中藥血清藥理學及血清藥物化學研究進展

代啟良

【摘 要】本文重點整理和分析了最近幾年中藥血清藥理學和血清藥物化學研究情況，不僅涵蓋了藥物血清的制備和藥物血清與療效的關(guān)系，而且還包括血清藥物化學在提高中藥質(zhì)量控制標準中價值作用。同時，還歸納出血清藥物化學和血清藥理學在體外藥效研究中優(yōu)缺點，大膽提出了中藥血清指紋圖譜同微透析取樣技術(shù)的聯(lián)合使用，從而有效促進中藥血清藥理學和血清藥物化學的蓬勃發(fā)展。

【關(guān)鍵詞】中藥;血清藥理學;血清藥物化學

【中圖分類號】R285.6 【文獻識別碼】A【文章編號】1002-8714（2020）04-0288-01

1 血清藥理學與血清藥理學研究方法的提出

日本著名藥理學家田代真一在20世紀80年代，第一次提出了血清藥理學。田代真一認為中藥經(jīng)口服吸收后，需要借助體內(nèi)胃腸道菌群的代謝和排泄才能充分發(fā)揮重要治療效果。因此，中藥和其他復(fù)方中存在的生物活性成分都屬于中藥經(jīng)過人體生物轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物。當這些產(chǎn)物被人體吸收進入血液以后，將與血漿蛋白結(jié)合，順著血液流向靶器官和組織。所以，傳統(tǒng)的體外藥效學實驗方法，一旦直接將中藥水提液直接加入細胞反應(yīng)體系和離體組織中，其藥物生物活性和血清化學成分遠不如靜脈給藥或整體口服藥物療效。

2 血清藥理學研究

2.1選擇含藥血清供體動物

為了取得可靠的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果，避免和降低動物血清與人類血清在生物、理化等方面的不同，專家學者們需要選擇與人類生物學特性非常接近的動物制備含藥血清，從而更加真實地模擬人體內(nèi)部環(huán)境?，F(xiàn)階段，家兔和大鼠是常見的實驗室動物。在探索菝葜抗炎活性部位時，謝長等人發(fā)現(xiàn)健康動物是不能有效詮釋病理狀態(tài)下藥物入血活性成分和活性成分代謝過程。相關(guān)研究人員需要結(jié)合藥效試驗結(jié)果來進一步確定選擇模型動物還是健康動物。

2.2合理設(shè)計給藥方案

現(xiàn)代方式是在原處方用量基礎(chǔ)上，增加3-20倍，根據(jù)目標成分，對患者連續(xù)給藥5-7個半衰期?；蛘甙凑账幬镏饕煞值摹捌骄€(wěn)態(tài)濃度”來科學規(guī)劃給藥時間。還需要按照“給藥劑量=臨床常用量×培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度×動物等效劑量系數(shù)”方法進行相應(yīng)計算，或者按照臨床日常用藥劑量的5、10、30倍等進行給藥，然而此方法不適合那些劑量大、藥味多的復(fù)方藥。根據(jù)新藥藥理研究技術(shù)要求，對給藥劑量進行了合理設(shè)計，即將含藥血清制成凍干粉，再讓實驗動物服下，經(jīng)過反復(fù)實驗，專家學者發(fā)現(xiàn)，此方法不僅方便保存，而且還有效提高了實驗動物血液藥物濃度，從而達到動物血清中所需的藥物濃度?，F(xiàn)階段，醫(yī)學文獻中提出給藥方案多種多樣，比如7～10d給藥法、2次給藥法以及3次給藥法等。因中藥復(fù)方成分極其復(fù)雜，難以有效測定不同成分給藥后半衰期，目前各文獻給出的報道有所差異，但其最終目的是最大限度地使采血時間處于血液濃度最大峰值。

2.3采集血液

由于中藥成分極其復(fù)雜，不同藥物成分達峰時間存在差異，因此，難以形成統(tǒng)一的采血時間標準。眾所周知，在血液濃度達到高峰期時，采血最佳，這樣可以防止因有效物質(zhì)沒有被吸收或完全代謝而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。李儀奎等學者在分析大量重要藥物動力學參數(shù)時，提出一種流行的給藥方式即連續(xù)服藥3天，一天兩次，最后一次服藥1小時之后進行采血。通常情況下，采血時間大都集中在末次用藥后的半小時到3小時之間，但由于中藥成分非常復(fù)雜，含藥血清隨著時間推移，轉(zhuǎn)變成藥物代謝血清，與此同時，血液中可能存在一部分藥物成分沒有或者超過血藥峰濃度?？傊?，既要考慮中藥吸收轉(zhuǎn)化特點，又要考慮實驗動物消化生理特點，來選定取血時間范圍。通過查閱大量《血清藥理學》論著發(fā)現(xiàn)，很多論著內(nèi)容實際上關(guān)于《血漿藥理學》的;其中還有一小部分學者提出《血漿藥理學》療效超出《血清藥理學》。

2.4處理血液樣品

因血清樣品濃度偏低，且內(nèi)源性雜質(zhì)繁多，樣品量具有一定局限性，通常研究人員將血清進行分離、純化及富集后再進行測定?，F(xiàn)階段，有機溶劑萃取法、熱水浴法、固相萃取法和超濾法都是常見的處理方法，其目的是盡可能地富集移行成分和消除干擾成分。通過仔細對比，從中篩選出最優(yōu)的血清處理方法。

2.5正在制備含藥血清時，運用正交試驗法

竇志華等人用動物做了相關(guān)實驗，進一步研究了取血時間、用藥間隔時間以及血液提出成分等，參照丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶漏出量、含藥血清對肝損傷細胞增殖、以及含藥血清中五味子乙素含量為標準，采用正交試驗對含藥血清的制備方法、化學指標及加權(quán)評分進行研究。

3 血清藥物化學研究

血清樣品分析方法各式各樣，其中最常用的有氣相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法、薄層色譜法、以及原子吸收光譜法等，常用于測定中藥及其復(fù)方提取物的指標性成分。之后，在相同條件下，依次測定含藥血清、對照組、以及空白血清的指紋圖譜，并對空白血清組、中藥組以及含藥血清組的指紋圖譜進行系統(tǒng)分析比較，同時，運用相對完善成熟的分析技術(shù)，如HPLC-DAD-MS/MS等，同時歸屬和結(jié)構(gòu)解析含藥血清中移行成分，進一步鑒定部分成分。然而因中藥進入人體以后，其化學成分的吸收部位、理性性質(zhì)以及吸收效率等都表現(xiàn)出很大不同，所以，人體用藥之后，血清藥物成分不是一成不變的，會隨著時間推移發(fā)生相應(yīng)的組分變化。所以，必須綜合分析不同時間采血點的血清指紋圖譜，準確找到整個入血成分譜隨時間的變化情況，構(gòu)建血清藥物化學動態(tài)圖譜，這樣可以直觀地展示中藥化學成分群在體內(nèi)動態(tài)變化規(guī)律，同時挖掘藥物原型成分之間的相關(guān)性。此外，在分析技術(shù)不斷進步發(fā)展下，研究人員更加頻繁地運用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，從而實現(xiàn)在線分離和鑒定生物體內(nèi)微量中藥成分，同時聯(lián)合使用質(zhì)譜數(shù)據(jù)處理方法，血清活性成分的快速準確測定。中藥指紋圖譜適用于復(fù)雜化學成分的整體穩(wěn)定性分析。它是國內(nèi)外公認的質(zhì)量評價模型，也是中藥血清藥物化學研究的主要方法。過去，在同一項研究中，只有一種動物血清含有一種藥物來鑒定血液成分。指紋圖譜共有峰可以消除個體差異，造成藥物治療過程存在不同。因此，這13個峰被鑒定為共有指紋峰。通過比較血清色譜圖和體外制備的對照品色譜圖，測定三組分的含量。

結(jié)束語

綜上所述，專家學者只有合理運用交叉學科研究成功和先進技術(shù)，才能不斷健全和完善中藥血清藥理學和血清藥物化學，使其得到廣泛應(yīng)用，促進中醫(yī)藥向著現(xiàn)代化方向蓬勃發(fā)展。

參考文獻

盧芳，陳平平，劉樹民.黃連血中移行成分經(jīng)時變化規(guī)律探討[J].中國實驗方劑學雜志，2014，20（22）：108.

向文英，梅朝葉，楊武，等.頭花蓼的血清藥物化學研究[J].中國藥理學通報，2016，32（10）：1476.