來曲唑改善體外受精-胚胎移植中卵巢慢反應(yīng)患者的效果及機(jī)制研究

楊素娟 許月明 張杰 姚朝輝 王會(huì)霞 王少卿 郝桂敏

卵巢儲(chǔ)備功能低的患者對(duì)促排卵治療方案不是很敏感。體外受精-胚胎移植的方法比較多，目的是為了改善妊娠結(jié)局，但最后的結(jié)果并不是很滿意。相關(guān)研究顯示，卵巢中的雄激素可以提高卵泡顆粒細(xì)胞受體的表達(dá)水平，從而可以提高卵泡對(duì)卵泡雌激素受體的敏感[1]。來曲唑在臨床上屬于一種芳香化酶抑制劑類藥物，它可以抑制對(duì)卵巢雄激轉(zhuǎn)化為雌激素的過程，增加卵巢內(nèi)雄激素的水平等。在此基礎(chǔ)上，臨床學(xué)者在卵巢慢反應(yīng)患者的促排卵方案中加入了來曲唑，發(fā)現(xiàn)可以有效提高著床率、增加獲卵數(shù)、降低周期取消率[2]。但是相關(guān)方面的報(bào)道較少，結(jié)果也不盡相同。因此，研究來曲唑改善體外受精-胚胎移中卵巢慢反應(yīng)患者的臨床效果及機(jī)制很有意義，可為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。本研究在體外受精-胚胎移中卵巢慢反應(yīng)患者治療中，使用來曲唑進(jìn)行治療，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年7月至2017年2月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院收治的使用常規(guī)長(zhǎng)方案進(jìn)行IVF/ICSI采卵周期并出現(xiàn)卵巢慢反應(yīng)的患者40例，根據(jù)臨床治療方案不同將其分為來曲唑組和rLH組，每組20例。來曲唑組年齡20～38歲，平均年齡(33.3±1.1)歲；rLH組20例，年齡20～40歲，平均年齡(34.1±0.8)歲；2組資料有一定的可比性(P>0.05)，本研究由醫(yī)院倫理委員會(huì)審批。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡20～40歲，月經(jīng)較規(guī)律，基礎(chǔ)FSH<10 U/L；(2)在降調(diào)節(jié)后應(yīng)用重組FSH(rFSH)的第7～8天，有>6個(gè)的卵泡，每個(gè)直徑<10 mm；(3)最近3個(gè)月未接受過卵巢刺激；(4)均知曉同意此次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在子宮內(nèi)膜異位癥、多囊卵巢綜合征(PCOS)的患者；(2)存在自身免疫性疾病或內(nèi)分泌疾病、染色體異常疾病的患者；(3)以往接受過授精/卵胞漿內(nèi)單精子注射治療>2次的患者。

1.3 方法

1.3.1 治療方法：長(zhǎng)方案組(GnRH-a降調(diào))：黃體中期除外，患者妊娠后使用0.1 mg/d GnRH激動(dòng)劑，連續(xù)使用14 d后對(duì)雌二醇、LH、FSH水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行陰道B超，確定垂體降調(diào)節(jié)達(dá)到目標(biāo)后開始使用Gn，在促排卵第7～8天發(fā)生卵泡慢反應(yīng)的患者分為來曲唑組與rLH組。曲唑組在原促排卵基礎(chǔ)上使用2.5 mg/d的來曲唑(國(guó)藥準(zhǔn)字：H20123186，杭州中美華東公司生產(chǎn))進(jìn)行促排卵[3]。rLH組患者使用rLH繼續(xù)進(jìn)行排卵。

1.3.2 標(biāo)本收集：患者在使用來曲唑、rLH、HCG的當(dāng)天、取卵當(dāng)天抽取靜脈血5 ml放置到抗凝生化管中，用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，分別取上清液后冷凍收存[4]。通過陰道B超取卵時(shí)留取清亮無血污染的卵泡液10 ml(有卵子的卵泡腔)，將其中的5 ml用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，去除上清液后將細(xì)胞沉淀物使用PBS配備成懸液,另準(zhǔn)備淋巴細(xì)胞分離液，根據(jù)1∶1的比例將細(xì)胞懸液加入淋巴細(xì)胞分離液中[5]。后用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為30 min，對(duì)顆粒細(xì)胞層吸取后用1∶10的比例加入PBS配置成懸液，用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min。使用紅細(xì)胞裂解液對(duì)其進(jìn)行洗滌與溶解，后用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間15 min[6]。最后加入PBS后用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，將上清液去除。另外，取5 ml卵泡液后用2 000 r/min的速度進(jìn)行離心，時(shí)間為10 min，收集上清液。顆粒細(xì)胞與卵泡液均放置到-80℃的條件下進(jìn)行保存。

1.4 觀察指標(biāo) (1)比較2組患者Gn用藥數(shù)、用藥時(shí)間、促排卵治療反應(yīng)情況。(2)對(duì)2組患者進(jìn)行隨訪，比較2組妊娠情況。(3)比較2組患者雄烯二酮、睪酮、孕激素、雌二醇水平，使用化學(xué)發(fā)光法對(duì)血與卵泡液中的雄烯二酮、睪酮、孕激素、雌二醇水平進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 2組Gn用藥數(shù)、用藥時(shí)間、促排卵治療反應(yīng)情況比較 來曲唑組Gn用藥數(shù)、用藥時(shí)間均少于rLH組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，促排卵治療效果優(yōu)于rLH組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 Gn用藥數(shù)、用藥時(shí)間、促排卵治療反應(yīng)情況比較

2.2 2組妊娠情況比較 來曲唑組周期取消率

表2 妊娠情況比較 n=20

2.3 2組雄烯二酮、睪酮、孕激素、雌二醇水平比較 來曲唑組雄烯二酮、睪酮、孕激素水平高于rLH組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但雌二醇水平卻低于rLH組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 雄烯二酮、睪酮、孕激素、雌二醇水平比較

3 討論

體外受精技術(shù)由于本身的價(jià)值與潛在優(yōu)勢(shì)，近年在臨床上得到了廣泛的發(fā)展。來曲唑在臨床上屬于芳香化酶抑制劑(第三代，高度特異性)，該藥物可以對(duì)雄激素轉(zhuǎn)換為雌激素的過程進(jìn)行抑制，且可以降低血漿中雌激素含量[7,8]。它對(duì)降低雌激素的水平有專一性，不會(huì)受到其他甾體激素的影響，在臨床治療雌激素依賴性腫瘤方面發(fā)揮了重要的作用[9,10]。2000年有學(xué)者開始將來曲唑用于促排卵，隨著對(duì)來曲唑改善體外受精-胚胎移中卵巢慢反應(yīng)患者的臨床效果及機(jī)制研究，它在體外受精-胚胎移中逐漸得到了廣泛的關(guān)注，希望可以成為改善體外受精-胚胎移卵巢慢反應(yīng)患者的首選藥物[11,12]。

研究顯示，來曲唑組Gn用藥數(shù)、用藥時(shí)間

研究顯示，來曲唑組周期取消率

綜上所述，體外受精-胚胎移植中卵巢慢反應(yīng)患者治療中，來曲挫的效果顯著，值得推廣應(yīng)用。