賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測蛋白免疫印跡法（WB）條帶特征分析

楊桂霞

摘要：目的：探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。方法：2014年-2018年賓川縣疾病預(yù)防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA-麗珠、梅里埃）和快速檢測法（RT）開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結(jié)果為陽性的標(biāo)本。分析人口學(xué)特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。結(jié)果：（1）共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。（2）gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例（94.88%），p24陽性數(shù)331例（99.70%）;pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例（87.95%），p51陽性數(shù)330例（99.40%），p66陽性數(shù)331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例（90.06%），gp120陽性數(shù)325例（97.89%），gp160陽性數(shù)332例（100.00%）。結(jié)論：賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學(xué)和初中文化水平、已婚男性人群，應(yīng)當(dāng)對該類人群進(jìn)行積極干預(yù);WB帶型全條型病例多，提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發(fā)現(xiàn)。

關(guān)鍵詞：艾滋病HIV抗體檢測;WB確證條帶;特征

【中圖分類號】R415 ??【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A ??【文章編號】1673-9026（2020）06-229-02

我國艾滋病低流行，截至2018年，艾滋病病毒感染病例正在逐年增加[1]。其中，高危人群為男男性行為人群。本研究探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。

1.資料與方法

1.1基本資料

2014年-2018年賓川縣疾病預(yù)防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例，樣本源來自我中心自愿咨詢檢測及賓川縣各醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢的待查樣本。

1.2方法

采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA-麗珠、梅里埃）和快速檢測法（RT）開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結(jié)果為陽性的標(biāo)本。試劑包括：ELISA試劑，珠海麗珠、梅里埃;WB試劑，MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司。實(shí)驗(yàn)儀器包括：全自動蛋白免疫印跡儀。

配制試劑：將1體積的濃縮洗滌緩沖液（20X） 加入到19倍體積的雙蒸餾水中，充分混勻。把1體積的濃縮樣品稀釋緩沖液加入到9倍體積的蒸餾水中，充分混勻，每20毫升加入1g封閉粉，充分混勻。按1：1000比例配好封閉緩沖液稀釋酶結(jié)合物。

試驗(yàn)步驟：

用鑷子小心取出需要的試劑膜，分別放入孵育板槽內(nèi)。每槽內(nèi)加入2 ml 稀釋的洗滌緩沖液，在室溫下（25±3）℃將孵育板置搖床上振蕩孵育至少5min，以吸引器吸出緩沖液。在每槽中加入2ml 配好的封閉緩沖液，分別加入20ul患者血清和強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性對照。蓋上蓋子，于室溫下（25±3） ℃在搖床上過夜（16～20 h） 振蕩孵育。小心掀開蓋子以避免濺出或樣品交叉，以吸引器吸出反應(yīng)液。每槽中加入 2 ml 的洗滌緩沖液，每次置搖床上振蕩5min。棄洗液，再重復(fù)兩次。每槽中加入2ml酶結(jié)合物工作液，蓋上蓋子，于室溫下（25±3）℃在搖床上振蕩孵育 30 min。仔細(xì)打開蓋子，吸出酶結(jié)合物溶液，按步驟6洗滌3次。每槽中介入2ml底物液，蓋上蓋子，于室溫下（25±3）℃在搖床上振蕩孵育15min。小心打開蓋子，吸出底物，以雙蒸餾水洗滌3次，以終止反應(yīng)。用鑷子小心取出試劑膜，放在濾紙上，吸干水分，觀察并記錄結(jié)果。

注：結(jié)果判斷：《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》（2019版本）

1.3觀察指標(biāo)

分析人口學(xué)特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，對正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，對非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示數(shù)據(jù)的分布趨勢，P<0.05表示數(shù)據(jù)的比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1分析人口學(xué)特征

共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。（如表1）

2.2分析HIV-1抗體陽性樣本帶型

gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例（94.88%），p24陽性數(shù)331例（99.70%）;pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例（87.95%），p51陽性數(shù)330例（99.40%），p66陽性數(shù)331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例（90.06%），gp120陽性數(shù)325例（97.89%），gp160陽性數(shù)332例（100.00%）。（如表2）

3.討論與結(jié)論

蛋白印跡試驗(yàn)（WB）帶型特征的影響因素復(fù)雜，包括：個體自身的HIV結(jié)構(gòu)蛋白濃度、抗原性強(qiáng)度、產(chǎn)生抗體的時間、個體對抗原成分的反應(yīng)敏感度、對抗原的免疫應(yīng)答等等[2-3]。本研究顯示，共332例HIV-1抗體陽性病例，男225例，女107例;<20歲5例，20-39歲119例，40-59歲155例，≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例，已婚190例，離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異，P>0.05。gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例（94.88%），p24陽性數(shù)331例（99.70%）;pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例（87.95%），p51陽性數(shù)330例（99.40%），p66陽性數(shù)331例（99.70%）;env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例（90.06%），gp120陽性數(shù)325例（97.89%），gp160陽性數(shù)332例（100.00%）。

綜上所述，賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學(xué)和初中文化水平、已婚男性人群，應(yīng)當(dāng)對該類人群進(jìn)行積極干預(yù);WB帶型全條型病例多，提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發(fā)現(xiàn)。

參考文獻(xiàn)

[1]黃小娟，曹明玉，辛艷泓， 等.155例HIV抗體陽性者ELISA與WB結(jié)果分析[J].中國艾滋病性病，2017，23（5）：458-460.

[2]吳可可，謝愛蓉，王建， 等.利用logistic回歸模型對艾滋病病毒抗體不確定者轉(zhuǎn)歸分析[J].疾病監(jiān)測，2018，33（10）：839-843.

[3]張秀娟，張蕾，李霞.HIV-1抗體不確定者跟蹤監(jiān)測結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（14）：2396-2398.