛只因消瘦、繼發(fā)性肺炎、乳房炎、皮膚結(jié)節(jié)部位壞死創(chuàng)傷等，恢復(fù)極為緩慢。

表1 牛結(jié)節(jié)性皮膚病與其他病的鑒別診斷

4 病理變化

消化道和呼吸道內(nèi)表面有結(jié)節(jié)病變。 淋巴結(jié)腫大出血。 心臟腫大，心肌外表充血、出血，呈現(xiàn)斑塊狀瘀血。肺臟腫大血點。腎臟表面有出血點。 氣管黏膜充血出血（見圖4），氣管內(nèi)有大量黏液。 肝臟腫大，邊緣鈍圓。 膽囊腫大，為正常2～3 倍，外壁有出血斑。 脾臟腫大出血，質(zhì)地變硬。 胃黏膜出血。 小腸彌漫性出血。睪丸（見圖5）和膀胱也可能有病理損傷。

5 診斷

5.1 鑒別診斷

嚴重的結(jié)節(jié)性皮膚病癥狀很明顯，但是溫和型病例易與以下疾病發(fā)生混肴：牛偽結(jié)核性皮膚病、牛皰疹性乳頭炎（牛皰疹病毒2 型）、嗜皮菌病、牛皮蠅感染等，應(yīng)注意鑒別診斷（詳見表1）。

5.2 實驗室診斷

根據(jù)臨床癥狀不難對該病做出初診，但確診還需實驗室診斷。實驗室診斷方法主要有血清學檢測和病原鑒定。

5.2.1 血清學檢測

血清學檢測不能對山羊痘病毒屬的三種病毒綿羊痘病毒、 山羊痘病毒、結(jié)節(jié)性皮膚病病毒加以區(qū)分。病毒中和試驗是目前檢測山羊痘病毒屬抗體的標準方法。蛋白質(zhì)免疫印跡法雖然敏感度高特異性強，但費用昂貴難以操作?？贵w酶聯(lián)免疫反應(yīng)（ELISA）方法目前已經(jīng)比較成熟，用于山羊痘病毒屬抗體檢測的商用試劑盒已被開發(fā)并投放市場。

5.2.2 病原鑒定

PCR 是成本便宜又快速的鑒定方法，皮膚結(jié)節(jié)、結(jié)痂、唾液、鼻分泌物和血液都是適用于PCR 檢測的樣品。病毒分離（PCR 鑒定后為確認病毒的存在而做）耗時長成本高，但能確定樣品中是否含有活的病毒。 電子顯微鏡成像鏡檢可用于鑒定經(jīng)典的痘病毒病毒體結(jié)構(gòu) （病毒呈磚塊狀或短管狀， 大小約為290×270 納米），但不能區(qū)分具體的屬或種。

6 防控

6.1 各國控制經(jīng)驗

從歐洲、 西亞等地區(qū)牛結(jié)節(jié)性皮膚病流行情況看， 成功控制和消除牛結(jié)節(jié)性皮膚病， 依賴于對指示病例的盡早診斷和鑒定， 以及后續(xù)迅速的大面積的免疫接種。 歐洲發(fā)病國家全部采用“免疫+撲殺”的防控策略，且多數(shù)采取全面撲殺政策，使疫情得到了快速有效控制。 使用數(shù)學模型比較了全部撲殺 （殺死所有受臨床影響的牛和未受影響的其他牛）和部分撲殺（僅殺死受臨床影響的牛）政策的有效性。 研究發(fā)現(xiàn)，全部撲殺和部分撲殺對消除感染的效力是相似的。

6.2 疫苗免疫

目前免疫所用疫苗按來源分主要有兩種，均是減毒活疫苗。 一種是同源疫苗，LSDV 減毒活疫苗株，如“Neethling” 株LSD 減毒活疫苗；一種是異源疫苗， 綿羊痘或山羊痘病毒減毒活疫苗株， 有研究稱山羊痘減毒活疫苗的效果優(yōu)于綿羊痘減毒活疫苗。 由于動物痘病毒結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性以及生物學和免疫學的特殊性， 其疫苗研發(fā)主要側(cè)重于減毒活疫苗研究， 但越來越多的研究證明使用減毒活疫苗存在毒株重組的危害。 如研究人員在俄羅斯庫爾干州發(fā)現(xiàn)了減毒活疫苗南非KSGP O-240 毒株和野毒毒株NI-2490 株的重組新毒株。 目前滅活疫苗的研究較少，Jihane Hamdia 等（2020 年）進行了滅活疫苗研究的報道， 但當前還沒有可供臨床使用的滅活疫苗。

6.3 我國LSD 預(yù)防控制措施

本病進入我國時間不長， 應(yīng)當引起高度重視，防止疫情蔓延。 主要措施包括：加強對疾病的宣傳，提高認識。 對發(fā)生疑似或確診病例的地區(qū)，要按照傳染病防治法規(guī)要求，按照“早快嚴小”的原則，堅決實行封鎖、隔離和撲殺。 開展易感牛群的免疫， 對疫區(qū)周圍高危地區(qū)使用弱毒疫苗進行緊急免疫接種。 控制傳播媒介，尤其是蟲源性傳媒。 在夏秋季節(jié)，要做好牛舍的管理，防止蚊蠅等害蟲進入舍內(nèi)， 并要做好環(huán)境害蟲的藥物驅(qū)殺。