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    濃香型白酒新老窖池分層池底窖泥鈣含量差異及其影響因素

    2020-11-04 09:19:40張會(huì)敏孟雅靜王艷麗陳泳興李安軍梁金輝周慶伍邢新會(huì)
    中國釀造 2020年10期
    關(guān)鍵詞:皮爾森老窖池底

    張會(huì)敏,孟雅靜,王艷麗,陳泳興,李安軍,梁金輝,周慶伍,王 錄,張 嚴(yán),邢新會(huì)

    (1.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心,安徽 亳州 236820;2.清華大學(xué) 化學(xué)工程系,北京 100084)

    窖泥對濃香型白酒發(fā)酵具有重要作用。而新窖泥有時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色顆粒析出,形成“退化”窖泥,甚至鈣化板結(jié)的現(xiàn)象[1]。陳彬等[2]證實(shí)板結(jié)窖泥中鈣元素含量高,仲幾曉等[3]證實(shí)窖泥灰白色團(tuán)塊中含量最高的金屬元素是鈣元素,且通過乳酸強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)證實(shí)乳酸的額外加入導(dǎo)致新窖泥灰白色團(tuán)塊析出,而老窖泥中并無白色團(tuán)塊析出。劉大江等[4]證實(shí)窖泥的白色團(tuán)塊主要為乳酸鈣。表明窖泥中鈣和乳酸的含量變化對窖泥質(zhì)量具有重要影響。

    現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明,隨窖齡增加,窖泥質(zhì)量提高[5],窖泥菌群多樣性[5-6]和豐度[7]增加,乳酸含量和鈣含量減少[8],pH值升高[1,2,5,8-10]。窖泥老熟過程中,不斷受黃水浸潤影響,黃水中有機(jī)酸以乳酸為主[1,5],新鮮黃水中乳酸含量高達(dá)80 g/L[11]。老窖泥中豐富的乳酸降解菌[12-13]可以降解乳酸,從而提高pH值;而新窖泥菌群豐度較低[7],乳酸降解功能比較弱,新窖泥pH值較低。因此,有必要深入分析新、老窖泥中鈣(鈣離子與固體鈣)含量差異及其與pH值、乳酸含量之間的關(guān)系。

    基于新、老窖池池底窖泥理化性質(zhì)隨取樣深度的梯度變化差異[14],本研究選取安徽省北部某著名濃香型白酒公司的新、老窖池,進(jìn)行分層分位點(diǎn)池底窖泥取樣,分別分析新、老窖池池底窖泥中可溶性鈣離子、相對鈣含量與pH值、乳酸的關(guān)系,為窖泥“退化”,“鈣化”現(xiàn)象提供部分理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    窖泥樣本:安徽北部某知名濃香型白酒企業(yè);試驗(yàn)所用試劑為國產(chǎn)分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FE20 pH計(jì):梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;6890氣相色譜儀:美國Agilent公司;Acquity超高效液相色譜儀:美國Waters公司;ICS5000+離子色譜儀(配ICS-5000+-DC電導(dǎo)檢測器):美國Thermo Fisher公司;XRF-1800 X射線熒光光譜儀:日本島津公司;XD6多晶X射線衍射儀:北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。

    1.3 方法

    1.3.1 分層分位點(diǎn)池底窖泥樣本采集方法

    分別選取窖齡不同而發(fā)酵工藝相同的新窖池(窖齡5年)和老窖池(窖齡≥50年)各6個(gè),采用三位點(diǎn)四層取樣法[14]對池底窖泥取樣,四個(gè)取樣深度為:0~1 cm,1~3 cm,3~5 cm和5~7 cm。角點(diǎn)(Corner)窖泥樣本依次標(biāo)注為:Cor_01,Cor_13,Cor_35和Cor_57;中心點(diǎn)(Center)窖泥樣本標(biāo)注為:Cen_01,Cen_13,Cen_35和Cen_57;四分之一點(diǎn)(Quarter)窖泥樣本標(biāo)注為:Qua_01,Qua_13,Qua_35和Qua_57。新、老窖泥樣本分別添加“Y_”、“O_”前綴表示。如老窖池中心點(diǎn)1~3 cm的窖泥樣本標(biāo)注為O_Cen_13。每個(gè)窖池12個(gè)窖泥樣本,共144個(gè)窖泥樣本。

    1.3.2 pH值、乳酸和可溶性鈣離子含量分析

    使用pH計(jì)檢測窖泥pH值(將新鮮窖泥與去離子水按1∶3質(zhì)量體積比混勻靜置檢測[1])。將新鮮窖泥與去離子水按照1∶9(g∶mL)混勻,30 ℃超聲波處理40 min,0.22 μm濾膜過濾后,采用液相色譜法檢測乳酸含量[11],采用離子色譜法檢測可溶性Ca2+濃度[14]??偣?2個(gè)窖池144個(gè)窖泥樣本。

    1.3.3 泥中碳酸鈣定性分析與相對鈣含量的半定量分析

    新鮮窖泥經(jīng)風(fēng)干粉碎過80目篩,使用多晶X射線衍射(X-ray diffraction,XRD)儀定性檢測是否有碳酸鈣[15]。新鮮窖泥經(jīng)風(fēng)干粉碎過40目篩,于106 ℃下烘干1 h冷卻后,將樣品放入聚氯乙烯環(huán)(φ30)中,壓樣機(jī)壓樣。使用X射線熒光光譜(X-ray fluorescence spectrum,XRF)儀自帶標(biāo)準(zhǔn)曲線的定性-定量(Qual-Quant)方法[16]在氧化物模式下進(jìn)行氧化鈣的半定量分析,并非單純檢測氧化鈣,而是代表可以轉(zhuǎn)化為氧化鈣的相對鈣含量,包括碳酸鈣、氫氧化鈣等,主要為窖泥原材料黃淤土中的碳酸鈣等成分。共檢測了新、老窖池各3個(gè),總共6個(gè)窖池的72個(gè)窖泥樣本。

    1.3.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    皮爾森相關(guān)性系數(shù)和線性回歸分析通過Origin 9.0實(shí)現(xiàn)。差異顯著性分析通過方差分析(SPSS 24.0)實(shí)現(xiàn)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 鈣離子、相對鈣含量與碳酸鈣的分布規(guī)律

    新、老窖池分層池底窖泥的鈣離子含量和相對鈣含量的變化規(guī)律見圖1。由圖1可知,首先,在縱向上,新、老窖泥中,鈣離子含量和相對鈣含量呈相反的變化規(guī)律,前者隨窖泥深度減少而增加,后者隨窖泥深度的減小而減小。與老窖泥的相對鈣含量相比,新窖泥相對鈣含量的遞減趨勢逐漸增強(qiáng),依次減少為相同深度老窖泥的87.47%,77.27%,49.52%和30.24%(圖1A)。分析窖泥中可溶性鈣離子的來源,一部分來自于糧食降解和釀酒用水,一部分來自窖泥原材料黃淤土[9]的鈣鹽解離。前者在新、老窖泥中基本相同,因此,推測新、老窖泥鈣離子含量差異主要與后者,即黃淤土(主要為碳酸鈣)的鈣解離程度有關(guān)。已知碳酸鈣、氫氧化鈣等解離受pH值的影響,窖泥pH值與其酸的含量有關(guān)。乳酸是窖泥中含量最大的有機(jī)酸[5,14],碳酸鈣可以用于中和乳酸[17]等以提高pH值。窖泥中解離的鈣離子的含量越多,在發(fā)酵過程中鈣離子隨黃水洗脫而流失得越多,因此,窖泥中相對鈣含量與鈣離子呈相反的變化規(guī)律。本研究數(shù)據(jù)證實(shí)新、老窖泥中乳酸的含量確實(shí)隨窖泥深度減少而增加。新、老窖泥的鈣離子和相對鈣含量在0~3 cm差異最顯著,總體來說,0~3 cm新窖泥的鈣離子含量為0~3 cm老窖泥的6.62倍,0~3 cm新窖泥的相對鈣含量為0~3 cm老窖泥的39.88%。目前對表層新、老窖泥理化性質(zhì)的研究[1,5]證明其乳酸含量差異顯著,與本研究數(shù)據(jù)推測一致。

    其次,在橫向上,新、老窖泥鈣離子和相對鈣含量在三個(gè)位點(diǎn)(中心點(diǎn)、四分之一點(diǎn)和角點(diǎn))的含量規(guī)律略有差異。老窖泥鈣離子和相對鈣含量在三個(gè)位點(diǎn)的變化規(guī)律基本一致(圖1B),新窖泥鈣離子和相對鈣含量在三個(gè)位點(diǎn)的變化規(guī)律并不一致,尤其是鈣離子,其在三個(gè)位點(diǎn)按照中心點(diǎn)、四分之一點(diǎn)和角點(diǎn)的順序略有降低。該結(jié)果表明,經(jīng)過50多年的發(fā)酵,老窖池池底泥的鈣含量在水平方向分布均勻,而新窖池池底泥在水平方向上則有顯著差異。推測鈣離子含量差異與乳酸等酸的含量差異導(dǎo)致的鈣解離差異有關(guān)。本研究數(shù)據(jù)顯示,乳酸在三個(gè)位點(diǎn)按照中心點(diǎn)、四分之一點(diǎn)和角點(diǎn)的順序略有降低,與鈣離子的含量變化規(guī)律一致,與推測一致。

    深入分析新、老窖池池底泥的乳酸含量在橫向方向上的差異。一方面,黃水是窖泥營養(yǎng)物質(zhì)的來源[18],其乳酸含量高達(dá)80 g/L且新老窖池黃水乳酸含量無顯著差異[11](P>0.05)。另一方面,新窖泥菌群豐度比老窖泥小約3個(gè)數(shù)量級(jí)[7],其中包括降解乳酸的菌[12,19]。推測新、老窖泥乳酸含量差異主要受其乳酸降解菌豐度差異的影響。新窖池角點(diǎn)的菌群豐度確實(shí)顯著高于中心點(diǎn)和四分之一點(diǎn)[14],與推測一致。此外,可能與三個(gè)位點(diǎn)黃水的滲透差異有關(guān)。首先,從滲透面來說,中心點(diǎn)與四分之一點(diǎn)黃水是360°全方位滲透,角點(diǎn)黃水是90°滲透。其次,受黃水浸泡的影響,池底平面容易形成中間低四周高的情況。黃水浸泡時(shí)間,按照中心點(diǎn)、四分之一點(diǎn)和角點(diǎn)的順序遞減。因此,窖泥中酸的含量按照相同順序依次降低,形成了鈣離子含量在中心點(diǎn)幾乎不存在、在四分之一點(diǎn)很微弱,只有在角點(diǎn)較顯著的現(xiàn)象,最終角點(diǎn)鈣離子的縱向遞變規(guī)律較接近老窖泥。

    圖1 新(A)、老(B)窖池分層池底泥中鈣離子與相對鈣含量的分布規(guī)律Fig.1 Distribution of calcium ions and relative calcium content in layered young (A) and old (B) bottom-pit mud

    綜上,推測表層新、老窖泥鈣離子和相對鈣含量差異主要由兩者乳酸降解能力差異導(dǎo)致的乳酸含量差異所致;而新窖泥三個(gè)位點(diǎn)的鈣離子和相對鈣含量差異除了與菌群豐度差異有關(guān),還可能與黃水中乳酸的滲透差異有關(guān)。窖泥菌群的乳酸降解能力在新、老窖泥質(zhì)量差異中起主要作用,而黃水(乳酸)的滲透作用對新窖池池底不同位點(diǎn)窖泥質(zhì)量差異起次要作用。

    鑒于新、老窖池表層池底窖泥中鈣離子和相對鈣含量的顯著差異,窖泥黃淤土[9]中廣泛存在碳酸鈣。進(jìn)一步通過XRD定性檢測新、老窖泥中碳酸鈣的存在,以碳酸鈣為例,驗(yàn)證窖泥中鈣鹽被酸解的程度。碳酸鈣的定性檢測結(jié)果見表1。由表1可知,老窖泥中,1~7 cm所有樣本,一個(gè)0~1 cm樣本(O_Cen_01)的檢測結(jié)果為陽性。新窖泥中,表層0~1 cm樣本,絕大多數(shù)1~3 cm樣本,一個(gè)3~5 cm(Y_Cen_35)和一個(gè)5~7 cm樣本(Y_Cor_57)的檢測結(jié)果均為陰性。因此,與老窖泥相比,新窖泥碳酸鈣的XRD檢測線下移約2 cm,兩者的碳酸鈣含量差異主要表現(xiàn)在表層0~3 cm,推測其差異與表層新、老窖泥pH值差異,即酸含量差異有關(guān)。結(jié)果顯示,表層新、老窖泥乳酸含量差異顯著,進(jìn)一步說明了新窖泥中相對鈣含量小于老窖泥,間接說明了新窖泥中鈣離子含量大于老窖泥。

    表1 通過X射線衍射對新老窖池分層池底泥中的碳酸鈣定性分析結(jié)果Table 1 Qualitative analysis results of calcium carbonate in layered young and old bottom-pit mud through X-ray diffraction

    2.2 鈣離子和相對鈣含量與pH值的相關(guān)性分析

    建立新、老窖池分層池底窖泥鈣離子含量與pH值的皮爾森相關(guān)性分析和線性回歸分析,結(jié)果見圖2。由圖2可知,新、老窖泥鈣離子含量與pH值均呈負(fù)相關(guān),即:窖泥鈣離子含量隨pH值的增加而減少。新老窖泥鈣離子含量與pH值呈線性關(guān)系,新窖泥的擬合度較低(R2Adj=0.167 5),方程式為:y=-214.265 8x+2 451.697;老窖泥的擬合度更高(R2Adj=0.648 0),方程式為:y=-69.009 1x+675.216 8。推測老窖泥中鈣離子和pH值相對穩(wěn)定,離散程度較小,所以鈣離子和pH值線性回歸曲線的擬合度也較高。與老窖泥相比,新窖泥鈣離子含量隨pH值增加而減少的幅度更大,初始鈣離子濃度更大,結(jié)合表1數(shù)據(jù),推測可能是新窖泥中鈣鹽在其低pH環(huán)境下過度解離,致使鈣離子與pH值失去線性關(guān)系所致,并非新窖泥中鈣離子含量受pH值的影響小。

    與線性回歸相比,新窖泥鈣離子含量與pH值更適合高斯(Gauss)回歸(R2Adj=0.383 7)。鈣離子含量以pH值5.14為界,先上升后降低。推測當(dāng)pH<5.14時(shí),窖泥中碳酸鈣和酸發(fā)生中和反應(yīng)使pH值升高,比如中和乳酸[17],鈣離子增加;當(dāng)pH值達(dá)到5.14后,微弱的酸性無法使鈣鹽繼續(xù)解離,乳酸鈣隨pH值升高溶解度降低[23],同時(shí)在偏中性或者弱堿性環(huán)境下,鈣離子反而更傾向于與OH-生成氫氧化鈣進(jìn)而可與環(huán)境中CO2等反應(yīng)生成碳酸鈣[21],導(dǎo)致鈣離子含量迅速降低。本課題組數(shù)據(jù)顯示在新鮮黃水(pH 3.2~3.5)中添加過量碳酸鈣粉末,其pH值逐漸升至5左右而不再繼續(xù)升高,其pH值5與圖2B中的pH閾值5.14很接近,據(jù)此,結(jié)合圖2B的模型,推測在窖泥環(huán)境中碳酸鈣中和有機(jī)酸,可以提高pH值的上限為5.14。與新窖泥相比,老窖泥pH值普遍大于閾值5.14[5,6,14],所以其鈣離子含量沒有形成先增加后減小的變化規(guī)律。窖泥中一些菌[12,13,22]其降解乳酸的功能需要在pH值5.0~5.8范圍內(nèi)起作用,當(dāng)pH值低于5.0時(shí)無法降解乳酸,而乳酸桿菌(Lactobacillus)甚至可以在pH值2.4時(shí)生存良好[23],從而導(dǎo)致新窖泥中乳酸桿菌占優(yōu)勢,繼續(xù)產(chǎn)生乳酸,使pH值持續(xù)降低。由此推測,在pH值偏低且出現(xiàn)乳酸鈣白色團(tuán)塊析出的“退化”窖泥中,單純通過碳酸鈣暫時(shí)中和乳酸提高pH值,無法扭轉(zhuǎn)乳酸桿菌占優(yōu)勢和pH值降低的狀況。

    圖2 新老窖池分層池底泥鈣離子含量與pH值之間的回歸分析Fig.2 Regression analysis between calcium ion content and pH value of layered young and old bottom-pit mud

    建立新、老窖池分層池底窖泥相對鈣含量與pH值的皮爾森相關(guān)性分析和線性回歸,以分析其相對鈣含量受pH值的影響,結(jié)果見圖3。由圖3A可知,新、老窖泥相對鈣含量與pH值均呈正相關(guān),且老窖泥的皮爾森相關(guān)性系數(shù)(0.750 2)顯著高于新窖泥(0.483 2)。新、老窖泥的相對鈣含量均隨pH值的增加而增加,不過老窖泥相對鈣含量受pH值的影響更大。線性回歸分析表明,老窖泥中相對鈣含量與pH值的線性回歸擬合度較高(R2Adj=0.549 9),新窖泥較低(0.210 9)。推測老窖泥中相對鈣含量受pH值影響較大,同時(shí)老窖泥的理化性質(zhì)比較穩(wěn)定,所以線性回歸的擬合度較高。推測新窖泥中相對鈣含量與pH值可能不適合直線回歸。建立新窖泥相對鈣含量與pH值的二項(xiàng)式回歸,得到了較高擬合度(R2Adj=0.530 5)。二項(xiàng)式回歸分析顯示,當(dāng)pH值小于一定閾值(約6.2)時(shí)新窖泥的相對鈣含量隨pH值增加呈上升趨勢,表明在pH值小于閾值時(shí),隨著窖泥環(huán)境酸性減弱,鈣鹽酸解離減弱,相對鈣含量增加;當(dāng)pH值大于閾值時(shí),新窖泥的相對鈣含量隨pH值增加呈降低趨勢。

    圖3 新老窖池分層池底泥中相對鈣含量與pH值之間的回歸分析Fig.3 Regression analysis between relative calcium content and pH value of layered young and old bottom-pit mud

    由圖3B可知,R2=0.585 6,擬合度較高,兩個(gè)頂點(diǎn)將曲線分為三部分。pH<6.09時(shí),窖泥的相對鈣含量呈上升趨勢,推測隨pH值升高,窖泥酸性降低,酸解離變?nèi)?,同時(shí)窖泥中乳酸鈣隨pH值上升溶解度降低[20](析出白色乳酸鈣沉淀[4]),相對鈣含量增加。6.09<pH<7.29時(shí),窖泥的相對鈣含量相對穩(wěn)定,呈微弱下降趨勢。推測中性環(huán)境比較適宜窖泥菌群的生長繁殖,乳酸降解菌屬[13]代謝乳酸,導(dǎo)致與乳酸根離子匹配的鈣元素的流失,使得相對鈣含量的微弱減少(7.454%~7.286%)。pH>7.29時(shí),窖泥的相對鈣含量呈上升趨勢。推測在弱堿性環(huán)境下,窖泥中的鈣離子更傾向于與OH-、CO32-等形成鈣鹽固定下來;同時(shí),弱堿性環(huán)境更適合甲烷菌生存,甲烷菌的存在是窖泥老熟的標(biāo)志。老窖泥更完整的窖泥菌群代謝鏈?zhǔn)谷樗峤到饧铀?,pH值繼續(xù)升高。推測新、老窖泥鈣含量差異與乳酸等有機(jī)酸含量差異引起的鈣鹽解離差異有直接關(guān)系,與其菌群的乳酸降解功能差異有間接關(guān)系。新、老窖泥相比,前者的pH值范圍為3.8~8.3,平均值為(5.5±1.4),后者的pH值范圍為5.2~9.5,平均值為(8.3±1.4),兩者的pH值范圍差異造成了兩者相對鈣含量分布差異。

    2.3 乳酸含量與pH值的相關(guān)性分析

    窖泥4種主要有機(jī)酸中,乳酸的含量最大[1,5,14],乳酸為水溶性,且乳酸pKa值(3.86)比己酸(4.83)、丁酸(4.82)和乙酸(4.74)小,即在溶解度范圍內(nèi),同樣酸濃度條件下,乳酸溶液的酸性更強(qiáng)。為了驗(yàn)證窖泥中乳酸和pH值的關(guān)系,建立乳酸與pH值的皮爾森相關(guān)性分析和線性回歸分析,如圖4所示。新、老窖泥的乳酸含量均與pH值均呈較強(qiáng)負(fù)相關(guān)(-0.686 2,-0.789 3),乳酸含量的減少伴隨著pH值的增加。新、老窖泥乳酸與pH值的線性回歸分析顯示兩者的R2Adj分別大于(0.617 6)或者接近0.5(0.463 3),表明新、老窖泥的乳酸含量與pH值的擬合度較強(qiáng),其中老窖泥的擬合度更強(qiáng)。新窖泥中斜率(-5 711.02)絕對值比老窖泥(-650.56)大,表明新窖泥pH值隨乳酸含量減少而增大的幅度更大,推測與新窖泥中乳酸含量較大[5]、pH值較低[5]、需要較多乳酸提供所需酸度有關(guān)。新窖泥中含量較大的乳酸可能導(dǎo)致了其中鈣鹽的過度解離(表1)。已知老窖泥菌群的豐度比新窖泥大約3個(gè)數(shù)量級(jí)[7],推測新、老窖泥中降解乳酸的菌[12,13,26]的豐度差異對新、老窖泥中的乳酸含量差異具有重要作用,進(jìn)而影響了新、老窖泥的pH值差異。綜上,可知窖泥中乳酸含量對窖泥質(zhì)量具有重要影響作用。

    圖4 新、老窖池分層池底泥乳酸含量與pH值之間的線性回歸分析Fig.4 Regression analysis between lactic acid content and pH value of layered young and old bottom-pit mud

    2.4 鈣離子和相對鈣含量與乳酸含量的相關(guān)性分析

    鑒于乳酸是窖泥中含量最高的有機(jī)酸,以及乳酸對pH值的影響明顯(圖4),進(jìn)一步建立新、老窖泥鈣離子與乳酸含量的皮爾森相關(guān)性分析和線性回歸關(guān)系,以驗(yàn)證窖泥鈣離子受乳酸的影響,結(jié)果見圖5。由圖5可知,通過皮爾森相關(guān)性系數(shù)可知,與新窖泥相比(0.418 6),老窖泥鈣離子與乳酸含量的相關(guān)性更強(qiáng)(0.717 6),其次,老窖泥鈣離子與乳酸的擬合度(0.508 0)高于新窖泥(0.163 5)。老窖泥中鈣離子含量受乳酸含量的影響較大,且老窖泥中鈣離子含量和乳酸鈣含量兩個(gè)理化參數(shù)的數(shù)量關(guān)系相對比較穩(wěn)定,鈣離子含量隨乳酸含量的增加而增加。

    圖5 新(A)、老(B)窖池分層池底泥鈣離子含量與乳酸含量之間的線性回歸分析Fig.5 Regression analysis between calcium ion content and lactic acid content of layered young(A)and old(B)bottom-pit mud

    不過,老窖泥鈣離子與乳酸的皮爾森相關(guān)系數(shù)和擬合度均稍低于其與pH值的兩個(gè)系數(shù)值(圖2),分析其原因,乳酸作為窖泥含量最大的有機(jī)酸,對pH值起主要影響作用,不過己酸、丁酸和乙酸等有機(jī)酸也對窖泥pH值有稍許影響。因此,與pH值相比,乳酸與鈣離子的皮爾森相關(guān)性系數(shù)和線性回歸擬合度值略有降低。新窖泥中乳酸含量比老窖泥大1個(gè)數(shù)量級(jí);新窖泥中鈣離子濃度遠(yuǎn)大于老窖泥。與老窖泥相比,新窖泥鈣離子與乳酸的皮爾森相關(guān)性系數(shù)(0.418 6)和線性回歸的擬合度很?。≧2=0.163 5),推測可能過量的乳酸與鈣鹽達(dá)到反應(yīng)上限,失去線性關(guān)系所致(表1)。

    建立新、老窖泥相對鈣含量與乳酸含量之間的皮爾森相關(guān)性分析和線性回歸分析,以驗(yàn)證窖泥相對鈣含量受乳酸含量的影響,結(jié)果見圖6。由圖6可知,新、老窖泥相對鈣含量與乳酸之間均呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為-0.517 71,-0.637 94),老窖泥中的負(fù)相關(guān)性更強(qiáng),即窖泥乳酸含量的減少伴隨著窖泥相對鈣含量的增加。不過,新、老窖泥的相對鈣含量與乳酸之間的擬合度(0.246 5,0.389 5)都比較低。推測與新、老窖泥中相對鈣含量和乳酸含量的數(shù)值離散程度比較大有關(guān)。具體對新窖泥來說,推測其中過量乳酸的存在致使鈣鹽過度解離(表1),使其線性關(guān)系并不明晰。對老窖泥來說,其皮爾森相關(guān)性系數(shù)和擬合度均低于其相對鈣含量與pH值的系數(shù)值(圖3A),推測可能與將pH值提高到弱堿性的一些因素有關(guān),比如OH-,CO32-等,這些離子在弱堿性環(huán)境中利于提高相對鈣含量,卻不再受乳酸含量的影響。

    圖6 新老窖池分層池底泥中相對鈣含量與乳酸含量之間的線性回歸分析Fig.6 Regression analysis between relative calcium content and lactic acid content of layered young and old bottom-pit mud

    3 結(jié)論

    本研究統(tǒng)計(jì)分析了濃香型白酒新、老窖池分層池底泥中鈣離子、相對鈣含量的分布規(guī)律,及其分別與pH值、乳酸之間的關(guān)系:

    新、老窖泥中鈣離子與相對鈣含量隨窖泥深度變化呈相反的變化規(guī)律。兩者在表層0~3cm差異最顯著。新、老窖泥乳酸含量與pH值均呈比較強(qiáng)的負(fù)相關(guān)(-0.686 2,-0.789 3)。與新窖泥相比(0.463 3),老窖泥中pH值與乳酸的擬合度(0.617 6)更高。

    新、老窖泥鈣離子與pH值均呈負(fù)相關(guān)(-0.4234,-0.8081),與新窖泥相比,老窖泥鈣離子與pH值的線性擬合度較高(0.648 0)。此外,新窖泥鈣離子與pH值略呈高斯回歸(R2=0.383 7),以pH=5.14為界,鈣離子隨pH值升高先增加后降低。新、老窖泥相對鈣含量與pH值均呈正相關(guān)(0.4832,0.750 2),老窖泥相對鈣含量與pH值的線性擬合度較高(0.549 9)。此外,新窖泥相對鈣含量與pH值呈較強(qiáng)二項(xiàng)式回歸(R2=0.530 5),以pH 6.2為界,相對鈣含量先增加后下降。新、老窖泥相對鈣含量整體與pH值呈較強(qiáng)三項(xiàng)式回歸,pH<6.09時(shí)上升,6.09<pH<7.29時(shí)微弱下降,pH>7.29時(shí)上升。

    新、老窖泥鈣離子與乳酸均呈正相關(guān)關(guān)系(0.418 6,0.717 6),與新窖泥(0.163 5)相比,老窖泥鈣離子與乳酸的線性擬合度更高(0.508 0)。新、老窖泥相對鈣含量與乳酸均呈較強(qiáng)負(fù)相關(guān)關(guān)系(-0.517 7,-0.637 9),不過,線性擬合度均較低(0.246 5,0.389 5)。

    綜上,pH值和乳酸含量差異對新、老窖泥鈣離子和相對鈣含量差異有較大影響。受表層新窖泥中鈣鹽過度解離的影響,新窖泥中鈣含量與pH值、乳酸的統(tǒng)計(jì)關(guān)系較弱。推測新、老窖泥鈣含量差異長期與其菌群乳酸降解功能差異有關(guān),短期與乳酸含量差異所引起的鈣鹽解離差異有關(guān)。本研究為“退化”和“鈣化”窖泥的形成提供了新的理論依據(jù)。

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