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    食源性致病菌監(jiān)測常見檢測技術(shù)分析

    2020-10-28 22:27:07和麗毅
    食品安全導(dǎo)刊·下旬刊 2020年8期
    關(guān)鍵詞:應(yīng)用分析

    和麗毅

    摘 要:近年來伴隨著生活水平的不斷提高,人們越來越關(guān)注食品安全問題,而食源性致病菌是威脅食品安全的最大因素之一,因此積極采取有效的技術(shù)手段檢測食源性致病菌,然后針對性采取防治措施是保證食品安全的重要手段。本文總結(jié)了常見的幾種檢測食源性致病菌的技術(shù)。

    關(guān)鍵詞:食源性致病菌;檢測手段;應(yīng)用分析

    當(dāng)前,食品安全已經(jīng)成為全球共同關(guān)注的一個公共衛(wèi)生問題,食源性疾病主要是感染食源性致病菌所致,因此該病菌是威脅食品安全的重要因素,因此,采用準(zhǔn)確且高效的檢測技術(shù)控制食源性疾病流行至關(guān)重要。

    1 細菌培養(yǎng)技術(shù)

    細菌培養(yǎng)技術(shù)作為檢測食源性致病菌的一項傳統(tǒng)技術(shù),該技術(shù)主要的檢測原理為對食品樣品內(nèi)的微生物實施培養(yǎng),再采用劃線分離,進行選擇性培養(yǎng),對菌落的特征進行觀察,從而檢測并鑒別致病菌的種類。伴隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展,顯色培養(yǎng)基因特異性強以及靈敏度高等優(yōu)點被應(yīng)用在食源性致病菌的檢測中,極大地提高了篩選的效率。在今后的生化鑒定中,借助全自動微生物鑒定分析系統(tǒng)便可以達到進一步簡化實驗步驟、縮短實驗周期的目的,同時還能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。但是傳統(tǒng)的細菌培養(yǎng)技術(shù)最大的缺陷在于操作流程多,所需時間長,因此不適合一些應(yīng)急情況下的檢測[1]。

    2 免疫學(xué)技術(shù)

    2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗

    該檢測技術(shù)的主要原理為抗原、抗體之間的特異性反應(yīng),是通過酶標(biāo)抗體或者抗原催化底物顯色來定性或者定量分析待檢食物。大量試驗結(jié)果表示:酶聯(lián)免疫吸附實驗可以在24 h內(nèi)將食物中的多種食源性致病菌檢測出來。mini-Vidas作為全自動免疫分析儀便是采用酶聯(lián)免疫吸附原理制造出來的,該儀器可以在1~2 d內(nèi)迅速地檢測出單核細胞增生李斯特菌、大腸埃希氏菌、空腸彎曲菌與沙門氏菌等多種食源性致病菌。

    2.2 免疫熒光標(biāo)記檢測法

    免疫熒光標(biāo)記檢測作為一類檢測食源性致病菌的新型手段,該技術(shù)的原理是利用特異性抗體敏化的免疫色譜卡片進行檢測。在檢測時,先將增殖培養(yǎng)后的樣品滴加至免疫色譜卡上,無需儀器只需肉眼便可以對結(jié)果進行觀察。免疫熒光標(biāo)記檢測法具有操作簡單、無需其他設(shè)備的優(yōu)點,并且適應(yīng)性較強,根據(jù)實驗結(jié)果顯示,增殖后的操作時間只需10 min左右。

    2.3 免疫磁珠技術(shù)檢測法

    免疫磁珠技術(shù)也叫免疫磁珠分離技術(shù),該檢測技術(shù)主要結(jié)合了免疫反應(yīng)和磁性分離兩項技術(shù),其操作步驟如下:首先將抗體包裹在磁珠表層上,將其和特定的抗原發(fā)生反應(yīng)后,再識別分離檢測物,因此該檢測技術(shù)具有靈敏度高、反應(yīng)時間短等特征。該檢測技術(shù)能夠把致病菌的檢測時間由過去的幾天逐漸縮短至幾個小時,檢測效率極大的提高,當(dāng)前已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用在微生物檢測領(lǐng)域[2]。

    3 生物學(xué)檢測技術(shù)

    3.1 電阻抗技術(shù)

    電阻抗技術(shù)作為一類新型生物學(xué)檢測技術(shù),當(dāng)前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用在食品微生物領(lǐng)域,該檢測技術(shù)的原理為在細菌繁殖過程中,其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物會引起培養(yǎng)基的阻抗改變,通過該變化判斷樣品中的微生物。電阻抗技術(shù)已經(jīng)被應(yīng)用于檢測食品內(nèi)的大腸桿菌、細菌總數(shù)、沙門氏菌等食源性致病細菌。

    3.2 ATP生物發(fā)光法

    三磷酸腺苷(ATP)作為細胞內(nèi)產(chǎn)生的一類重要的代謝產(chǎn)物,其在熒光蟲素酶與熒光蟲素的作用下可以釋放出能量,形成磷光。當(dāng)環(huán)境保持不變時,細菌細胞中含有的ATP是相對固定的。所以通過檢測磷光的強度便可以準(zhǔn)確判斷出細菌菌落的總數(shù)。ATP生物發(fā)光法主要可檢測食品中菌落的總數(shù),從而對食品遭受微生物污染的嚴(yán)重程度進行判斷,具有用時短、操作簡單等優(yōu)點。另外ATP生物發(fā)光法還可以現(xiàn)場快速檢測大量食品樣本的細菌污染情況。值得注意的是:如果樣品中存在大量非細胞ATP,那么將會對檢測的結(jié)果造成一定影響。

    3.3 PCR檢測技術(shù)

    由于每一類生物其擁有的核酸片段具有特異性,因此便可以借助含有探針的補體核酸片段檢測致病菌,一般情況探針上帶有擁有放射性的同位素。當(dāng)前,PCR檢測技術(shù)主要被應(yīng)用在沙門氏菌的檢測中,其具有操作簡便、用時短等特征,檢測結(jié)果具有較強的特異性和敏感性。當(dāng)前隨著PCR檢測技術(shù)的不斷發(fā)展,除了被應(yīng)用在食源性致病菌的檢測中,也逐漸被應(yīng)用在其他領(lǐng)域,并且延伸出了熒光定量PCR檢測技術(shù)、逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測技術(shù)以及電化學(xué)發(fā)光PCR檢測技術(shù)技術(shù)等等,逐漸成為檢測某些食源性致病菌的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)[3]。

    4 結(jié)語

    綜上所述,當(dāng)前用于檢測食源性致病菌的技術(shù)較多,每一類技術(shù)均擁有自身的優(yōu)點與缺點,應(yīng)將各類檢測技術(shù)的優(yōu)點充分發(fā)揮出來,聯(lián)合應(yīng)用多種檢測技術(shù)有助于提高食源性致病菌檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,從而保證消費者的食品安全。

    參考文獻

    [1]史春悅.食源性致病菌檢測技術(shù)的應(yīng)用與研究進展[J].現(xiàn)代食品,2020(4):49-52.

    [2]尹琬婷,嚴(yán)志明.食源性致病菌快速檢測技術(shù)研究進展[J].食品安全導(dǎo)刊,2018(24):114.

    [3]陳秀琴,黃梅清,鄭敏,等.食源性致病菌快速檢測技術(shù)及其應(yīng)用研究進展[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報,2018,33(4):438-446.

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